Emne: Eksperimentel åreforkalkning

1. Introduktion: Eksperimentel åreforkalkning

2. Vaskulære læsioner, der udvikler sig med underernæring

3. Ændringer i aorta ved hypervitaminose D

4. Nekrose og aneurisme i aorta hos rotter

5. Nekrotiserende arteritis

6. Ændringer i blodkar med utilstrækkelige mængder protein i maden

7. Dystrofisk-sklerotiske ændringer i blodkar opnået ved hjælp af visse kemikalier

8. Aortitis opnået ved mekaniske termiske og infektiøse læsioner af karvæggen

Litteratur

INTRODUKTION: EKSPERIMENTEL ATEROSCLEROSE

Eksperimentel reproduktion af vaskulære ændringer svarende til menneskelig åreforkalkning opnås ved at fodre dyr med mad, der er rig på kolesterol eller rent kolesterol opløst i vegetabilsk olie. I udviklingen af ​​en eksperimentel model for åreforkalkning var undersøgelser af russiske forfattere af største betydning.

I 1908 A.I. Ignatovsky var den første til at fastslå, at når kaniner fodres med dyrefoder, udvikles der ændringer i aorta, som minder meget om menneskelig åreforkalkning. Samme år blev A.I. Ignatovsky sammen med L.T. Mooro skabte en klassisk model for åreforkalkning, der viser, at når kaniner fodres med æggeblomme i 1y2-61/2 måneder, udvikles atheromatose af aorta, som starter i intima og går over til den midterste membran. Disse data blev bekræftet af L.M. Starokadomsky (1909) og N.V. Stukkay (1910). N.V. Veselkin, S.S. Khalatov og N.P. Anichkov fandt ud af, at den vigtigste aktive del af æggeblommerne er kolesterol (A.I. Moiseev, 1925). Derefter begyndte man at bruge rent OH-kolesterol for at opnå åreforkalkning sammen med æggeblommerne. I. Anichkov og S.S. Khalatov, 1913).

For at opnå aterosklerotiske forandringer i aorta og store kar fodres voksne kaniner dagligt i 3-4 måneder med kolesterol opløst i solsikkeolie. Kolesterol opløses i opvarmet solsikkeolie, så der opnås en 5-10% opløsning, som injiceres i maven opvarmet til 35-40 °; dagligt modtager dyret 0,2-0,3 g kolesterol pr. 1 kg kropsvægt. Hvis en nøjagtig dosis af kolesterol ikke er påkrævet, gives det blandet med grøntsager. Allerede efter 1,5-2 uger udvikles hyperkolesterolæmi hos dyr, som gradvist når meget høje tal (op til 2000 mg% med en hastighed på 150 mg%). I aorta udspiller sig følgende ændringer ifølge N. N. Anichkov (1947). På den indre overflade af karret, 3-4 uger efter starten af ​​forsøget, vises pletter og ovale striber, noget forhøjede. Gradvist (med 60-70 dage) dannes ret store plaques, der rager ind i karrets lumen. De optræder primært i den indledende del af aorta over ventilerne og i buen ved mundingen af ​​de store cervikale arterier; i fremtiden spredes disse forandringer langs aorta i kaudal retning (fig. 14). Antallet og størrelsen af ​​plaques

stigning, de fusionerer med hinanden med dannelsen af ​​kontinuerlig diffus fortykkelse af aortavæggen. De samme plaques er dannet på ventilerne i venstre hjerte, i kranspulsårerne, halspulsårerne og lungearterierne. Der er en aflejring af lipoider i væggene i de centrale arterier i milten og i de små arterier i leveren.

T.A. Sinitsyna (1953) fodrede kaniner i lang tid med æggeblommer (0,2 - 0,4 g kolesterol) fortyndet i mælk for at opnå åreforkalkning af hovedgrenene af hjertets kranspulsårer og injicerede dem samtidig med 0,3 g thiouracil. Hver kanin modtog 170-200 æggeblommer under forsøget. Mikroskopisk undersøgelse på et tidligt tidspunkt afslører en diffus ophobning af lipoider i aortavæggens interstitielle substans, især mellem den indre elastiske lamina og endotelet. I fremtiden opstår store celler (polyblaster og makrofager), der akkumulerer lipoide stoffer i form af dobbeltbrydende dråber kolesterol. Samtidig dannes der på steder, hvor lipoider aflejres, elastiske fibre i store mængder, som spaltes fra den indre elastiske lamina og er placeret mellem cellerne, der indeholder lipoider. Snart dukker pro-kollagen og derefter kollagenfibre op på disse steder (N.N. Anichkov, 1947).

I undersøgelser udført under ledelse af N. N. Anichkov blev processen med omvendt udvikling af de ovenfor beskrevne ændringer også undersøgt. Hvis det efter 3-4 måneders fodring af dyr med kolesterol stoppes, så er der en gradvis resorption af lipoider fra plaques, som hos kaniner varer over to år. På steder med store lipoidophobninger dannes fibrøse plaques med rester af lipoider og kolesterolkrystaller i midten. Pollack (1947) og Fistbrook (1950) indikerer, at med en stigning i dyrenes vægt øges sværhedsgraden af ​​eksperimentel aterosklerose.

I lang tid var kaniner den eneste dyreart, der blev brugt til at opnå eksperimentel åreforkalkning. Dette skyldes det faktum, at for eksempel hos hunde, når de fodrer selv store mængder kolesterol, stiger niveauet af sidstnævnte i blodet lidt, og åreforkalkning udvikler sig ikke. Steiner et al. (1949) har dog vist, at når kolesterolfodring kombineres med hypothyroidisme hos hunde, opstår der signifikant hyperkolesterolæmi, og åreforkalkning udvikler sig. Thiouracil blev administreret til hunde dagligt i 4 måneder med foder i stigende mængder: i løbet af de første to måneder, 0,8 g, i den tredje måned, 1 g og derefter 1,2 g. Samtidig fik hunde dagligt 10 g foder. kolesterol, som tidligere var opløst i ether og blandet med mad; foder blev givet til hunde efter æterens fordampning. Kontrolforsøg viste, at langvarig administration af thiouracil eller kolesterol alene til hunde ikke forårsager signifikant hyperkolesterolæmi (4-00 mg% ved en hastighed på 200 mg%), ej heller åreforkalkning. Samtidig med samtidig administration af thiouracil og kolesterol til hunde udvikles alvorlig hyperkolesterolæmi (op til 1200 mg%) og åreforkalkning.

Topografien af ​​åreforkalkning hos hunde ligner i langt højere grad end hos kaniner menneskelig åreforkalkning: de mest udtalte ændringer i abdominal aorta, der er betydelig åreforkalkning af store grene af hjertets kranspulsårer med en betydelig indsnævring af lumen i hjertet. kar (fig. 15), mange plaques er mærkbare i arterierne i hjernen. Huper (1946) injicerede hunde dagligt i halsvenen med 50 ml af en hydroxylcelluloseopløsning med forskellige viskositeter (5-6 gange plasmaviskositeten) og observerede udviklingen af ​​atheromatose og dystrofiske forandringer i midtermembranen i aorta. Ved vurdering af sværhedsgraden af ​​eksperimentel åreforkalkning bør man tage hensyn til instruktionerne fra Lindsay et al. (1952, 1955), som fandt ud af, at signifikant arteriosklerose ofte forekommer hos ældre hunde og katte. Lipoidaflejringer er normalt ubetydelige, og kolesterol findes ikke i dem.

Bregdon og Boyle (1952) opnåede aterosklerose hos rotter ved intravenøse injektioner af lipoproteiner opnået fra serum fra kolesterolfodrede kaniner. Disse lnpoproteiner blev isoleret, oprenset og koncentreret ved centrifugering ved 30.000 rpm med en forhøjet serumsaltkoncentration på op til 1063. Det overskydende salt blev derefter fjernet ved dialyse. Ved daglige gentagne injektioner i rotter opstår betydelige aflejringer af lipoider i væggen af ​​aorta og store kar. Chaikov, Lindsay, Lorenz (1948), Lindsay, Nichols og Chaikov (1.955) fik åreforkalkning hos fugle ved periodisk at injicere dem subkutant med 1-2 tabletter diethylstilbestrol (hver af tabletterne indeholdt 12-25 mg af lægemidlet); Forsøget varede i 10 måneder.

Den aterosklerose, der udviklede sig på samme tid, adskilte sig ikke i topografi og morfogenese fra kolesterol. Ifølge disse forfattere kan åreforkalkning hos fugle også opnås på sædvanlig vis - ved at fodre med kolesterol.

Reproduktion af aterosklerose hos aber endte ofte i fiasko (Kawamura, citeret i Mann et al., 1953). Imidlertid lykkedes det Mann et al. (1953) at opnå udtalt åreforkalkning af aorta, carotis og femorale arterier hos menneskeaber, når de i 18-30 måneder blev fodret med mad rig på kolesterol, men med utilstrækkelig mængde methionin eller cystin. Daglig tilsætning af 1 g methionin til maden forhindrer udviklingen af ​​åreforkalkning. Tidligere opnåede Reinhart og Greenberg (1949) åreforkalkning hos aber, da de blev holdt i 6 måneder på en diæt med højt kolesteroltal og utilstrækkelig pyridoxin.

Udviklingen af ​​eksperimentel åreforkalkning kan fremskyndes eller omvendt bremses. En række forskere har observeret en mere intensiv udvikling af åreforkalkning ved fodring af dyr med kolesterol kombineret med eksperimentel hypertension. Så N.N. Anichkov (1914) viste, at når lumen af ​​den abdominale aorta indsnævres med V-2/3, accelereres udviklingen af ​​åreforkalkning hos kaniner, der dagligt får 0,4 g kolesterol. Ifølge N.I. Anichkov, mere intense aterosklerotiske ændringer kan opnås hos dyr ved at fodre dem med kolesterol og daglige intravenøse injektioner af en 1:1000 opløsning af adrenalin i en mængde på 0,1-0,15 ml i 22 dage. Willens (1943) gav kaniner 1 g kolesterol dagligt (6 dage om ugen) og placerede dem i oprejst stilling i 5 timer (også 6 gange om ugen), hvilket resulterede i en 30-40% stigning i blodtrykket. Oplevelsen varede fra 4 til 12 uger; hos disse dyr var åreforkalkning signifikant mere udtalt end hos kontroller (som kun blev fodret med kolesterol eller placeret i oprejst stilling).

V.S. Smolensky (1952) observerede en mere intens udvikling af åreforkalkning hos kaniner med eksperimentel hypertension (forsnævring af abdominal aorta; indpakning af den ene nyre med en gummikapsel og fjernelse af den anden).

Esther, Davis og Friedman (1955) observerede en acceleration i udviklingen af ​​åreforkalkning hos dyr fodret med kolesterol kombineret med gentagne injektioner af adrenalin. Kaniner blev dagligt injiceret med epinephrin intravenøst ​​med en hastighed på 25 mg pr. 1 kg kropsvægt. Denne dosis efter 3-4 dage steg til 50 mg pr. 1 kg kropsvægt. Injektionerne varede 15-20 dage. I samme periode fik dyrene 0,6-0,7 g kolesterol. Forsøgsdyr viste mere signifikante aflejringer af lipoider i aorta sammenlignet med kontrolkaniner, der kun modtog kolesterol.

Schmidtman (1932) viste betydningen af ​​øget funktionel belastning af hjertet for udviklingen af ​​åreforkalkning i kranspulsårerne. Rotter modtog dagligt med mad 0,2 g kolesterol opløst i vegetabilsk olie. Samtidig blev dyrene tvunget til at løbe dagligt i et løbebånd. Forsøget varede i 8 måneder. Kontrolrotter fik kolesterol, men løb ikke i tromlen. Hos forsøgsdyr var hjertet ca. 2 gange større end hos kontroller (hovedsageligt på grund af hypertrofi af venstre ventrikelvæg); hos dem var åreforkalkning i kranspulsårerne særlig udtalt: nogle steder var karrets lumen næsten fuldstændig lukket af en aterosklerotisk plak. Graden af ​​udvikling af åreforkalkning i aorta hos forsøgs- og kontroldyr var omtrent den samme.

K.K. Maslova (1956) fandt, at når kaniner blev fodret med kolesterol (0,2 mg dagligt i 115 dage) i kombination med intravenøse injektioner af nikotin (0,2 ml, 1% opløsning dagligt), sker aflejringen af ​​lipoider i aortavæggen meget større omfang, end når kaniner kun får kolesterol. K. K. Maslova forklarer dette fænomen ved, at dystrofiske ændringer i blodkar forårsaget af nikotin bidrager til en mere intensiv ophobning af lipoider i deres væg. Kelly, Taylor og Huss (1952), Prior og Hartmap (1956) angiver, at i områder med dystrofiske ændringer i aortavæggen (mekanisk beskadigelse, kortvarig frysning) er aterosklerotiske forandringer særligt udtalte. Samtidig forsinker og forvrænger aflejringen af ​​lipoider på disse steder forløbet af regenerative processer i karvæggen.

En række undersøgelser har vist visse stoffers forsinkende virkning på udviklingen af ​​eksperimentel åreforkalkning. Så når man fodrer kaniner med kolesterol og samtidig giver dem thyroidin, sker udviklingen af ​​åreforkalkning meget langsommere. V.V. Tatarsky og V.D. Zieperling (1950) fandt, at thyroidin også fremmer en hurtigere regression af atheromatøse plaques. Kaniner blev dagligt injiceret gennem et rør i maven med 0,5 g kolesterol (0,5 % opløsning i solsikkeolie). Efter 3,5 måneders fodring med kolesterol påbegyndtes thyroidin: daglig administration af 0,2 g thyroidin i form af en vandig emulsion i maven gennem en sonde i 1,5-3 måneder. Hos disse kaniner var der i modsætning til kontrolkaninerne (hvortil thyroidin ikke blev administreret) et stejlere fald i hyperkolesterolæmi og en mere udtalt regression af atheromatøse plaques (en mindre mængde lipoider i aortavæggen, deres aflejring hovedsageligt i form af store dråber). Cholin har også en forsinkende effekt på udviklingen af ​​åreforkalkning.

Steiner (1938) gav kaniner i 3-4 måneder 3 gange om ugen med mad 1 g kolesterol. Derudover modtog dyrene 0,5 g cholin dagligt i form af en vandig

emulsioner. Det viste sig, at cholia betydeligt forsinker udviklingen af ​​åreforkalkning. Det er også blevet vist, at der under påvirkning af cholin sker en hurtigere regression af atheromatøse plaques (administration af cholin til kaniner i 60 dage efter en foreløbig 110-dages fodring af dem med kolesterol). Stapers data blev bekræftet af Bauman og Rush (1938) og Morrisop og Rosy (1948). Horlick og Duff (1954) fandt, at udviklingen af ​​åreforkalkning er væsentligt forsinket under påvirkning af heparin. Kaniner fik 1 g kolesterol dagligt sammen med mad i 12 uger. Samtidig modtog dyrene daglige intramuskulære injektioner af 50 mg heparin. Hos behandlede kaniner var aterosklerose meget mindre udtalt end hos kontrolkaniner, der ikke fik heparin. Lignende resultater blev tidligere opnået af Constenides et al. (1953). Stumpf og Willens (1954), Gordon, Kobernick og Gardner (1954) fandt, at kortison forsinkede udviklingen af ​​åreforkalkning hos kolesterolfodrede kaniner.

Duff og Mac Millap (1949) viste, at hos kaniner med alloxan-diabetes er udviklingen af ​​eksperimentel åreforkalkning betydeligt forsinket. Kaniner blev injiceret intravenøst ​​med en 5 % vandig opløsning af alloxip (med en hastighed på 200 mg pr. 1 kg vægt). Efter 3-4 uger (når billedet af diabetes udviklede sig) fik dyrene kolesterol i 60-90 dage (i alt fik de 45-65 g kolesterol). Hos disse dyr var aterosklerose meget mindre udtalt sammenlignet med kontrollen (uden diabetes). Nogle forskere har observeret en kraftig opbremsning i udviklingen af ​​åreforkalkning hos kaniner, som samtidig med at opnå kolesterol blev udsat for generel bestråling med ultraviolette stråler. Hos disse dyr steg serumkolesterolniveauet en smule.

Nogle vitaminer har en væsentlig indflydelse på udviklingen af ​​åreforkalkning. Det er blevet vist (A.L. Myasnikov, 1950; G.I. Leibman og E.M. Berkovsky, 1951), at udviklingen af ​​åreforkalkning er forsinket under påvirkning af ascorbinsyre. G.I. Leibman og E.M. Berkovsky blev givet til kaniner dagligt i 3 måneder med 0,2 g kolesterol pr. 1 kg vægt. Samtidig fik dyrene dagligt ascorbinsyre (0,1 g pr. 1 kg kropsvægt). Hos disse dyr var åreforkalkning mindre udtalt end hos dem, der ikke fik ascorbinsyre. Hos kaniner, der får kolesterol (dagligt 0,2 g i 3-4 måneder) i kombination med D-vitamin (10.000 enheder dagligt gennem hele forsøget), intensiveres og accelereres udviklingen af ​​aterosklerotiske forandringer (A.L. Myasnikov, 1950).

Ifølge Brager (1945) bidrager E-vitamin til en mere intensiv udvikling af eksperimentel kolesterol åreforkalkning: kaniner fik 1 g kolesterol 3 gange om ugen i 12 uger; intramuskulære injektioner af 100 mg vitamin E blev givet samtidigt. Alle H11IX dyr havde højere hyperkolesterolæmi og mere alvorlig åreforkalkning end kaniner, der ikke fik vitamin E.

VASKULÆRE SKADER, DER UDVIKLES MED LIDELSER. ÆNDRINGER I AORTA VED HYPERVITAMINOSE D

Under påvirkning af store doser D-vitamin hos dyr udvikles udtalte ændringer i de indre organer og store kar. Kreitmayr og Hintzelman (1928) observerede betydelige kalkaflejringer i mediet, aorta, hos katte, der blev fodret med 28 mg bestrålet ergosterol dagligt i en måned (fig. 16). Nekrotiske forandringer i mellemslimhinden i aorta efterfulgt af forkalkning blev fundet hos rotter af Dagaid (1930), som dagligt gav dyrene 10 mg bestrålet ergosterol i en 1% opløsning i olivenolie. Meessen (1952) for at opnå nekrose af den midterste membran af aorta gav kaniner i tre uger 5000 sd. vitamin Dg. Under disse forhold fandt kun mikroskopiske ændringer sted. Gilman og Gilbert (1956) fandt dystrofi af aortamediet hos rotter, der fik 100.000 enheder i 5 dage. D-vitamin pr 1 kg kropsvægt. Vaskulær skade var mere intens hos dyr, der fik 40 μg thyroxin i 21 dage før administration af D-vitamin.

NEKROSE OG ANEURYSME I AORTA HOS ROTTER

Ved langvarig fodring af rotter med mad, der indeholder en stor mængde ærter, udvikles dystrofiske ændringer i aortavæggen med den gradvise dannelse af en aneurisme. Bechhubur og Lalich (1952) gav hvide rotter mad, hvoraf 50% var malede eller grove, uforarbejdede ærter. Ud over ærter omfattede kosten gær, kasein, olivenolie, en saltblanding og vitaminer. Dyrene var på en diæt fra 27 til 101 dage. Hos 20 ud af 28 forsøgsrotter udviklede en aortaaneurisme sig i området af dens bue. Hos nogle dyr bristede aneurismen med dannelsen af ​​en massiv hæmotorax. Histologisk undersøgelse afslørede ødem i aortamediet, ødelæggelse af elastiske fibre og små blødninger. Efterfølgende udviklede fibrose af væggen sig med dannelsen af ​​en aneurysmal ekspansion af karret. Panseti og Beard (1952) observerede i lignende eksperimenter udviklingen af ​​en aneurisme i thoraxaorta hos 6 ud af 8 forsøgsrotter. Sammen med dette udviklede dyrene kyphoscoliosis, som opstod som følge af dystrofiske forandringer i hvirvellegemerne. Fem dyr døde efter 5-9 uger af aneurismeruptur og massiv hæmotorax.

Walter og Wirtschaftsr (1956) holdt unge rotter (fra 21 dage efter fødslen) på en diæt på 50 % ærter; derudover omfattede kosten: majs, kasein, mælkesaltpulver, vitaminer. Alt dette blev blandet og givet til dyr. Sidstnævnte blev aflivet 6 uger efter forsøgets start. I modsætning til de ovenfor citerede eksperimenter blev portaen i disse eksperimenter påvirket ikke kun i området af buen, men også i andre afdelinger, herunder den abdominale. Histologisk forekom ændringer i karrene i to parallelle udviklingsprocesser: dystrofi og disintegration af den elastiske ramme på den ene side og udvikling af fibrose på den anden side. Der blev sædvanligvis observeret multiple intramurale hæmatomer. Væsentlige ændringer fandt også sted i lungearterien og hjertets kranspulsårer. Nogle rotter døde på grund af sprængte aneurismer; i en række tilfælde havde sidstnævnte karakter af et stratificerende. Lulich (1956) viste, at de beskrevne ændringer i aorta skyldes P-amipopiopitrit indeholdt i ærter.

NEKROTISK ARTERITIS

Holman (1943, 1946) viste, at hos hunde, der holdes på en kost rig på fedt, fører nyresvigt til udvikling af nekrotiserende arteritis. Dyrene fik mad, hvori 32 dele var okselever, 25 dele - rørsukker, 25 dele - stivelseskorn, 12 dele - olie, 6 dele - fiskeolie; kaolin, salte og tomatjuice blev tilsat til denne blanding. Erfaringen varede 7-8 uger (den tid, der kræves til forekomsten af ​​vaskulære læsioner i nærvær af nyresvigt). Nyresvigt blev opnået på forskellige måder: bilateral nefrektomi, subkutane injektioner af en 0,5 % vandig opløsning af uraniumnitrat med en hastighed på 5 mg pr. 1 kg dyrevægt eller intravenøse injektioner af en 1 % vandig opløsning af kviksølvchlorid med en hastighed på 3 mg pr. 1 kg dyrevægt. Nekrotiserende arteritis udviklede sig hos 87 % af forsøgsdyrene. I hjertet var der en udtalt parietal endokarditis. Nekrotiserende arteritis udviklede sig kun, når fodring af dyr med en fedtrig kost blev kombineret med nyreinsufficiens. Hver af disse faktorer hver for sig forårsagede ikke væsentlig skade på væggene i blodkarrene.

VASKULÆRE ÆNDRINGER, DER OPKOMMER MED UTILSTRÆKKELIG MÆNGDE PROTEIN I FØDEVARER

Hanmap (1951) gav hvide mus mad med følgende sammensætning (i procent): saccharose - 86,5, kasein - 4, saltblanding - 4, vegetabilsk olie - 3, fiskeolie - 2, cystin - 0,5; vandfri blanding af glucose - 0,25 (0,25 g af denne blanding indeholdt 1 mg riboflavin), para-aminobepzosyre - 0,1, inositol - 0,1. 3 mg calciumpantothenat, 1 mg nikotinsyre, 0,5 mg thiaminhydrochlorid og 0,5 mg pyridoxinhydrochlorid blev tilsat til 100 g af kosten. Musene døde inden for 4-10 uger. Der blev observeret skader på aorta, lungearterie og kar i hjertet, leveren, bugspytkirtlen, lungerne og milten. På et tidligt stadium dukkede et basofilt, homogent stof op i karrenes intima, der dannede plaques, der ragede noget ud under endotelet: der var fokale læsioner af den midterste membran med ødelæggelse af elastiske fibre. Processen endte med udviklingen af ​​arteriosklerose med aflejring af kalk i områder med dystrofi.

DYSTROFISK-SCLEROTISKE ÆNDRINGER AF FARTØJER OPNÅET VED HJÆLP AF NOGLE KEMIKALIER

(adrenalin, nikotin, tyramin, difteritoksin, nitrater, højmolekylære proteiner)

Josué (1903) viste, at efter 16-20 intravenøse injektioner af adrenalin udvikler kaniner betydelige dystrofiske forandringer hovedsageligt i det midterste lag af aorta, der ender med sklerose og i nogle tilfælde aneurismeudvidelse. Denne observation blev senere bekræftet af mange forskere. Erb (1905) injicerede kaniner i ørets vene hver 2.-3. dag, 0,1-0,3 mg adrenalin i en 1% opløsning; injektioner fortsatte i flere uger og endda måneder. Rzhenkhovsky (1904) administreret til kaniner intravenøst ​​3 dråber af en opløsning af adrenalin 1: 1000; injektioner blev foretaget dagligt, nogle gange med intervaller på 2-3 dage i 1,5-3 måneder. B. D. Ivanovsky (1937), for at opnå adrenalin sklerose, administreret til kaniner intravenøst ​​dagligt eller hver anden dag en opløsning af adrenalin I: 20.000 i en mængde på 1 til 2 ml. Kaniner fik op til 98 injektioner. Som et resultat af langvarige injektioner af adrenalin udvikles sklerotiske ændringer naturligt i aorta og store kar. Det er hovedsageligt den midterste skal, der rammes, hvor der udvikles fokal nekrose, efterfulgt af udvikling af fibrose og forkalkning af nekrotiske områder.

Ziegler (1905) observerede i en række tilfælde fortykkelse af intima, nogle gange betydelig. Aortaaneurismer kan forekomme. Områder med sclerose og forkalkning bliver synlige makroskopisk efter 16-20 injektioner. Signifikante sklerotiske forandringer udvikles også i nyre- (Erb), iliaca, carotis (Ziegler) arterier og i intraorgangrene af store arterielle trunker (BD Ivanovsky). B.D. Ivanovsky viste, at under påvirkning af gentagne injektioner af adrenalin forekommer betydelige ændringer i små arterier og endda kapillærer. Sidstnævntes væg bliver tykkere, skleroserer, og kapillærerne støder ikke længere, som i normen, direkte til organernes parenkymale elementer, men er adskilt fra dem af et tyndt bindevævslag.

Walter (1950), der studerede ændringer i blodkar ved intravenøs administration af adrenalin til hunde i store doser (8 ml af en opløsning på 1:1000 hver 3. dag), viste, at der allerede inden for de normale 10 dage og endnu tidligere var flere blødninger. observeret i den midterste membran af thoraxaorta, og også i de små arterier i hjertet, maven, galdeblæren, nyrerne, tyktarmen. Der er fibrinoid nekrose af medierne og alvorlig paparteritis med perivaskulær cellulær reaktion. Foreløbig administration af diabsiamin til dyr forhindrer udviklingen af ​​disse ændringer.

Davis og Uster (1952) viste, at med en kombination af intravenøse injektioner af ep og efr og a (25 mg pr. 1 kg kropsvægt) og thyroxin (subkutan administration dagligt med 0,15 mg pr. 1 kg legemsvægt) i kaniner, sklerotisk ændringer i aorta udtrykkes særligt skarpt. Med daglige subkutane injektioner af 500 mg ascorbinsyre til dyr er udviklingen af ​​arteriosklerose mærkbart forsinket. Foreløbig fjernelse af skjoldbruskkirtlen hæmmer udviklingen af ​​arteriosklerose forårsaget af epinephrin (adrenalin). Huper (1944) observerede dystrofiske forandringer i den midterste membran af aorta og store kar med forkalkning og cystedannelse hos hunde, der overlevede histaminchok Histamin blev administreret subkutant i en blanding med bivoks og mineralolie i en hastighed på 15 mg pr. af dyrevægt (se opnåelse af mavesår ved hjælp af histamin).

Tidligere viste Hyoper og Lapdsberg (1940), at når hunde blev forgiftet med er itrol tetra nitrat O "m (indføring gennem munden i 32 uger dagligt i stigende doser fra 0,00035 g til 0,064 g) eller nitrogen n ca sur l y mnatriem ( indføring gennem munden i flere uger ved 0,4 g daglig) er der udtalte dystrofiske forandringer, hovedsageligt i midtermembranen af ​​lungearterien og dens forgreninger. Betydelige kalkaflejringer fører i nogle tilfælde til en kraftig indsnævring Huper (1944) observerede udviklingen af nekrose af det midterste lag af aorta, efterfulgt af forkalkning og dannelse af cyster hos hunde, som blev injiceret i venen med en opløsning af methylcellgoloza i stigende mængder (fra 40 til 130 ml) 5 gange om ugen. varede i seks måneder.

Aortaforandringer svarende til de ovenfor beskrevne kan opnås hos dyr med gentagne injektioner af nikotin. A. 3. Kozdoba (1929) injicerede 1-2 ml nikotinopløsning i ørevenen på kaniner dagligt i 76-250 dage (den gennemsnitlige daglige dosis er 0,02-1,5 mg). Der var hypertrofi af hjertet og dystrofiske ændringer i arterien, ledsaget af aneurismeudvidelse. Alle dyr havde en signifikant stigning i binyrerne. E. A. Zhebrovsky (1908) fandt nekrose af mellemslimhinden i aorta, efterfulgt af forkalkning og sklerose hos kaniner, som han anbragte dagligt i 6-8 timer under en hue fyldt med tobaksrøg. Forsøgene fortsatte i 2-6 måneder. KK Maslova (1956) noterede dystrofiske ændringer i aortavæggen efter daglige intravenøse injektioner af 0,2 ml 1% nikotinopløsning til kaniner i 115 dage. Bailey (1917) opnåede udtalte dystrofiske ændringer i den midterste membran af aorta og store arterier med nekrose og multiple aneurismer med daglig intravenøs administration af 0,02-0,03 ml difteritoksin til kaniner i 26 dage.

Duff, Hamilton og Msper (1939) observerede udviklingen af ​​nekrotisk arteritis hos kaniner under påvirkning af flere injektioner af tyramin (intravenøs administration af 50-100 mg af lægemidlet i form af en 1% opløsning). Forsøget varede i 106 dage. Hos størstedelen af ​​kaniner forekom udtalte forandringer i aorta, store arterier og arterioler i nyrerne, hjertet og hjernen, og i hvert enkelt tilfælde var karrene i ikke alle tre organer, men af ​​et hvilket som helst, normalt påvirket. I aorta var der nekroser af midtermembranen, ofte meget betydelige; lignende forandringer fandtes i nyrernes store kar. Arterioloiekrose blev observeret i hjertet, nyrerne og hjernen efterfulgt af hyalniose af den vaskulære steppe. Nogle kaniner udviklede en massiv hjerneblødning på grund af arteriolomyokrose.

AORTITIS OPNÅET VED MEKANISKE TERMISKE OG SMITTEFORSKADELIGE SKADER PÅ DEN VASKULÆRE VÆG

For at studere mønstrene for forløbet af inflammatoriske og reparative processer i aortavæggen bruger nogle forskere mekanisk skade på karret. Prpor og Hartman (1956), efter at have åbnet bughulen, adskiller aorta og beskadiger bøffen ved at gennembore den med en tyk nål med en skarp, buet ende. Baldwin, Taylor og Hess (1950) beskadiger aortavæggen ved kortvarig udsættelse for lave temperaturer. For at gøre dette eksponeres aorta i abdominalområdet, og et smalt rør påføres væggen, hvori kuldioxid tilføres. Aortavæggen fryses inden for 10-60 sekunder. I slutningen af ​​den anden uge efter frysning, på grund af nekrose af midtermembranen, udvikles en aortaaneurisme. I halvdelen af ​​tilfældene sker der forkalkning af de beskadigede områder. Ofte er der en metaplaetisk dannelse af knogler og brusk. Sidstnævnte vises ikke tidligere end den fjerde uge efter skaden, og knoglen - efter 8 uger. A. Solovyov (1929) kauteriserede væggen af ​​aorta og halspulsårer med en rødglødende termokauteri. Schlichter (1946) For at opnå nekrose af aorta hos hunde brændte han dens væg med en brænder. Udtalte ændringer i den indre membran (blødning, nekrose) forårsagede i nogle tilfælde et brud på karret. Hvis dette ikke skete, udviklede vægsklerose sig med forkalkning og dannelse af små hulrum. N. Andrievich (1901) skadede arteriernes væg ved at kauterisere den med en opløsning af sølvnitrat; i en række tilfælde blev det angrebne segment derefter pakket ind i celloidin, hvilket irriterede karvæggen og gjorde skaden mere betydelig.

Talke (1902) modtog purulent betændelse i karvæggen ved at indføre en kultur af stafylokokker i det omgivende væv. Tidligere har Krok (1894) vist, at purulent arteritis opstår, når en kultur af mikroorganismer kun administreres intravenøst ​​til dyr, hvis karvæggen tidligere er beskadiget. F.M. Khaletskaya (1937) studerede dynamikken i udviklingen af ​​infektiøs aortitis, som udvikler sig som et resultat af overgangen af ​​den inflammatoriske proces fra pleura til aortavæggen. Et fistelrør blev indsat i pleurahulen mellem 6. og 7. ribben hos kaniner. Hullet forblev åbent i 3-5 dage, og i nogle forsøg i tre måneder. Efter 3-5 dage udviklede der sig fibrøs-purulent pleurisy og pleuraempyem. Overgangen af ​​processen til væggen af ​​aorta blev ofte observeret. Hos sidstnævnte optrådte først nekrose af midtermembranen; de udviklede sig tidligere, end den inflammatoriske proces spredte sig til aorta, og ifølge F.M. Khaletskaya, var forårsaget af vasomotoriske lidelser på grund af forgiftning (primær dystrofi og nekrose af midtermembranen). Hvis suppuration spredte sig til aorta, blev de ydre, mellemste og indre membraner successivt involveret i den inflammatoriske proces med udvikling af sekundære nekrotiske ændringer.

BULLETIN OF UDMURT UNIVERSITY

BIOLOGI. JORDVIDENSKABER

UDC 612.017.1

I.V. Menshikov, K.V. Fomina, L.V. Beduleva, V.G. Sergeev EKSPERIMENTEL MODEL AF ATHEROSCLEROSE HOS ROTTER,

FORÅRSAGET AF IMMUNISATION MED NATIVE MENNESKELIGE LIPOPROTEINER

Immunisering af rotter med naturligt humant LDL forårsager udviklingen af ​​en autoimmun reaktion mod naturligt LDL, ledsaget af dyslipoproteinæmi, en stigning i volumen af ​​perivaskulært og epicardialt fedtvæv og aterosklerotisk skade på aortavæggen, hvilket understøtter hypotesen om, at en autoimmun reaktion mod naturligt LDL er årsagen til denne sygdom. Aterosklerose hos rotter induceret ved immunisering med naturligt LDL er en passende eksperimentel model for human aterosklerose.

Nøgleord: aterom, åreforkalkning, autoimmune reaktioner, dyslipidæmi, native lavdensitetslipoproteiner, eksperimentel model for åreforkalkning hos rotter, epikardiefedt.

Introduktion

Åreforkalkning ligger til grund for en lang række hjerte-kar-sygdomme og er forbundet med mange autoimmune og infektionssygdomme. På trods af adskillige undersøgelser forbliver ætiologien og patogenesen af ​​denne sygdom ukendt. De fleste af de nuværende hypoteser er baseret på det centrale faktum om forholdet mellem nedsat lipoproteinmetabolisme og dannelsen af ​​aterosklerotiske plaques. Men hvorfor og hvordan en krænkelse af lipoproteinmetabolisme opstår, hvilket fører til udviklingen af ​​sygdommen, forbliver det vigtigste uforklarede spørgsmål om atherogenese. Mange eksterne og interne faktorer, der fører til nedsat lipoproteinmetabolisme, diskuteres i litteraturen, disse data er præsenteret i en række anmeldelser. En af de mest attraktive hypoteser i dag er hypotesen om den autoimmune natur af åreforkalkning, ifølge hvilken årsagen til liper udviklingen af ​​en autoimmun reaktion mod modificerede (oxiderede) lavdensitetslipoproteiner (oLDL). De resulterende immunkomplekser af autoantistoffer med oLDL danner effektormekanismer, der fører til inflammation i karvæggen. Ifølge denne hypotese bør niveauet af oLDL og autoantistoffer mod dem være forbundet med udviklingen af ​​åreforkalkning. Der blev dog ikke fundet nogen entydig sammenhæng mellem dem, og de tilgængelige data om niveauet af autoantistoffer mod oLDL hos patienter med åreforkalkning og raske mennesker er modstridende. Disse fakta sår tvivl om ideen om en autoimmun reaktion mod oLDL som årsag til induktion og udvikling af åreforkalkning. Samtidig er fakta om eksistensen af ​​normale autoantistoffer mod nLDL kendt, hvis niveau stiger betydeligt i åreforkalkning. I vores tidligere undersøgelser viste det sig, at der hos mennesker med åreforkalkning (patienter med koronar hjertesygdom) sammenlignet med raske mennesker var et signifikant højere niveau af antistoffer mod nLDL og et lavere niveau af antistoffer mod oLDL i blodet. Baseret på disse og andre fakta formulerede vi en hypotese om, at hovedårsagen til dyslipoproteinæmi og atherogenese er udviklingen af ​​en autoimmun reaktion på naturligt forekommende og ikke til oxideret LDL. Vores hypotese understøttes også af relativt nyere forskningsresultater, der indikerer, at autoimmune T-celler, der genkender epitoper af ApoB100 nLDL-proteinet, bidrager til udviklingen af ​​åreforkalkning, mens hæmning af T-celle-responset mod naturligt LDL undertrykker udviklingen af ​​åreforkalkning. En af de mest overbevisende måder at teste en hypotese rettet mod at bestemme den ætiologiske faktor i udviklingen af ​​en bestemt sygdom er muligheden for at få denne faktor til at udvikle sygdommen hos forsøgsdyr. For at teste hypotesen inducerede vi derfor en autoimmun respons på nLDL hos rotter ved at immunisere dem med naturligt humant lavdensitetslipoprotein (hLDL). Ifølge hypotesen skulle udviklingen af ​​en autoimmun reaktion mod nLDL føre til udviklingen af ​​dyslipoproteinæmi, vaskulære atheromer som de mest signifikante tegn, der karakteriserer udviklingen af ​​åreforkalkning hos mennesker.

Materialer og forskningsmetoder

Wistar-rotter blev immuniseret med nativt humant LDL (Sigma) som en del af inkomplet Freunds adjuvans (NAF) (Sigma) én gang, intradermalt i en dosis på 200 μg. Kontroldyr blev injiceret med NAF. Blod blev taget ugentligt i 13 uger ved hjertepunktur. Den sidste blodprøve blev udført 20 uger efter immunisering. I blodserumet blev niveauet af antistoffer mod humant nLDL, niveauet af totalt kolesterol, LDL-kolesterol og HDL-kolesterol bestemt. Antistoffer mod nLDL blev bestemt ifølge metoden beskrevet af Khlyustov V.N., 1999. Totalt kolesterol blev bestemt ved den enzymatiske metode under anvendelse af Cholesterol FS-kittet (Diakon-DS, Rusland). LDL- og HDL-kolesterol blev bestemt ved en direkte homogen metode under anvendelse af kommercielle kits "LDL-cholesterol", "HDL-cholesterol" (Human). Dataene blev præsenteret som forskellen (A) af middelværdierne mellem gruppen af ​​forsøgsdyr og kontroldyr. Mann-Whitney testen blev brugt til at bestemme betydningen af ​​forskelle. 20 uger efter immunisering blev hver rotte intrakardialt perfunderet med Immunofix-fikseringsmiddel. Hjertet og en del af aorta blev farvet for lipider med Sudan III (modificeret af Holman, 1958). Den anden del af aorta blev underkastet histologisk undersøgelse, hvortil karrene blev indlejret i paraffin. Sektioner 6 µm tykke blev farvet med hæmatoxylin-eosin.

Resultater og diskussioner heraf

Kinetik af antistoffer mod nLDL, ændringer i niveauet af LDL-kolesterol, HDL-kolesterol under immunresponset forårsaget af immunisering af rotter med naturligt humant LDL. For at teste hypotesen om, at udviklingen af ​​en autoimmun reaktion mod naturligt LDL er årsagen til atherogenese, forsøgte vi at inducere en autoimmun reaktion mod naturligt LDL hos rotter. Normalt anvendes immunisering med heterologe antigener svarende til selvantigener til at inducere autoimmune sygdomme hos forsøgsdyr. Det er almindeligt accepteret, at årsagen til udviklingen af ​​en autoimmun reaktion ved immunisering med et heterologt antigen er antigenets evne til at forårsage aktivering af lymfocytter, der krydsreagerer med autoantigenet, eller at aktivere autoreaktive lymfocytter gennem idiotype-antiidiotypiske interaktioner, som vi tidligere har vist i eksperimentelle modeller af autoimmun hæmolytisk anæmi og kollagen-induceret arthritis hos rotter. . For at inducere en autoimmun respons mod naturligt LDL hos rotter brugte vi derfor heterologt (humant) naturligt LDL.

En enkelt immunisering af rotter med nativt humant LDL i NAF i en dosis på 200 μg forårsagede en stigning i niveauet af antistoffer mod humant nLDL, hvilket opstod inden for 13 uger efter immunisering (fig. 1). Efter 20 uger forblev antistofniveauerne høje. Væksten af ​​antistoffer mod nativt humant LDL under immunresponset var gradvis, hver ny stigning i niveauet af antistoffer mod naturligt humant LDL var spontan og nåede et maksimum hurtigere end den foregående. En sådan selvopretholdende, selvforstærkende karakter af udviklingen af ​​immunresponset er karakteristisk for udviklingen af ​​overfølsomhedsreaktioner og autoimmune reaktioner.

En stigning i niveauet af antistoffer mod nLDL i immuniserede rotter blev ledsaget af en stigning i niveauet af LDL-kolesterol og et fald i HDL-kolesterol i forhold til kontroldyr (fig. 1). Observerede ændringer i lipoproteinmetabolisme er et generelt accepteret tegn på udvikling af åreforkalkning hos mennesker.

Ændringen i niveauet af LDL-kolesterol og HDL-kolesterol i blodet hos rotter, såvel som ændringen i niveauet af antistoffer mod naturligt forekommende humant LDL, havde en trinvis karakter. Samtidig bliver ændringen i niveauet af LDL- og HDL-kolesterol dybere, bliver mere udtalt med en ny fase af antistofvækst (fig. 1). Sammenligning af kinetikken af ​​antistoffer mod nLDL og niveauet af LDL- og HDL-kolesterol under immunresponset indikerer klart deres forhold. Udviklingen af ​​dyslipoproteinæmi, tilstedeværelsen af ​​en sammenhæng mellem ændringer i niveauet af antistoffer mod native lipoproteiner og dyslipidæmi under immunresponset indikerer udviklingen hos rotter immuniseret med naturligt humant LDL af en autoimmun reaktion på naturligt rotte-LDL.

Ris. Fig. 1. Kinetik af antistoffer mod naturligt humant LDL, ændringer i niveauet af LDL-kolesterol og HDL-kolesterol i blodet fra rotter immuniseret med naturligt LDL. Resultaterne præsenteres som middelforskellen mellem en gruppe nLDL-immuniserede rotter (n=8) og en gruppe kontrolrotter (n=8). * - signifikante forskelle sammenlignet med kontroldyr s< 0,05, критерий Манна-Уитни

Udvikling af aorta-atherom hos rotter immuniseret med naturligt humant LDL. Hos kontrolrotter, som blev injiceret med UCNP én gang, blev der ikke fundet ændringer i aortas struktur. Intima af rotteaorta præsenteres som et enkelt endotellag, som er tæt knyttet til den indre elastiske membran; aortamediet består af flere lag af muskelceller og en ekstracellulær kollagenmatrix adskilt af elastinplader; aorta adventitia er repræsenteret af binde- og fedtvæv (fig. 2a).

Histologisk analyse af aorta hos forsøgsrotter afslørede ændringer, der er karakteristiske for aterosklerose. Der er flere typer ændringer i aortavæggen, som kan betragtes som forskellige stadier i udviklingen af ​​aterosklerotiske læsioner. På fig. 2b viser fortykkelse af intima, uorganisering af medierne, ophobninger af leukocytter findes i intima og mellem medierne og adventitia, den elastiske lamina er ikke synlig, hvilket kan repræsentere tidlig aterosklerotisk vaskulær skade. Figur 2c viser et udsnit af aorta med dybere svækkelser af intima-mediekomplekset. Der er områder med fuldstændig ødelæggelse af intima, hævelse og eksponering af medierne. En enkelt immunisering af rotter med naturligt humant LDL i UCAF forårsager således skade på aortavæggen, typisk for aterosklerose.

Forøgelse i volumen af ​​epikardiet og perivaskulært fedtvæv hos rotter immuniseret med naturligt humant LDL. En enkelt immunisering af rotter med naturligt humant LDL forårsagede en stigning i volumen af ​​epikardiefedt (fig. 3). På fig. 3 kan det ses, at kontroldyrets hjerte næsten ikke har epikardiefedt, mens det hos forsøgsdyr observeres dets betydelige volumen. Stigningen i epikardiefedtvolumen hos rotter immuniseret med hLDL er 250±35%.

Ris. Fig. 2. Aortavæg farvet med hæmatoxylin-eosin: a - aortavæg af kontrolrotter; b - aortavæg hos rotter immuniseret med nLDL. Fortykkelse af intima, uorganisering af medierne, ophobning af leukocytter i karvæggen observeres. Elastisk lamina er ikke defineret; c - aortavæg i rotter immuniseret med nLDL. Et sted med fuldstændig nedbrydning af intima, hævelse og eksponering af medierne. Linjelængde = 1200 qt

Ris. 3. Hjerte, kontrolrotter (1) og rotter immuniseret med human nLDL (2), farvet med sudan. Mørke områder - epikardiefedt

Forsøgsdyr viste en stigning i volumen af ​​perivaskulært fedtvæv - antallet og størrelsen af ​​adipocytter af hvidt fedtvæv i adventitia (fig. 4 a, b). Det er vigtigt at bemærke, at fordelingen af ​​lipider i adipocytterne i det brune fedtvæv i adventitia af aorta også ændrede sig. I nogle adipocytter af brunt fedtvæv, små lipiddråber

sædvanligvis spredt gennem cytoplasmaet, blev større, fusionerede og lokaliseret i midten af ​​cellerne (fig. 4c, d). Det kan antages, at der under eksperimentets betingelser ikke kun skete en stigning i antallet af celler af brunt fedtvæv i aorta, men også deres gradvise transformation til adipocytter af hvidt fedtvæv.

Ris. Fig. 4. Perivaskulært fedtvæv: a - adipocytter af aorta hos kontroldyr; b - adipocytter af aorta hos rotter immuniseret med nLDL; c, d - transformation af brune fedtvævsadipocytter til hvide fedtvævsadipocytter i adventitia og periadventitia af aorta hos rotter immuniseret med nLDL. (1*, 2*, 3* - successive stadier af adipocyttransformation); 1 - medier; 2 - adventitia; 3 - periadventitia. Linjelængde (A, B, C) = 1400 qt, D - 420 qt

For nylig er der blevet lagt stor vægt på rollen som epikardiet og perivaskulært fedtvæv i patogenesen af ​​aterosklerose. En stigning i volumen af ​​epicardialt fedtvæv betragtes nu som en markør for koronar aterosklerose og en prognostisk indikator for dens udvikling. Det perivaskulære fedtvæv, der omgiver arterierne, er også involveret i den lokale stimulering af aterosklerotisk plakdannelse. In vitro og in vivo resultater har vist, at perivaskulært fedtvæv har pro-inflammatoriske egenskaber og er i stand til at fremkalde åreforkalkning i karvæggen, hvilket understøtter hypotesen om, at skade i karvæggen er induceret udefra. Derfor kan de skader på den indre væg af aorta hos rotter, som vi har identificeret, være forårsaget af reaktionen af ​​perivaskulært fedtvæv på immunisering af rotter med humant nLDL.

I det væsentlige har vi fået en ny eksperimentel model for åreforkalkning. På trods af, at mange eksperimentelle modeller af åreforkalkning er kendt, er der i dag ingen passende model, der fuldt ud ville gengive alle stadier og tegn på menneskelig åreforkalkning. Den eksperimentelle model for aterosklerose hos rotter, udviklet af os, forårsaget af immunisering med naturligt humant LDL, reproducerer de vigtigste metaboliske, patofysiologiske tegn på sygdommen og er således en passende eksperimentel model for human aterosklerose. Den eksperimentelle model åbner mulighed for at studere årsagssammenhænge mellem de processer, der er involveret i patogenesen af ​​aterosklerose; mekanismer for afbrydelse af naturlig tolerance over for naturligt LDL, der fører til aterosklerose; associationer af åreforkalkning med infektioner og andre autoimmune sygdomme.

Immunisering af rotter med naturligt humant LDL forårsager således udviklingen af ​​en autoimmun reaktion mod naturligt LDL, ledsaget af dyslipoproteinæmi, en stigning i volumen af ​​perivaskulært og epicardialt fedtvæv og aterosklerotisk skade på aortavæggen, hvilket understøtter hypotesen om, at en autoimmun reaktion mod indfødte

LDL er årsagen til denne sygdom. Aterosklerose hos rotter induceret ved immunisering med naturligt humant LDL er en passende eksperimentel model for human aterosklerose.

Tak

Arbejdet blev udført inden for rammerne af den statslige ordre fra Ministeriet for Uddannelse og Videnskab i Den Russiske Føderation for forskning om emnet "Autoimmune mekanismer for åreforkalkning. Ny eksperimentel model for åreforkalkning hos rotter” nr. 4.5505.2011.

BIBLIOGRAFI

1. Masia M., Padilla S., Robledano C. et al. Evaluering af endotelfunktion og subklinisk aterosklerose i forbindelse med hepatitis C-virus hos HIV-inficerede patienter: en tværsnitsundersøgelse // BMC Infect. Dis. 2011 bind. 11. S. 265.

2. Muhlestein J.B. Kronisk infektion og koronar åreforkalkning vil hypotesen nogensinde virkelig slå ud? // J. Am. Saml. cardiol. 2011 bind. 58. s. 2007-2009.

3. Stassen F.R., Vainas T., Bruggeman C.A. infektion og åreforkalkning. Et alternativt syn på en forældet hypotese // Pharmacol. Rep. 2008 bind. 60. S. 85-92.

4. Symmons D.P., Gabriel S.E. Epidemiologi af CVD ved reumatisk sygdom, med fokus på RA og SLE, Nat. Rev. Rheumatol. 2011 bind. 7. s. 399-408.

5. Galkina E., Ley K. Immune and inflammatory Mechanisms of Atherosclerosis // Annu Rev. Immunol. 2009 bind.

6. Libby P., Okamoto Y., Rocha V.Z. et al. Inflammation i åreforkalkning: Overgang fra teori til praksis // Circ. J. 2010. Bd. 74. S. 213-220.

7 Shah P.K. Restrisiko og højdensitetslipoproteinkolesterolniveauer: er der en sammenhæng? // Rev. Cardiovasc. Med. 2011 bind. 12. S. 55-59.

8. Steinberg D. LDL-modifikationshypotesen om atherogenese: en opdatering // J. Lipid Res. 2009 bind. 50. s. 376-381.

9. Klimov A.N. Autoimmun teori om atherogenese og begrebet modificerede lipoproteiner // Vestn. Akad. Med. Videnskab SSSR. 1990 bind. 11. S. 30-36.

10. Klimov A.N, Nagornev V.A. Udvikling af kolesterolbegrebet atherogenese fra Anitchkov til vore dage // Pediatr. Pathol.Mol. Med. 2002 bind. 21. s. 307-320.

11. Virella G., Lopes-Virella M.F. Aterogenese og det humorale immunrespons på modificerede lipoproteiner // Aterosklerose. 2008 bind. 200. S. 239-246.

12. Gounopoulos P., Merki E., Hansen L.F. et al. Antistoffer mod oxideret lavdensitetslipoprotein: epidemiologiske undersøgelser og potentielle kliniske anvendelser ved hjerte-kar-sygdomme // Minerva Cardioangiol. 2007 bind. 55. s. 821-837.

13. Mandal K., Jahangiri M., Xu Q. Autoimmune mekanismer for åreforkalkning // Handb. Exp. Pharmacol. 2005 bind. 170. S. 723-743.

14. Matsuura E., Kobayashi K., Inoue K. et al. Intravenøst ​​immunoglobulin og åreforkalkning // Clin. Rev. Allergi Immunol. 2005. bind 29. s. 311-319.

15. Weinbrenner T., Cladellas M., Covas M.I. et al. Højt oxidativt stress hos patienter med stabil koronar hjertesygdom // Aterosklerose. 2003 bind. 168. S. 99-106.

16. Khlyustov V.N. Kvantitativ bestemmelse af autoantistoffer mod lavdensitetslipoproteiner // Klinisk laboratoriediagnostik. 1999. nr. 4. S. 17-20.

17. Menshikov I.V., Makarova M.I., Bulatova N.I. og andre autoimmune reaktioner i patogenesen af ​​aterosklerose // Immunologi. 2010. nr. 5. S. 242-246.

18. Hermansson A., Ketelhuth D., Strodthoff D. et al. Hæmning af T-cellerespons på naturligt lavdensitetslipoprotein reducerer aterosklerose // J. Exp. Med. 2010 bind. 207. s. 1081-1093.

19. Rose N.R. Infektion, efterligninger og autoimmun sygdom. J.Clin. Investere. 2001 bind. 107. R. 943-944.

20. Wucherpfennig K.W. Mekanismer til induktion af autoimmunitet ved hjælp af infektiøse stoffer // J. Clin. Investere. 2001 bind. 108. s. 1097-1104.

21. Menshikov I., Beduleva L. Beviser til fordel for en rolle som idiotypisk netværk i autoimmun hæmolytisk anæmi induktion: teoretiske og eksperimentelle undersøgelser // Int. Immunol. 2008 bind. 20. s. 193-198.

22. Beduleva L., Menshikov I. Rolle af idiotype-anti-idiotype-interaktioner i induktionen af ​​kollagen-induceret arthritis hos rotter // Immunbiologi. 2010 bind. 215. S. 963-970.

23. Djaberi R., Schuijf J.D., van Werkhoven J.M. et al. Relation mellem epikardiet fedtvæv og koronar aterosklerose // Am. J. Cardiol. 2008 bind. 102. S. 1602-1607.

24. Verhagen S.N., Visseren F.L., Perivaskulært fedtvæv som årsag til åreforkalkning // Åreforkalkning. 2011 bind. 214. S. 3-10.

25. Yorgun H., Canpolat U., Hazirolan T. et al. Epicardial fedtvævstykkelse forudsiger faldende thoracal aorta aterosklerose vist ved multidetektor computertomografi // Int. J. Cardiovasc. Billedbehandling. 2011.

26. Xiangdong L., Yuanwu L., Hua Z. et al. Dyremodeller til ateroskleroseforskning: en gennemgang // Protein Cell. 2011 bind. 2. S. 189-201.

27. Russell J.C., Proctor S.D. Små dyremodeller af hjerte-kar-sygdomme: værktøjer til undersøgelse af rollerne af metabolisk syndrom, dyslipidæmi og åreforkalkning // Cardiovasc. Pathol. 2006. Vol.15. s. 318-330.

28. Zaragoza C., Gomez-Guerrero C., Martin-Ventura J.L. et al. Animal Models of Cardiovascular Diseases // Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011. doi:10.1155/2011/497841.

Modtaget 02.12.11

I.V. Menshikov, K.V. Fomina, L.V. Beduleva, V.G. Sergeev

En ny eksperimentel murin model af åreforkalkning ved immunisering med humane native low-density lipoproteiner

Immunisering af rotter med naturligt humant LDL fører til anti-nLDL autoimmun reaktion ledsaget af en stigning i LDL-C niveauer, en reduktion i HDL-C og en epikardie og perivaskulær stigning i fedtvævsvolumenet sammen med endoteldestruktion og medieforstyrrelser . Resultaterne blev opnået for at bevise hypotesen om, at autoimmun reaktion på nLDL er årsagen til aterosklerose. Vores murine model for åreforkalkning induceret af heterolog nLDL reproducerer vigtige metaboliske og patologiske træk ved menneskelig åreforkalkning og er en passende eksperimentel model for denne sygdom.

Nøgleord: aterom, åreforkalkning, autoimmunitet, dyslipidæmi, epikardiet fedtvæv, native low-density lipoproteiner, rottemodel for åreforkalkning.

Menshikov Igor Viktorovich,

FSBEI HPE "Udmurt State University"

E-mail: m [e-mail beskyttet]

Fomina Ksenia Vladimirovna, ingeniør

FSBEI HPE "Udmurt State University"

426034, Rusland, Izhevsk, st. Universitetskaya, 1 (bygning 1)

E-mail: [e-mail beskyttet]

Beduleva Lyubov Viktorovna,

doktor i biologiske videnskaber, professor

FSBEI HPE "Udmurt State University"

426034, Rusland, Izhevsk, st. Universitetskaya, 1 (bygning 1)

E-mail: [e-mail beskyttet]

Sergeev Valery Georgievich,

doktor i biologiske videnskaber, professor

FSBEI HPE "Udmurt State University"

426034, Rusland, Izhevsk, st. Universitetskaya, 1 (bygning 1)

E-mail: [e-mail beskyttet]

Menshikov I.V., doktor i biologi, professor Udmurt State University

426034, Rusland, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail beskyttet]

Fomina K.V., ingeniør Udmurt State University

426034, Rusland, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail beskyttet]

Beduleva L.V., doktor i biologi, professor Udmurt State University

426034, Rusland, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail beskyttet]

Sergeev V.G., doktor i biologi, professor Udmurt State University

426034, Rusland, Izhevsk, Universitetskaya st., 1/1 E-mail: [e-mail beskyttet]

Begrebets oprindelige betydning "aterosklerose", foreslået af Marchand i 1904, blev reduceret til kun to typer ændringer: ophobning af fedtstoffer i form af grødet masse i arteriernes indre foring (fra det græske athere - grød) og egentlig sklerose - bindevævsfortykkelse af arterievæg (fra den græske scleras - hård). Den moderne fortolkning af åreforkalkning er meget bredere og omfatter ... "forskellige kombinationer af ændringer i arteriernes intima, manifesteret i form af fokal aflejring af lipider, komplekse kulhydratforbindelser, blodelementer og cirkulerende produkter i det, dannelsen af bindevæv og calciumaflejring" (WHO definition).

Sklerotisk ændrede kar (den mest almindelige lokalisering er aorta, arterier i hjertet, hjernen, nedre ekstremiteter) er karakteriseret ved øget tæthed og skrøbelighed. På grund af et fald i elastiske egenskaber er de ikke i stand til at ændre deres lumen tilstrækkeligt afhængigt af behovet for et organ eller væv til blodforsyning.

Indledningsvis opdages den funktionelle underlegenhed af sklerotisk ændrede kar og følgelig af organer og væv kun, når øgede krav præsenteres for dem, det vil sige med en stigning i belastningen. Yderligere progression af den aterosklerotiske proces kan føre til et fald i ydeevnen selv i hvile.

En stærk grad af den aterosklerotiske proces er som regel ledsaget af indsnævring og endog fuldstændig lukning af lumen i arterierne. Ved langsom sklerose af arterier i organer med nedsat blodforsyning opstår atrofiske ændringer med en gradvis udskiftning af funktionelt aktivt parenkym med bindevæv.

Hurtig indsnævring eller fuldstændig blokering af lumen i arterien (i tilfælde af trombose, tromboemboli eller blødning i plaque) fører til nekrose af organområdet med nedsat blodcirkulation, dvs. til et hjerteanfald. Myokardieinfarkt er den mest almindelige og alvorligste komplikation til åreforkalkning i kranspulsårerne.

Eksperimentelle modeller. I 1912 foreslog N. N. Anichkov og S. S. Khalatov en metode til modellering af åreforkalkning hos kaniner ved at injicere kolesterol i kroppen (gennem en sonde eller ved at blande det med almindelig mad). Udtalte aterosklerotiske forandringer udviklede sig efter et par måneder ved daglig brug af 0,5 - 0,1 g kolesterol pr. 1 kg kropsvægt. Som regel blev de ledsaget af en stigning i niveauet af kolesterol i blodserumet (3-5 gange sammenlignet med det oprindelige niveau), hvilket var grundlaget for antagelsen om en ledende patogenetisk rolle i udviklingen af ​​åreforkalkning. hyperkolesterolæmi. Denne model er let reproducerbar ikke kun i kaniner, men også i høns, duer, aber og grise.

Hos kolesterolresistente hunde og rotter reproduceres åreforkalkning ved den kombinerede effekt af kolesterol og methylthiouracil, som undertrykker skjoldbruskkirtelfunktionen. Denne kombination af to faktorer (eksogene og endogene) fører til langvarig og alvorlig hyperkolesterolæmi (over 26 mmol/l - 100 mg%). Tilsætning af smør og galdesalte til maden bidrager også til udviklingen af ​​åreforkalkning.

Hos kyllinger (haner) udvikles eksperimentel åreforkalkning af aorta efter længere tids (4-5 måneder) eksponering for diethylstilbestrol. I dette tilfælde vises aterosklerotiske ændringer på baggrund af endogen hyperkolesterolæmi, som opstår som følge af en krænkelse af den hormonelle regulering af stofskiftet.

Ætiologi. De angivne eksperimentelle eksempler såvel som observationen af ​​spontan menneskelig åreforkalkning og dens epidemiologi indikerer, at denne patologiske proces udvikler sig som et resultat af den kombinerede virkning af en række faktorer (miljømæssige, genetiske, ernæringsmæssige). I hvert enkelt tilfælde kommer en af ​​dem frem. Der er faktorer, der forårsager åreforkalkning, og faktorer, der bidrager til dens udvikling.

På den ris. 19.12 en liste over de vigtigste ætiologiske faktorer (risikofaktorer) for atherogenese er givet. Nogle af dem (arvelighed, køn, alder) er endogene. De viser deres virkning fra fødslen (køn, arvelighed) eller på et bestemt stadium af postnatal ontogenese (alder). Andre faktorer er eksogene. Den menneskelige krop møder deres handling i en række aldersperioder.

Den arvelige faktors rolle i forekomsten af ​​åreforkalkning bekræftes af statistiske data om den høje forekomst af koronar hjertesygdom i individuelle familier, såvel som i enæggede tvillinger. Vi taler om arvelige former for hyperlipoproteinæmi, genetiske abnormiteter af cellereceptorer for lipoproteiner.

Etage. I alderen 40 - 80 år er åreforkalkning og myokardieinfarkt af åreforkalkning mere almindelig hos mænd end kvinder (i gennemsnit 3 - 4 gange). Efter 70 år er forekomsten af ​​åreforkalkning blandt mænd og kvinder nogenlunde den samme. Dette indikerer, at forekomsten af ​​åreforkalkning blandt kvinder opstår i en senere periode. Disse forskelle er på den ene side forbundet med et lavere begyndelsesniveau af kolesterol og dets indhold hovedsageligt i fraktionen af ​​ikke-aterogene a-lipoproteiner i blodserum hos kvinder, og på den anden side med den anti-sklerotiske virkning af kvindelige kønshormoner. Et fald i funktionen af ​​kønskirtlerne på grund af alder eller af en hvilken som helst anden grund (fjernelse af æggestokkene, deres bestråling) forårsager en stigning i serumkolesterolniveauet og en skarp progression af åreforkalkning.

Det antages, at østrogeners beskyttende virkning reduceres ikke kun til reguleringen af ​​kolesterol i blodserumet, men også til andre former for metabolisme i arterievæggen, især oxidativ. Denne anti-sklerotiske virkning af østrogener manifesteres hovedsageligt i forhold til koronarkarrene.

Alder. En kraftig stigning i hyppigheden og sværhedsgraden af ​​aterosklerotiske vaskulære læsioner på grund af alder, især mærkbar efter 30 år (se. ris. 19.12), gav nogle forskere ideen om, at åreforkalkning er en funktion af alder og udelukkende er et biologisk problem [Davydovsky IV, 1966]. Dette forklarer den pessimistiske holdning til den praktiske løsning af problemet i fremtiden. De fleste forskere er dog af den opfattelse, at aldersrelaterede og aterosklerotiske forandringer i blodkar er forskellige former for åreforkalkning, især i de senere stadier af deres udvikling, men aldersrelaterede forandringer i blodkar bidrager til dens udvikling. Effekten af ​​alder, der fremmer åreforkalkning, manifesteres i form af lokale strukturelle, fysisk-kemiske og biokemiske ændringer i arterievæggen og generelle metaboliske lidelser (hyperlipæmi, hyperlipoproteinæmi, hyperkolesterolæmi) og dens regulering.

Overernæring. Eksperimentelle undersøgelser af N. N. Anichkov og S. S. Khalatov antydede vigtigheden af ​​den ætiologiske rolle i forekomsten af ​​spontan åreforkalkning af overskydende ernæring, især overdreven indtagelse af diætfedt. Erfaringerne fra lande med høj levestandard viser på overbevisende vis, at jo mere energibehovet dækkes af animalske fedtstoffer og produkter, der indeholder kolesterol, jo højere er kolesterolindholdet i blodet og forekomsten af ​​åreforkalkning. Tværtimod er forekomsten af ​​åreforkalkning lav i lande, hvor andelen af ​​animalsk fedt udgør en ubetydelig del af den daglige kosts energiværdi (ca. 10 %) (Japan, Kina).

Ifølge et amerikansk program baseret på disse fakta skulle en reduktion af fedtindtaget fra 40 % af de samlede kalorier til 30 % inden år 2000 reducere myokardieinfarktdødeligheden med 20 % til 25 %.

Stress. Forekomsten af ​​åreforkalkning er højere blandt personer i "stressende erhverv", det vil sige erhverv, der kræver langvarige og alvorlige nervøse spændinger (læger, lærere, lærere, administrativt personale, piloter osv.).

Generelt er forekomsten af ​​åreforkalkning højere blandt bybefolkningen sammenlignet med landbefolkningen. Dette kan forklares med det faktum, at en person under forholdene i en storby oftere er udsat for neurogene stressende påvirkninger. Eksperimenter bekræfter den mulige rolle af neuropsykisk stress i forekomsten af ​​aterosklerose. Kombinationen af ​​en fedtrig kost med nervøse spændinger bør betragtes som ugunstig.

Fysisk inaktivitet. En stillesiddende livsstil, et kraftigt fald i fysisk aktivitet (fysisk inaktivitet), karakteristisk for en person i anden halvdel af det 20. århundrede, er en anden vigtig faktor i aterogenese. Til fordel for denne position fremgår af den lavere forekomst af åreforkalkning blandt manuelle arbejdere og jo større - blandt mennesker, der er engageret i mentalt arbejde; hurtigere normalisering af kolesterolniveauet i blodserumet efter dets overdrevne indtag udefra under påvirkning af fysisk aktivitet.

I forsøget blev der fundet udtalte åreforkalkningsforandringer i kaninernes arterier, efter at de var blevet anbragt i specielle bure, hvilket reducerede deres motoriske aktivitet betydeligt. En særlig aterogen fare er kombinationen af ​​en stillesiddende livsstil og overskydende ernæring.

Forgiftning. Påvirkningen af ​​alkohol, nikotin, forgiftning af bakteriel oprindelse og forgiftning forårsaget af forskellige kemikalier (fluorider, CO, H 2 S, bly, benzen, kviksølvforbindelser) er også faktorer, der bidrager til udviklingen af ​​åreforkalkning. I de fleste af de overvejede forgiftninger blev der ikke kun noteret generelle forstyrrelser i fedtstofskiftet karakteristisk for åreforkalkning, men også typiske dystrofiske og infiltrative-proliferative ændringer i arterievæggen.

Arteriel hypertension synes ikke at have selvstændig betydning som risikofaktor. Dette fremgår af erfaringerne fra lande (Japan, Kina), hvis befolkning ofte lider af hypertension og sjældent af åreforkalkning. Forhøjet blodtryk får dog betydningen af ​​at bidrage til udviklingen af ​​åreforkalkning.

faktor i kombination med andre, især hvis den overstiger 160/90 mm Hg. Kunst. Ved samme niveau af kolesterol er forekomsten af ​​myokardieinfarkt med hypertension således fem gange højere end ved normalt blodtryk. I et eksperiment på kaniner, hvis mad blev suppleret med kolesterol, udvikler aterosklerotiske ændringer sig hurtigere og når en højere grad på baggrund af hypertension.

Hormonelle lidelser, stofskiftesygdomme. I nogle tilfælde opstår åreforkalkning på baggrund af tidligere hormonelle lidelser (diabetes mellitus, myxødem, nedsat funktion af gonaderne) eller metaboliske sygdomme (gigt, fedme, xanthomatose, arvelige former for hyperlipoproteinæmi og hyperkolesterolæmi). Ovenstående eksperimenter på den eksperimentelle reproduktion af denne patologi hos dyr ved at påvirke de endokrine kirtler vidner også om den ætiologiske rolle af hormonelle lidelser i udviklingen af ​​åreforkalkning.

Patogenese. De eksisterende teorier om patogenesen af ​​åreforkalkning kan reduceres til to, fundamentalt forskellige i deres svar på spørgsmålet: hvad er primært og hvad der er sekundært i åreforkalkning, med andre ord, hvad er årsagen og hvad er konsekvensen - lipoidose af indre beklædning af arterierne eller degenerative-proliferative ændringer i sidstnævnte. Dette spørgsmål blev først rejst af R. Virkhov (1856). Han var den første til at svare på det og påpegede, at "under alle forhold begynder processen formentlig med en vis løsning af bindevævsgrundstoffet, hvoraf det indre lag af arterierne for det meste består."

Siden da er ideen om den tyske skole for patologer og dens tilhængere i andre lande begyndt, ifølge hvilken der i åreforkalkning udvikler dystrofiske ændringer i den indre beklædning af arterievæggen oprindeligt og aflejring af lipider og calciumsalte er et sekundært fænomen. Fordelen ved dette koncept er, at det er i stand til at forklare udviklingen af ​​spontan og eksperimentel åreforkalkning både i de tilfælde, hvor der er udtalte forstyrrelser i kolesterolmetabolismen, og i deres fravær. Forfatterne af dette koncept tildeler den primære rolle til arterievæggen, dvs. til substratet, som er direkte involveret i den patologiske proces. "Atherosklerose er ikke kun og endda ikke så meget en afspejling af generelle metaboliske ændringer (i laboratoriet kan de endda være uhåndgribelige), men et derivat af dets egne strukturelle, fysiske og kemiske transformationer af substratet af arterievæggen ... Den primære faktor, der fører til åreforkalkning, ligger netop i selve arterievæggen, i dens struktur og i dets enzymsystem" [Davydovsky IV, 1966].

I modsætning til disse synspunkter, siden eksperimenterne fra N. N. Anichkov og S. S. Khalatov, hovedsagelig på grund af undersøgelser af indenlandske og amerikanske forfattere, konceptet om rollen i udviklingen af ​​åreforkalkning af generelle metaboliske lidelser i kroppen, ledsaget af hyperkolesterolæmi, hyper - og dyslipoproteinæmi, er blevet udviklet med succes. Fra disse positioner er åreforkalkning en konsekvens af den primære diffuse infiltration af lipider, især kolesterol, i den uændrede indre beklædning af arterierne. Yderligere ændringer i den vaskulære væg (fænomener af mucoid ødem, degenerative ændringer i fibrøse strukturer og cellulære elementer i subendotellaget, produktive ændringer) udvikler sig på grund af tilstedeværelsen af ​​lipider i det, dvs. de er sekundære.

Oprindeligt blev den ledende rolle i at øge niveauet af lipider, især kolesterol, i blodet tilskrevet den fordøjelsesfaktor (overdreven ernæring), som gav navnet til den tilsvarende teori om forekomsten af ​​åreforkalkning - ernæringsmæssigt. Men meget snart skulle det suppleres, da det blev klart, at ikke alle tilfælde af åreforkalkning kan sættes i en årsagssammenhæng med fordøjelseshyperkolesterolæmi. Ifølge kombinationsteori N. N. Anichkova, i udviklingen af ​​åreforkalkning, ud over fordøjelsesfaktoren, endogene forstyrrelser af lipidmetabolisme og dets regulering, en mekanisk effekt på karvæggen, ændringer i blodtrykket, hovedsageligt dets stigning, såvel som degenerative ændringer i arterien selve væggen, er vigtige. I denne kombination af årsager og mekanismer til atherogenese spiller kun én (alimentær og/eller endogen hyperkolesterolæmi) rollen som en initial faktor. Andre giver enten et øget indtag af kolesterol i karvæggen eller reducerer dets udskillelse fra det gennem lymfekarrene.

I blodet er kolesterol indeholdt i sammensætningen af ​​chylomikroner (fine partikler ikke opløst i plasma) og lipoproteiner - supramolekylære heterogene komplekser af triglycerider, kolesterolestere (kerne), phospholipider, kolesterol og specifikke proteiner (apoproteiner: APO A, B, C , E), danner overfladelag. Der er visse forskelle mellem lipoproteiner med hensyn til størrelse, forhold mellem kerne og skal, kvalitativ sammensætning og atherogenicitet.

Fire hovedfraktioner af blodplasma lipoproteiner er blevet identificeret afhængigt af tæthed og elektroforetisk mobilitet.

Opmærksomheden henledes på det høje indhold af protein og lav-lipider i fraktionen af ​​high density lipoproteiner (HDL - α-lipoproteiner) og omvendt det lave indhold af protein og høj-lipider i fraktionerne af chylomikroner, meget lav densitet lipoproteiner (VLDL - præ-β-lipoproteiner) og lavdensitetslipoproteiner (LDL-β-lipoproteiner).

Blodplasmalipoproteiner leverer således cholesterol og triglycerider syntetiseret og opnået med mad til de steder, hvor de anvendes og aflejres.

HDL har en anti-atherogen effekt ved omvendt transport af kolesterol fra celler, herunder blodkar, til leveren, efterfulgt af udskillelse fra kroppen i form af galdesyrer. De resterende fraktioner af lipoproteiner (især LDL) er aterogene, hvilket forårsager overdreven ophobning af kolesterol i karvæggen.

PÅ fanen. 5 der gives en klassifikation af primære (genetisk bestemte) og sekundære (erhvervede) hyperlipoproteinæmier med varierende grader af atherogen effekt. Som det fremgår af tabellen, spilles hovedrollen i udviklingen af ​​ateromatøse vaskulære ændringer af LDL og VLDL, deres øgede koncentration i blodet og overdreven indtræden i den vaskulære intima.

Overdreven transport af LDL og VLDL ind i karvæggen resulterer i endotelskade.

I overensstemmelse med de amerikanske forskeres I. Goldstein og M. Browns koncept går LDL og VLDL ind i cellerne ved at interagere med specifikke receptorer (APO B, E-receptorer-glycoproteiner), hvorefter de indfanges endocytisk og fusioneres med lysosomer. Samtidig nedbrydes LDL til proteiner og kolesterolestere. Proteiner nedbrydes til frie aminosyrer, som forlader cellen. Kolesterolestere gennemgår hydrolyse med dannelse af frit kolesterol, som kommer ind i cytoplasmaet fra lysosomer med efterfølgende anvendelse til bestemte formål (dannelse af membraner, syntese af steroidhormoner osv.). Det er vigtigt, at dette kolesterol hæmmer dets syntese fra endogene kilder, i overskud danner det "reserver" i form af kolesterolestere og fedtsyrer, men, vigtigst af alt, hæmmer det syntesen af ​​nye receptorer for atherogene lipoproteiner og deres videre indtræden i cellen ved en tilbagekoblingsmekanisme. Sammen med den regulerede receptormedierede mekanisme for LP-transport, som leverer cellernes indre behov for kolesterol, er interendoteltransport blevet beskrevet, samt den såkaldte uregulerede endocytose, som er transcellulær, herunder transendotel vesikulær transport af LDL og VLDL , efterfulgt af exocytose (ind i intima af arterier fra endotelet, makrofager, glatte muskelceller).

Under hensyntagen til ovenstående ideer mekanisme i den indledende fase af åreforkalkning, karakteriseret ved overdreven ophobning af lipider i arteriernes intima, kan skyldes:

1. Genetisk anomali af LDL-receptor-medieret endocytose (fravær af receptorer - mindre end 2% af normen, et fald i deres antal - 2 - 30% af normen). Tilstedeværelsen af ​​sådanne defekter blev fundet ved familiær hyperkolesterolæmi (type II A hyperbetalipoproteinæmi) hos homo- og heterozygoter. En linje af kaniner (Watanabe) med en arvelig defekt i LDL-receptorer er blevet avlet.

2. Overbelastning af receptormedieret endocytose ved fordøjelseshyperkolesterolæmi. I begge tilfælde er der en kraftig stigning i ureguleret endocytisk indfangning af LP-partikler af endotelceller, makrofager og glatte muskelceller i karvæggen på grund af svær hyperkolesterolæmi.

3. Bremse fjernelse af atherogene lipoproteiner fra karvæggen gennem lymfesystemet på grund af hyperplasi, hypertension, inflammatoriske forandringer.

Et væsentligt yderligere punkt er de forskellige transformationer (modifikationer) af lipoproteiner i blodet og den vaskulære væg. Vi taler om dannelsen under forhold med hyperkolesterolæmi af autoimmune komplekser af LP - IgG i blodet, opløselige og uopløselige komplekser af LP med glycosaminoglycaner, fibronectin, kollagen og elastin i den vaskulære væg (A. N. Klimov, V. A. Nagornev).

Sammenlignet med native lægemidler, øges optagelsen af ​​modificerede lægemidler af intimalceller, primært af makrofager (ved hjælp af kolesterol-uregulerede receptorer), dramatisk. Dette menes at være årsagen til omdannelsen af ​​makrofager til de såkaldte skumceller, som danner det morfologiske grundlag stadier af lipidpletter og med yderligere progression - atherom. Migrationen af ​​blodmakrofager til intima tilvejebringes ved hjælp af en monocytisk kemotaktisk faktor, som dannes under påvirkning af LP og interleukin-1, som frigives fra selve monocyterne.

På den sidste fase, dannelsen fibrøse plaques som en reaktion fra glatte muskelceller, fibroblaster og makrofager på skader stimuleret af vækstfaktorer af blodplader, endoteliocytter og glatte muskelceller, såvel som stadiet af komplicerede læsioner - forkalkning, trombose og osv. ( ris. 19.13).

Ovenstående begreber om patogenesen af ​​aterosklerose har deres styrker og svagheder. Den mest værdifulde fordel ved begrebet generelle metaboliske lidelser i kroppen og primær lipoidose af arterievæggen er tilstedeværelsen af ​​en eksperimentel kolesterolmodel. Begrebet om den primære betydning af lokale ændringer i arterievæggen, på trods af at det blev udtrykt for mere end 100 år siden, har endnu ikke en overbevisende forsøgsmodel.

Som det fremgår af ovenstående, kan de generelt supplere hinanden.

Læs:

1. fysiologisk
   1. som en variant af normen
   2. sport (kompenserende)
   3. adaptive (indbyggere i højland og troper)
2. patologisk
   1. spids

· bryder sammen

1. primær kronisk

ustabil reversibel

Vedvarende (hypotonisk sygdom)

med ortostatisk syndrom

1. sekundær kronisk (symptomatisk) - på grund af andre sygdomme

Besvimelse - kortvarigt pludseligt tab af bevidsthed, forårsaget af akut ↓ blodcirkulation i hjernens kar og stærk opbremsning i KBP

Hovedårsager:

• udtalt stress
• alvorligt chok
• intolerance af enhver art (for eksempel blod)

Patogenese . hurtig stærk hæmning af CBP og subkortikal str-r → depression af det vasomotoriske center → kraftigt fald i blodtrykket → fald i blodgennemstrømningen til hjernen → endnu større depression af centralnervesystemet

Bryder sammen - akut vaskulær insufficiens på grund af ↓ tonus i arterioler og vener med et kraftigt fald i blodtryk og tryk

Klassificering efter ætiologi:

1. smitsom (på grund af forgiftning)
2. hypoxæmi (på grund af hypoxæmi med ↓ blodtryk, såvel som med andre typer hypoxæmi)
3. hæmoragisk (på grund af akut massivt blodtab)
4. bugspytkirtel (på grund af alvorlige traumer med blødning i bugspytkirtlen eller aktiv bugspytkirtelbetændelse med frigivelse af enzymer i blodet med dannelse af et stort antal kininer)
5. ortostatisk (på grund af en hurtig ændring af position fra vandret til lodret)
6. hypertermisk (på grund af kropstemperatur)

Ledende forbindelser til patogenese:

• absolut eller relativt kraftigt fald i BCC
• primær signifikant ↓ CD (med mulig myokardieskade på grund af koronararteriesygdom, hjertetamponade, visse allergier og toksiske sygdomme)
• primær pludselig ↓ OPSS på grund af ↓ neurogen og myogen tonekomponent

108. Aterosklerose, dens ætiologi og patogenese. Rollen af ​​forstyrrelser i LDL-receptorinteraktion i mekanismerne for aterosklerotisk plakdannelse. Grundlæggende eksperimentelle modeller for aterosklerose.

Åreforkalkning - forskellige kombinationer af ændringer i arteriernes intima, manifesteret i form af fokal aflejring af lipider, komplekse kulhydratforbindelser, blodelementer og produkter, der cirkulerer i det, dannelsen af ​​bindevæv og calciumaflejring.

Eksperimentelle modeller

I 1912 foreslog N. N. Anichkov og S. S. Khalatov en metode til modellering af åreforkalkning hos kaniner ved at injicere kolesterol i kroppen (gennem en sonde eller ved at blande det med almindelig mad). Udtalte aterosklerotiske forandringer udvikler sig efter et par måneder ved daglig brug af 0,5 - 0,1 g kolesterol pr. 1 kg kropsvægt. Som regel er de ledsaget af en stigning i niveauet af kolesterol i blodserumet (3-5 gange sammenlignet med det oprindelige niveau), hvilket var grundlaget for antagelsen om en ledende patogenetisk rolle i udviklingen af ​​aterosklerose hyperkolesterolæmi. Denne model er let reproducerbar ikke kun i kaniner, men også i høns, duer, aber og grise.

Hos kolesterolresistente hunde og rotter reproduceres åreforkalkning ved den kombinerede effekt af kolesterol og methylthiouracil, som undertrykker skjoldbruskkirtelfunktionen. Denne kombination af to faktorer (eksogene og endogene) fører til langvarig og alvorlig hyperkolesterolæmi (over 26 mmol / l-1000 mg%). Tilsætning af smør og galdesalte til maden bidrager også til udviklingen af ​​åreforkalkning.

Ætiologisk f-ry :

1. endogen

en. arvelighed

b. køn (i alderen 40-80 år er åreforkalkning og aterosklerotisk myokardieinfarkt mere almindelige blandt mænd end kvinder (3-4 gange i gennemsnit). Efter 70 år er forekomsten af ​​åreforkalkning blandt mænd og kvinder nogenlunde den samme.)

c. alder (> 30 år)

2. eksogen

en. overernæring (meget fedt og kolesterinholdige fødevarer)

c. hypodynami

d. forgiftning (alkohol, nikotin, kemiske stoffer)

e. arteriel hypertension (BP > 160/90)

f. hormonforstyrrelser, stofskiftesygdomme in-in (diabetes mellitus, myxødem, ↓ gonadal funktion, gigt, fedme, hyperkolesterolæmi)

De eksisterende teorier om patogenesen af ​​åreforkalkning kan reduceres til to, fundamentalt forskellige i deres svar på spørgsmålet: hvad er primært og hvad der er sekundært i åreforkalkning, med andre ord, hvad er årsagen og hvad er konsekvensen - lipoidose af indre beklædning af arterierne eller degenerative-proliferative ændringer i sidstnævnte. Dette spørgsmål blev først stillet af R. Virkhov (1856). Han var den første til at svare på det og påpegede, at "under alle forhold begynder processen sandsynligvis med en vis løsning af bindevævets grundstof, som det indre lag af arterierne for det meste består af."

Siden da er ideen om den tyske skole for patologer og dens tilhængere i andre lande opstået, ifølge hvilken dystrofiske ændringer i arterievæggens indvendige beklædning i åreforkalkning udvikler sig og aflejring af lipider og calciumsalte. er et sekundært fænomen. Fordelen ved dette koncept er, at det er i stand til at forklare udviklingen af ​​spontan og eksperimentel åreforkalkning både i tilfælde, hvor der er krænkelser af kolesterolmetabolismen, og i dem (hvilket er særligt vigtigt), når de ikke er det. Forfatterne af dette koncept tildeler den primære rolle til arterievæggen, dvs. til substratet, som er direkte involveret i den patologiske proces. "Atherosklerose er ikke kun og endda ikke så meget en afspejling af generelle metaboliske ændringer (i laboratoriet kan de endda være uhåndgribelige), men et derivat af dets egne strukturelle, fysiske og kemiske transformationer af arterievægssubstratet. Den primære faktor, der fører til åreforkalkning, ligger netop i selve arterievæggen, i dens struktur og i dets enzymsystem ”(IV Davydovsky, 1966).

I modsætning til disse synspunkter, siden eksperimenterne fra N. N. Anichkov og S. S. Khalatov, hovedsagelig på grund af undersøgelser af sovjetiske og amerikanske forfattere, begrebet rollen i udviklingen af ​​åreforkalkning af generelle metaboliske lidelser i kroppen, ledsaget af hyperkolesterolæmi, hyperlipæmi og hyperbetalipoproteinæmi, er blevet udviklet med succes. Fra disse positioner er åreforkalkning en konsekvens af den primære diffuse infiltration af lipider, især kolesterol, i den uændrede indre beklædning af arterierne. Yderligere ændringer i den vaskulære væg (fænomener af mucoid ødem, degenerative ændringer i fibrøse strukturer og cellulære elementer i subendotellaget, produktive ændringer) udvikler sig på grund af tilstedeværelsen af ​​lipider i det, dvs. de er sekundære.

Oprindeligt blev den ledende rolle i at øge niveauet af lipider, især kolesterol, i blodet tilskrevet den fordøjelsesfaktor (overdreven ernæring), som gav navnet til den tilsvarende teori om forekomsten af ​​åreforkalkning - fordøjelsessystemet. Men meget snart skulle det suppleres, da det blev klart, at ikke alle tilfælde af åreforkalkning kan sættes i en årsagssammenhæng med fordøjelseshyperkolesterolæmi. Ifølge kombinationsteorien fra N. N. Anichkov, i udviklingen af ​​åreforkalkning, ud over fordøjelsesfaktoren, endogene lidelser i lipidmetabolisme og dets regulering, en mekanisk effekt på karvæggen, ændringer i blodtrykket, hovedsagelig dets stigning, samt da degenerative ændringer i selve arterievæggen er vigtige. Men selv i denne modifikation beholdt den gamle formel "uden kolesterol er der ingen åreforkalkning" sin oprindelige betydning. Dette skyldes det faktum, at udviklingen af ​​åreforkalkning primært er forbundet med niveauet af kolesterol i blodserumet.

I de efterfølgende år blev det vist, at for forekomsten af ​​åreforkalkning er ikke kun en stigning i indholdet af kolesterol i blodserumet, men også en ændring i forholdet mellem niveauerne af kolesterol og fosfolipider (normalt 0,9) vigtig. Med åreforkalkning øges dette forhold. Fosfolipider reducerer indholdet af kolesterol i blodserumet, holder det i emulgeret tilstand og forhindrer aflejring i blodkarvæggene. Således er deres relative mangel en af ​​de vigtige medvirkende faktorer for atherogenese.

En lige så vigtig rolle spilles af den kvalitative sammensætning af fedt, der kommer ind i kroppen. Normalt indgår 2/3 af det kolesterol, der indføres i kroppen, i en kemisk (ether)binding med fedtsyrer (hovedsageligt i leveren) for at danne kolesterolestere. Kolesterol-esterificering med umættede fedtsyrer (linolsyre, linolensyre, arachidon), indeholdt i vegetabilske olier og fiskeolier, fremmer dannelsen af ​​polære labile, letopløselige og kataboliserede kolesterolestere. Tværtimod bidrager esterificeringen af ​​kolesterol med mættede fedtsyrer, hovedsageligt af animalsk oprindelse (stearinsyre, palmitinsyre), til fremkomsten af ​​tungtopløselige kolesterolestere, der let fælder ud af opløsningen. Desuden er umættede fedtsyrers evne til at reducere niveauet af kolesterol i blodserum ved at accelerere dets udskillelse og metaboliske transformationer kendt, og mættede fedtsyrer til at øge det. Disse fakta giver os mulighed for at konkludere, at et fald i forholdet mellem umættede og mættede fedtsyrer bidrager til udviklingen af ​​åreforkalkning. Blodserumlipider (kolesterol, kolesterolestere, fosfolipider, triglycerider) består dels af chylomikroner (fine partikler, uopløst i plasma) og lipoproteiner - komplekser af α- og β-globuliner og lipider opløst i plasma. α-lipoproteiner er ca. 33-60% protein og 40-67% fedt, (β-lipoproteiner er henholdsvis ca. 7-21% og 79-93%.

Ved åreforkalkning øges indholdet af β-lipoproteiner, primært med lav vægtfylde (0,99-1,023). Disse lipoproteiner flyder med en hastighed på 10-20 Sf, er karakteriseret ved et højt indhold af kolesterol og mættede fedtsyrer, en relativ mangel på fosfolipider og udfældes let. En mere fuldstændig fysisk og patofysiologisk karakterisering, såvel som en klassificering af typerne af atherogene lipoproteiner og tilsvarende hyperlipoproteinæmier, blev udført af Fredrickson et al. (1967).

Det er klart, at den type "transport", der sikrer levering af kolesterol til den vaskulære væg i åreforkalkning, er essentiel både i mekanismen for aterosklerotiske læsioner, som bestemmer deres natur og sværhedsgrad, og for differentieret diæt- og lægemiddelterapi.

I betragtning af atherogene β-lipoproteiners evne til at danne kompleks med sure glycosaminoglycaner og glycoproteiner efter deres indtrængning i vaskulærvæggen og opnå antigene egenskaber, er det desuden muligt at producere autoantistoffer og udvikle en autoimmun-type patologisk proces. Dette kan også lettes af fremkomsten af ​​autoantigener fra henfaldsprodukterne fra aterosklerotiske plaques, som giver specifik sensibilisering af kroppen.

I de senere år er der blevet lagt stor vægt på undersøgelsen af ​​plasma- og vævsenzymer, der nedbryder lipider. Det er blevet fastslået, at den lipolytiske aktivitet hos dyr, der er resistente over for fordøjelseskolesterol ateroslerose (rotter, hunde), øges, og tværtimod er den nedsat hos dyr, der er modtagelige for denne sygdom (kaniner, høns, duer).

Hos mennesker falder den lipolytiske aktivitet af aortavæggen på grund af alder såvel som ved åreforkalkning. Dette tyder på, at i et komplekst system af mekanismer, der bidrager til udviklingen af ​​vaskulær lipoidose i åreforkalkning, spilles en vis rolle af insufficiens af lipolytiske enzymer.

Af stor betydning i patogenesen af ​​aterosklerose er processerne af kolesterolbiosyntese. Sidstnævnte i dyrekroppen dannes gennem stadiet af aktivt acetat (acetyl-CoA) fra proteiner, fedtstoffer og kulhydrater. Leveren er det vigtigste organ, der syntetiserer kolesterol i kroppen. Karvæggen er heller ikke blottet for evnen til at syntetisere kolesterol fra acetat. Det kan danne både fosfolipider og nogle fedtsyrer. Imidlertid er karvæggen ikke i stand til at give dannelsen af ​​mængden af ​​lipider, der findes i den ved åreforkalkning. Deres hovedkilde er blodserum. Derfor kan udviklingen af ​​åreforkalkning uden overskydende indtag af kolesterol udefra forklares med endogen hyperkolesterolæmi, hyperlipæmi og hyperbetalipoproteinæmi.

Ovenstående begreber om patogenesen af ​​aterosklerose har deres styrker og svagheder. Den mest værdifulde fordel ved begrebet generelle metaboliske lidelser i kroppen og primær lipoidose af arterievæggen er tilstedeværelsen af ​​en eksperimentel kolesterolmodel. Begrebet om den primære betydning af lokale ændringer i arterievæggen, på trods af at det kom til udtryk for 100 år siden, har endnu ikke en overbevisende forsøgsmodel.

top encyklopædi

Ætiologi patogenese af aterosklerose. Nogle lægemidler i udnævnelsen af ​​patienter med åreforkalkning på ambulant basis blev brugt for første gang i et kardiologisk rum og en natambulatorium. Deres effekt på kolesterol- og lipoproteinmetabolisme blev eksperimentelt undersøgt.

Materialerne af observationer og eksperimentelle undersøgelser tjente som grundlag for offentliggørelsen af ​​erfaringer med behandling af patienter med åreforkalkning på ambulant basis. På denne måde stræber vi efter at hjælpe behandleren med at opnå gunstige resultater under langvarig dispensationsobservation af patienter med gentagne behandlingsforløb.

Artiklen diskuterer også mekanismerne for en række lægemidlers gunstige effekt på lipidmetabolismen, som efter vores mening kan tiltrække sig forskeres, klinikere og forsøgspersoners opmærksomhed.

De foreslåede organisatoriske principper og metoder til terapi for patienter med åreforkalkning belyser kun en del af det komplekse og uløste problem med at behandle patienter med åreforkalkning, og vi vil med taknemmelighed modtage kritiske kommentarer fra læserne.

På nuværende tidspunkt er der ingen fælles forståelse af ætiologien og patogenesen af ​​åreforkalkning. De fleste indenlandske og udenlandske forfattere betragter åreforkalkning som en sygdom, der ikke nødvendigvis er forbundet med alder, udvikler sig i bølger og til en vis grad i stand til at vende udvikling. I patogenesen af ​​åreforkalkning spiller stofskifteforstyrrelser en vigtig rolle, hvilket gjorde det muligt for mange forfattere at karakterisere denne sygdom som en stofskiftesygdom og frem for alt lipid- og proteinmetabolismeforstyrrelser.

N. N. Anichkov (1935, 1956, 1958) med sine egne eksperimentelle og systematiske morfologiske undersøgelser af mennesker, der døde i forskellige aldersgrupper sammen med sine ansatte (K. G. Volkova, 1946, 1949, 1966; V. D. Tsinzerling, 1937) viste, at der er atherosclerosis. en sygdom, der begynder i en ung og middelalder og når sin mest intensive udvikling i alderdommen. Lipoidaflejringer i intima gennemgår ofte omvendt udvikling, der er en suspension og endda regression af aterosklerotiske ændringer. Hos ældre mennesker med åreforkalkning er der sammen med udtalte aterosklerotiske plaques ofte initiale læsioner i form af lipidpletter og striber, der ligner morfologiske ændringer i aorta hos dyr med eksperimentel kolesterol åreforkalkning.

Spørgsmål til 5. kontrol om paphysis

Spørgsmål til prøve nr. 5

For studerende på medicinske og forebyggende, pædiatriske, medicinske og forebyggende, MVSO fakulteter

Patofysiologi af det kardiovaskulære system.

1. Kredsløbssvigt: definition, klassifikation.
2. Ændringer i hovedparametrene for hæmodynamik ved hjertesvigt.
3. Typer af hjertesvigt efter ætiologi og patogenese og deres karakteristika.
4. Ætiologi af kredsløbssvigt.
5. Faktorer, der forårsager funktionel overbelastning af myokardiet
6. Typer af hjertesvigt i henhold til graden af ​​involvering i processen med hjerteafdelinger og deres karakteristika.
7. Patogenesen af ​​hjertesvigt
8. Myokardiehypertrofi, kompenserende fase.
9. Stadium af dekompensation i myokardiehypertrofi.
10. Principper for korrektion af hjertesvigt (reduktion af belastningen på hjertet, blokering af patogenetiske forbindelser).
11. Kronisk kredsløbssvigt: årsager og udviklingsmekanismer.
12. Hjertets arbejde ved aortadefekter.
13. Hjertets arbejde med mitralfejl.
14. Ændringer i myokardiefunktion ved aortastenose.
15. Koronar insufficiens: definition, ætiologi.
16. Patogenesen af ​​koronar insufficiens.
17. Krænkelse af metaboliske processer i myokardieinfarkt.
18. Mekanismer for udvikling af elektrolyt-steroid nekrose ved myokardieinfarkt.

19. Faktorer, der har en direkte skadelig virkning på myokardiet.

1. Mekanisme af hjerteødem.
2. Krænkelser af funktionen af ​​sinusknuden.
3. Typer af ekstrasystoler og deres egenskaber.
4. Patogenese af atrieflimren.
5. Ventrikulær fibrillering, EKG-udtryk og deres korrektion.
6. Paroxysmal takykardi og dens patogenese.
7. Ledningspatologi, typer af blokader.
8. Komplet tværgående hjerteblok, manifestationer og dens korrektion.
9. Udviklingen af ​​en "ond cirkel" i forekomsten af ​​arytmier i myokardieinfarkt.
10. regulering af vaskulær tonus.
11. Overtrædelse af vaskulær tonus i hypertension.
12. Overtrædelse af vaskulær tonus i hypotension.
13. Ætiologi af primær arteriel hypertension.
14. Ætiologi af arteriel hypotension (primær, sekundær).
15. Ændringer i hovedindikatorerne for central hæmodynamik i primær arteriel hypertension.
16. Stadier af hypertension, deres karakteristika, konsekvenser og farer.
17. Hjertets arbejde ved hypertension.
18. 4 hypoteser om patogenesen af ​​primær arteriel hypertension.
19. De vigtigste onde cirkler i patogenesen af ​​primær arteriel hypertension.
20. Renal arteriel hypertension (vasorenal, renoprival), patogenese.
21. Endokrin arteriel hypertension: ætiologi, patogenese.
22. Patogenese af neurogen arteriel hypertension (centrogen, refleks).
23. Generelle principper for korrektion af primær arteriel hypertension.
24. Typer af sammenbrud og deres egenskaber.
25. Besvimelse og dens patogenese.
26. Aterosklerose: definition, ætiologi.
27. Risikofaktorer i udviklingen af ​​åreforkalkning.
28. Ætiologi af aterosklerose: neurogene lidelser
29. Ætiologi af aterosklerose: arvelig-konstitutionel faktor.
30. Ætiologi af aterosklerose: endokrine lidelser.
31. Ætiologi af åreforkalkning: metaboliske lidelser.
32. Endotelskades rolle i patogenesen af ​​aterosklerose.
33. Generel patogenese af aterosklerose.
34. Åreforkalkningens rolle i hjertets og blodkarrenes patologi.
35. Krænkelse af lipidmetabolisme i patogenesen af ​​aterosklerose.
36. Principper for patogenetisk korrektion af aterosklerose.

Differentiel effekt af Pistacia vera-ekstrakter på eksperimentel åreforkalkning i kanindyremodellen: en eksperimentel undersøgelse
Kilde: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2917426/

Lipidrige diæter og oxidativt stress er risikofaktorer for åreforkalkning. Virkningerne af methanoliske (ME) og cyclohexan (CHE) ekstrakter af Pistacia vera nødden, ofte inkluderet i middelhavskosten, er blevet undersøgt i en kaninmodel for åreforkalkning.

Fireogtyve New Zealand White-kaniner modtog en atherogen diæt (kontrolgruppe) suppleret med ME (ME-gruppe) eller CHE (CHE-gruppe) i 3 måneder. Tidligere blev GC-MS og UHPLC LC-DAD-ESI (-) - HRMS / MS udviklet til at studere de kemiske profiler af ekstrakter. Blodprøver ved baseline og månedlige niveauer af lipidprofil, lipidperoxidation og leverfunktion. Aorta, myokardiet og leveren blev histologisk undersøgt efter 3 måneder.

ME- og CHE-grupperne havde signifikant højere HDL og ikke signifikant lavere middel LDL-kolesterol som % af baseline end kontrolgruppen. Triacylglycerol var signifikant højere i CHE-gruppen sammenlignet med kontroller. MDA-værdier var signifikant lavere i ME-gruppen sammenlignet med kontroller og CHE. ALT og ASAT var signifikant højere i CHE versus kontrolgruppen. γ-GT var lavere i ME-gruppen sammenlignet med kontroller. Tykkelsen af ​​aorta intima var signifikant mindre i ME- og CHE-grupperne sammenlignet med kontroller; Aterosklerotiske læsioner i ME-gruppen var signifikant mindre omfattende sammenlignet med kontrol- og CHE-gruppen. Kun CHE-gruppen havde signifikant fedtlever.

Under kortvarig administration samtidig med en atherogen diæt var begge ekstrakter af P. vera gavnlige for HDL-, LDL-kolesterol og aorta-intima-tykkelse. ME viste desuden en antioxidanteffekt og en betydelig reduktion af overfladisk skade på aorta. Disse resultater indikerer, at kostens inklusion af P. vera, især dens ME, er potentielt gavnlig i behandlingen af ​​aterosklerose.

Hjerte-kar-sygdomme er den førende dødsårsag i den industrialiserede del af verden, med åreforkalkning som den underliggende tilstand. Udviklingen og progressionen af ​​aterosklerotiske læsioner er blevet grundigt undersøgt. Der har været mange kliniske undersøgelser vedrørende kostprotokoller, såsom "Seven Countries"-undersøgelsen af ​​middelhavsdiæten, som inkluderer olivenolie. Andre kliniske undersøgelser har inkluderet farmaceutiske og kirurgiske indgreb alene eller i kombination. Videnskabelig dokumentation for patogenesen og terapien af ​​åreforkalkning i det sidste århundrede er i vid udstrækning opnået fra forskningsprotokoller i dyremodeller.

Kaninen, en af ​​de vigtigste modeller for studiet af åreforkalkning, reagerer hurtigt på stimulering af aterosklerotiske læsioner med en kost med højt kolesteroltal. Nogle kostundersøgelser har brugt denne model, herunder administration af oliven- eller fiskeolie og forskellige frøekstrakter eller olier afledt af solsikkefrø, jordnødder, hørfrø eller hasselnødder. En madnød, der indtages enten alene eller som en ingrediens i traditionelle opskrifter, er pistacienødden fra Pistacia vera-træet, som tilhører Anacardiaceae-familien og distribueres i det centrale og sydøstlige Grækenland samt andre Middelhavs- og Mellemøstlige lande. Så vidt vi ved, er der kun offentliggjort in vitro undersøgelser vedrørende dets biologisk aktive virkninger på udviklingen af ​​åreforkalkning. Derfor sigtede vi på at undersøge effekten af ​​administration af P. vera cyclohexan (CHE) og methanolekstrakt (ME) i en eksperimentel kaninmodel for åreforkalkning på serumbiokemi samt aorta-, hjerte- og leverskade.

Tabel 1 viser den beskrivende statistik over de målte parametre for de 3 grupper. Tabel 2 viser de gennemsnitlige procentvise ændringer fra baseline i kropsbiomasse, lipidprofil og antioxidantstatus samt overordnede statistiske værdier. Tabel 3 viser den gennemsnitlige procentvise ændring fra baseline i leverenzymaktivitet og overordnede statistiske værdier. Tabel 4 viser den morfometriske analyse af kaninaorta.

Beskrivende statistik: betyder ± standardafvigelse af kropsvægt og biokemiske parametre

Gennemsnitlige værdier af kropsvægt, lipidprofil og oxidativ stress i observationsperioden i tre grupper: kontrol (aterogen diæt), ME (atherogen diæt plus ME), CHE (atherogen diæt plus CHE).

Alle variable er præsenteret som middel ± SD

Procentvis ændring i kropsvægt, lipidprofil og oxidativ stress i kaninserum

Median % ændring fra baseline kropsvægt, lipidprofil og oxidativ stress værdier i løbet af observationsperioden i tre grupper: kontrol (atherogen diæt), ME (atherogen diæt plus ME), CHE (atherogen diæt plus CHE).

Betydelig forskel på s

b Signifikant forskel på s

Procentvis ændring i aktiviteten af ​​leverenzymer i serum hos kaniner

Median leverenzymaktivitet % ændring fra baseline i observationsperioden i de tre grupper. Kontrolgruppe: aterogen diæt, ME-gruppe: aterogen diæt plus ME, CHE-gruppe: aterogen diæt plus CHE

Betydelig forskel på s

b Signifikant forskel på s

Overordnet Sig: Overordnet betydning, NS: Ubetydeligt

Morfometrisk analyse på kanin aorta

Resultater er udtrykt som median ± SD.

Kontrolgruppe: aterogen diæt, ME-gruppe: aterogen diæt plus ME, CHE-gruppe: aterogen diæt plus CHE

Betydelig forskel på s

b Signifikant forskel på s

Den endelige gennemsnitlige %-ændring fra baseline i kontrol-, ME- og CHE-grupperne var ikke statistisk signifikant (tabel 2), selvom der var en beskeden stigning i absolutte middelværdier (tabel 1).

Plasmalipidniveauer for alle tre grupper var ens ved baseline. Den gennemsnitlige %-ændring fra baseline i observationsperioden beskrevet nedenfor er vist i tabel 2.

Den gennemsnitlige %-ændring fra baseline til måned 1 for ME- og CHE-grupperne var statistisk signifikant højere sammenlignet med kontrolgruppen (hhv. p = 0,01 og 0,05).

Den gennemsnitlige ændring i CHE-gruppen var statistisk signifikant højere sammenlignet med kontrolgruppen og ME ved måned 1 og 2, mens ME- og CHE-gruppen havde statistisk signifikant højere værdier end kontrolgruppen ved måned 2 (p = 0,001 og p

Den gennemsnitlige ændring i CHE-gruppen var statistisk signifikant lavere sammenlignet med kontrolgruppen efter 1 og 2 måneder (p

Median % ændring i ME-gruppen var statistisk signifikant højere sammenlignet med kontrolgruppen ved 1. og 2. måned (p.

Den gennemsnitlige ændring i CHE-gruppen var statistisk signifikant højere sammenlignet med ME-gruppen efter 2 og 3 måneder (p = henholdsvis 0,032 og 0,012). Desuden var den gennemsnitlige ændring i ME-gruppen statistisk signifikant anderledes sammenlignet med kontrolgruppen efter 1 og 3 måneder (p

Median % ændring af ME-gruppen var statistisk signifikant højere sammenlignet med kontrolgruppen ved måned 2 (p = 0,05), mens den gennemsnitlige ændring af CHE-gruppen sammenlignet med kontrolgruppen var signifikant højere under undersøgelsen (p

Median %-ændring i plasmaværdier for alle grupper viste ikke en statistisk signifikant stigning over hele forsøgsperioden, hvor CHE-gruppen kun havde højere værdier ved måned 3 (p = 0,007).

Den gennemsnitlige ændring i værdierne for ME-gruppen var statistisk signifikant lavere sammenlignet med kontrolgrupperne og CHE i løbet af eksperimentets tredje måned (p.

Makroskopiske aortaprøver fra kontrol- og CHE-gruppen viste omfattende aterosklerotiske plaques, der dækkede næsten hele toppen af ​​den udskårne aorta (tabel 4 og fig. 1A og 1E). ME-gruppens score viste mindre omfattende læsioner sammenlignet med A-gruppen og også sammenlignet med CHE-gruppen (tabel 4 og fig. 1C).

Makro- og mikroskopiske billeder af repræsentanter for aorta i kaniner i tre grupper. 1A, 1C, 1E er repræsentative billeder fra prøver af grov aorta, der tilhører henholdsvis kontrol-, ME- og CHE-grupperne. Pilene angiver dannelsen af ​​aterosklerotiske plaques. Som vist viste kontrolgruppen omfattende aterosklerotiske plaques, der dækkede næsten hele toppen af ​​den udskårne aorta. ME- og CHE-grupperne viste mindre omfattende læsioner sammenlignet med kontrolgruppen, og mellem de to grupper havde ME-gruppen den mindste læsionsdannelse. 1B, 1D, 1F - mikrofotografier fra henholdsvis 1A, 1C, 1E (eosin - hæmatoxylin, initial forstørrelse × 100). Figur 1B (kontrolgruppe) viser en sårbar plak med mange skumceller, betændelse og bemærkelsesværdig intimal fortykkelse. Figur 1D (ME-gruppe) viser læsionen beskrevet ovenfor, men mindre omfattende (intimal/medietykkelse mindre end i 1B. Figur 1F (CHE-gruppe) viser aorta-endotel med tegn på fortykkelse og mange skumceller, dog er intima/medie-forholdet mindre end i 1 B. Pile angiver endotelets bredde.

De histopatologiske fund fra kontrol- og CHE-gruppen viste sårbare plaques med mange skumceller, inflammation og bemærkelsesværdig intimal fortykkelse (figur 1B og 1F). I ME-gruppen blev læsionerne beskrevet ovenfor fundet, men mindre omfattende (figur 1D).

Histologisk undersøgelse af hjertet viste ingen signifikante ændringer mellem grupperne.

Histologisk undersøgelse af leveren viste ingen signifikante ændringer mellem gruppekontrol og ME. CHE-gruppen viste statistisk signifikant fedtinfiltration sammenlignet med kontrolgruppen.

Den ikke-genetiske hyperlipidæmiske kanin er en dyremodel, der er meget brugt i åreforkalkningsforskning. Forskellige niveauer af kostkolesterol (0,2-1,3%) blev brugt til at opsætte eksperimentet, og samtidig administration af andre potentielt gavnlige stoffer blev undersøgt i perioder fra 8 til 14 uger.

Pistacieplanter er træer eller buske, der tilhører Grækenland og andre middelhavs- og mellemøstlige lande. Blandt dem har P. lentiscus vist sig at have antioxidant, antibakteriel, leverbeskyttende og cytostatisk virkning og forhindre LDL-kolesterol i at blive oxideret in vitro. P. terebinthus har vist sig at have en gavnlig effekt på livmodervorter og hudmelanomer. Der er lavet lidt forskning på P. vera. Det er blevet rapporteret at have plantesvampevirkninger. P. vera ME indeholder små mængder catechin, et polyfenolisk flavonoid, der viser potentielt højere antioxidantaktivitet end ascorbinsyre og α-tocopherol i in vitro undersøgelser. Catechin og dets produkter er også blevet nævnt som faktorer til at reducere risikoen for hjerte-kar-sygdomme ved at sænke serumkolesterolniveauet, reducere blodpladeaggregation og sænke blodtrykket.

I denne undersøgelse undersøgte vi effekten af ​​samtidig administration af P. vera på progressionen af ​​kolesterol-induceret åreforkalkning i en kanindyremodel over 12 uger. Vi valgte at administrere P. vera ME eller CHE separat i forskellige dyregrupper for at kunne identificere, hvilke komponenter der ville være ansvarlige for potentielt forskellige udfald. GC-MS-analyse af CHE viste, at dets hovedforbindelser er b-sitosterol, squalen, stigmasterol, oliesyre og palmitinsyre. Kliniske forsøg har allerede vist de beskyttende virkninger af sådanne plantesteroler i udviklingen af ​​koronar hjertesygdom. Derudover afslørede ME-analyse ved hjælp af LC-HRMS/MS-metoder tilstedeværelsen af ​​gallisk methylester, protocatechinsyre og gallussyre. Gallinsyre har vist sig at have anti-atherogen aktivitet.

Resultaterne af nærværende undersøgelse viser en positiv effekt af samtidig administration af P. vera ME og CHE i en kolesterolberiget diæt på ændringer i HDL-C. ME viste også mindre ændring i MDA fra baseline og udviste således en mild antioxidanteffekt. Den gavnlige effekt af LDL-C var ikke statistisk signifikant. Andre undersøgte biokemiske parametre (TC, TAG og leverenzymer) viste ikke en gavnlig effekt af ME, når de blev analyseret med middelværdier. En analyse af vores data ved hjælp af gennemsnitlige absolutte værdier viste en statistisk signifikant beskyttende effekt af ME for ovenstående parametre (tabel 1). Men på grund af manglen på en normal fordeling af værdier, blev brugen af ​​ikke-parametrisk analyse (Kruskal-Wallis og Mann-Whitney test) anset for nødvendig.

Flere plantestoffer har gavnlige effekter på blodkemien hos kolesterolfodrede kaniner. En olivenolie polyphenol kendt som hydroxytyrosol øgede HDL-C niveauer i diætfodrede aterogene kaniner. Sesammel påvirkede gavnligt det totale kolesterol- og triglyceridniveau hos kaniner, der blev fodret med kolesterol. Derudover resulterede seciolararicyresin diglucoside (SDG), et plantelignin isoleret fra hørfrø, når det blev administreret til kaniner i 8 uger, i et fald i LDL-C og en stigning i HDL-C og antioxidantaktivitet, svarende til vores undersøgelse. Derudover viste en anden kaninundersøgelse med et ethanolekstrakt af Hypericum Boiss var lysimachioides (Guttifera) lysimachioider en statistisk signifikant reduktion i MDA-niveauer såvel som en stigning i HDL-C-niveauer, i overensstemmelse med vores undersøgelse.

Vores resultater viste, at behandling med begge ekstrakter af P. vera forårsagede en beskeden stigning i TC-værdier, selvom dette ikke adskilte sig meget fra kontrolgruppen i anden og tredje måned efter administration.

De gennemsnitlige HDL-C-værdier i kontrolgruppen var lavere ved slutningen af ​​eksperimentet, mens samtidig administration af P. vera-ekstrakter (ME- og CHE-grupper) hæmmede dette fald signifikant. I betragtning af, at lave HDL-C-niveauer er forbundet med en højere risiko for hjerte-kar-sygdomme, bekræftes det, at en stigning i HDL-C-niveauer vil føre til en beskyttende effekt mod åreforkalkning efter langvarig administration af P. vera-ekstrakter.

Vores resultater viste signifikante forskelle i plasma MDA-niveauer mellem ME og kontrolgrupper. Dette tyder på, at den positive effekt af P. vera ME på nogle lipider og aorta kan skyldes en mild antioxidant effekt.

I vores undersøgelse steg leverenzymniveauerne og nåede topniveauer i den tredje måned i alle grupper. Især ALT- og ASAT-ændringer var øget i ME- og CHE-grupperne sammenlignet med kontroller. Både kliniske og eksperimentelle undersøgelser har vist, at forhøjet ALAT og ASAT kan være prædiktiv for udviklingen af ​​åreforkalkning. Derudover var γGT-ændringerne i ME-gruppen statistisk signifikant lavere i den tredje måned sammenlignet med kontrolgruppen. Dette indikerer en positiv effekt af P. vera ME og CHE på funktionen af ​​galdesystemet hos aterosklerotiske dyr. I en undersøgelse af Hakimoglu et al. hepatisk hydropisk og lipiddegeneration blev reduceret i det ethanoliske ekstrakt af Hypericum lysimachoides sammenlignet med kaniner fodret med en kolesterolberiget diæt alene. Dette fund ligner vores, hvor leverhistologien, jeg fodrede kaninerne, var mindre påvirket end kolesterolgruppen (kontrolgruppen), selvom der ikke var nogen statistisk signifikant forskel. Især kaniner i kontrolgruppen led af leverskader karakteriseret ved steatose og fibrose, hvilket var endnu mere tydeligt i CHE-gruppen.

Makroskopisk plakdannelse i ME-gruppen var mindre omfattende sammenlignet med kontrol- og CHE-gruppen. Som i vores undersøgelse bemærkede andre efterforskere, at på trods af en stigning i serumkolesterol efter administration af ekstraktet, kan patologiske fund på aortaprøver vise forbedring i aterosklerose. Aguilera et al. fandt ud af, at jomfruolivenolie og fiskeolie reducerede udviklingen af ​​aterosklerotiske plaques. Hasselnøddeolie har også vist sig at reducere aterosklerotiske læsioner i aorta hos kolesterol-spisende kaniner. Desuden havde virkningen af ​​at administrere grøn te indeholdende forbindelser afledt af epicatechin i kaniner en gavnlig virkning på arterielle aterosklerotiske plaques. Dette er i overensstemmelse med vores resultater, hvilket indikerer en signifikant positiv effekt af P. vera ME på udviklingen af ​​aorta aterosklerose. Især ME-gruppen viste signifikant hæmning af aterosklerotiske plaques i både deres tykkelse og bredde i aorta-lumen. Dette kan skyldes hovedkomponenterne i ME, såsom gallussyre og catechin, som kan være ansvarlige for denne hæmningsproces, som allerede angivet. På den anden side viste CHE-gruppen en mildere hæmning af åreforkalkning i forhold til plaktykkelse, hvilket kan forklares ved tilstedeværelsen af ​​b-sitosterol, squalen, stigmasterol, oliesyre og palmitinsyre, som vist på samme måde.

CHE-gruppen viste den laveste antioxidantaktivitet. Denne effekt kan være relateret til de omfattende, men mindre komplekse aterosklerotiske læsioner, der er observeret i CHE-gruppens aortaprøver sammenlignet med dem i kontrol- og ME-gruppen. ME-gruppen viste dog meget stærkere antioxidantaktivitet. Den statistisk signifikante observerede antioxidanteffekt af ME, tydelig i MDA-analysen, reducerede også signifikant aorta-plakaflejring. På den anden side påvirkede CHE ikke omfanget af aterosklerotiske læsioner. Disse data kan tilskrives komponenterne i P. vera ME, der har antioxidantaktivitet.

Som konklusion, når de blev administreret kortvarigt samtidigt med en aterogen diæt, var begge ekstrakter af P. vera gavnlige for HDL-, LDL-kolesterol og aorta intima tykkelse. ME viste desuden en antioxidanteffekt og en betydelig reduktion af overfladisk skade på aorta. Disse resultater indikerer, at kostens inklusion af P. vera, især dets ME, har potentialet til at være gavnligt i behandlingen af ​​aterosklerose. P. vera ME og CHE bruges in vivo for første gang, så vidt vi ved i studiet af åreforkalkning og viser lovende effekt med hensyn til hæmningsprocessen. Mere forskning er nødvendig, før P. vera klinisk kan anbefales til diætinkludering til behandling af åreforkalkning.

Fireogtyve almindelige New Zealand White-kaniner (2,7 ± 0,2 kg) købt fra en græsk certificeret kommerciel opdrætter blev tilfældigt opdelt i tre lige store grupper (kontrol, ME og CHE) og holdt adskilt i frit tilgængelige rustfrit stålbure. til mad og tap vand. Dyreopstaldningsbetingelser var 20 ± 2 °C, relativ fugtighed 60 ± 5 %, ved 12:12 timers lys:mørke-cyklus. Dyr blev behandlet i overensstemmelse med standarderne fastsat af det europæiske direktiv 86/609/EEC. De lokale veterinærmyndigheder og dyreetiske udvalg godkendte (licensnr. K/950) undersøgelsen. Kontrolgruppen modtog en standard afbalanceret kanindiæt (kemisk sammensætning: total fedtsyre 2,5%, cellulose 18,5%, total protein 16,5%, vand 13%, aske 11%, calcium 1,4%, lysin - 0,6%, methionin-cystin - 0,55 %, fosfor 0,55 %, natrium 0,25 %), beriget med 1 % kolesterol (Dolder, Schweiz) (aterogen diæt), ME-gruppen fik en aterogen diæt plus ME (1 % efter vægt) og den atherogene diætgruppe CHE plus CHE (5 vægtprocent) Diæterne blev frisklavet hver tredje dag før indtagelse.

En mængde pistacienødder i pulverform pr. 15 kg høstet fra den græske ø Aegina blev ekstraheret ved stuetemperatur, først affedtet med cyclohexan for at give 7,5 kg af en grøn olieagtig rest efter afdampning af opløsningsmidlet. CHE blev forsæbet ved den sædvanlige procedure, hvilket førte til esterificerede fedtsyrer. Fedtsyremethylestere og den ikke-udfældede rest blev analyseret ved GC og GC/MS, hvilket gav b-sitosterol, squalen, stigmasterol, oliesyre og palmitinsyre som hovedforbindelserne (se supplerende fil 1)
,

Efter ekstraktion af de pulveriserede pistacienødder med cyclohexan blev plantematerialet yderligere ekstraheret med dichlormethan for at opnå 1,5 kg af en grøn olieagtig ekstrakt og derefter med methanol for at opnå en rest på 500 g efter afdampning af opløsningsmidlet. En mængde på 400 g af remanensen blev udsat for XAD-4-harpiks for at fjerne sukker, og ME beriget med phenolforbindelser blev opnået. LC-DAD-ESI(-)-HRMS/MS-metoden blev udviklet til at karakterisere den kemiske profil af det berigede ekstrakt. Analysen blev udført ved hjælp af en UHPLC-enhed forbundet til et højtydende LTQ-Orbitrap Discovery hybridspektrometer. Fenolforbindelser, halogenidmethylester (1), gallussyre (2), protocatechinsyre (3), catechin (4) og epicatechin (5) blev brugt som analysestandarder, og deres identifikation blev udført ved at sammenligne retentionstider, UV- Vis og højpræcisions massespektre af toppene i prøven med prøver af standardforbindelser.

Den vedhæftede supplerende fil 1 giver en detaljeret analyse af komponenterne i uddragene.

Alle dyr blev fastet 12 timer før blodprøvetagning. De blev let bedøvet (ketaminhydrochlorid 12mg/kg, xylazin 2,5mg/kg lgv, IM) til proceduren for at undgå stress. Blodprøver fra dyrs ørearterie blev anbragt i Wasserman-rør indeholdende antikoagulant i løbet af 0, 1, 2 og 3 måneder af den eksperimentelle procedure. Plasma blev adskilt ved centrifugering ved 3500 rpm i 15 min. Plasma totalkolesterol (TC), højdensitetslipoproteinkolesterol (HDL-C), l(LDL-C), triacylglycerol (TAG) koncentrationer, serumalaninaminotransferase (ALT), aspartataminotransferase (AST) og gamma - serumglutamyltransferase (γGT) aktivitet blev målt med kommercielle enzymanalysesæt i henhold til producentens instruktioner (Biomerieux, Lyon, Frankrig) under anvendelse af en automatisk analysator (type 7170A, Hitachi, Tokyo, Japan). MDA blev beregnet ved den manuelle thiobarbitursyre-reaktive stoffer (TBARS) metode som beskrevet af Yagi. Ved afslutningen af ​​den eksperimentelle undersøgelse og efter den sidste blodprøvetagning, under sedation, blev kaniner aflivet med natrium thiopental (30 mg/kg intravenøst).

Aorta blev fjernet fra aortaarterien ind i iliacabifurkationen. Væv, der klæber til adventitia, blev fjernet, og aorta blev skåret i længderetningen langs den mediane ventrale væg. Aorta blev derefter fikseret i 10% phosphatbufret formalin. Den luminale overflade af hver aortaprøve blev taget, og billedet blev lagret elektronisk. Sektioner fra alle prøver blev opnået fra tre standardsteder (umiddelbart distalt for en gren af ​​den venstre subclavia-arterie, ved den syvende interkostale arterie og umiddelbart bagefter cøliaki). Disse prøver blev indlejret i paraffinblokke og farvet med hæmatoxylin-eosin. Histopatologiske aterosklerotiske læsioner af aorta blev klassificeret i henhold til Stareys klassifikation, og tykkelsen og overfladearealet af aterosklerotiske læsioner i aortavæggen blev semikvantiseret ved hjælp af et automatiseret billedanalysesystem. Kort fortalt er de vurderede parametre intimal fortykkelse, skumcelleakkumulering, mononukleære infiltrater, lipidkerne og fibrøs hættedannelse. Digitale billeder blev opnået fra dias ved hjælp af et fotomikroskop (Nikon Eclipse 80i, Nikon Corp, Tokyo, Japan) udstyret med et digitalkamera (Nikon DS - 2 MW). Alle billeder blev overført til en pc med passende software (Image ProPlus v. 5.1, Media Cybernetics, MD, USA).

Hjertet og leveren blev vejet og fikseret i 10% formalinphosphatpufferopløsning. Standardsektioner indlejret i hæmatoxylin-eosin-paraffinblokke blev taget, og myokardieprøver blev yderligere farvet med Massons trichromfarvning.

Myokardiebeskadigelse blev scoret fra 0 til 3 for interstitielt ødem, fibrose og skumcelleinfiltrater. Leverlæsioner blev klassificeret i fire klasser, som tidligere beskrevet, med hensyn til arkitektoniske ændringer, fedtinfiltration og fibrose.

Data blev udtrykt som middel ± standardafvigelse (SD) samt medianværdier på grund af abnormitet. Kolmogorov-Smirnov-testen blev brugt til at analysere parametrenes normalitet.

For at angive en tendens i de første 3 måneders behandling blev den gennemsnitlige procentvise ændring efter 1, 2 og 3 måneders variable beregnet. Sammenligning af procentvis ændring fra baseline af variabler i observationsperioden og histopatologiske variabler mellem de tre grupper blev analyseret ved hjælp af Kruskal-Wallis-testen og Mann-Whitney-testen (parrede sammenligninger).

Alle tests var to-halede, statistisk signifikans blev fastlagt på s

P. vera: Pistacia vera; ME: methanolisk ekstrakt af Pistacia vera; CHE: Pistacia vera cyclohexanekstrakt; GC: gaskromatografi; MS: massespektrometri; UHPLC: Ultra High Liquid Chromatography; LC: væskekromatografi; DAD: diode array detektor; ESI: elektronisk spray-ionisering; HRMS: højopløsningsmassespektrometri; TC: total kolesterol; LDL-C:l; HDL-C: højdensitetslipoproteincholesterol; TAG: triacylglycerol, MDA: lavt aldehyd; ALT: alaninaminotransferase; AST: aspartataminotransferase; y-GT: gamma-glutamyltransferase; TBARS: thiobarbitursyrereaktive stoffer; SD: standardafvigelse; SPSS: Statistisk Pakke for Samfundsvidenskab; SDG: seciolaricirsinol diglucosid.

CM gennemførte en pilotundersøgelse, herunder generel dyregennemgang, diætforberedelse, blodprøvetagning, eutanasi og udarbejdelse af manuskriptet. KG og MH fremstillede cyclohexan- og methanolekstraktet og tilsvarende diæter og analyserede dem. GA og EP udførte og koordinerede alle stadier af vævsprøvepatologi. TK og DI var involveret i vævsfjernelse og manuskriptforberedelse. AP og AC bidrog til designet af undersøgelsen. Premierministeren lancerede et projekt til fremstilling af Pistaci-ekstrakter. NT bidrog til udarbejdelsen af ​​diæterne og manuskriptet. LAS og ID udtænkte undersøgelsesdesignet, koordinerede eksperimenterne og forberedte manuskriptet. Alle forfattere læste og godkendte det endelige manuskript.

Fremgangsmåder til fremstilling af cyclohexan- og methanolekstrakter. Detaljeret information om metoden til fremstilling af cyclohexan- og methanolekstrakter, herunder 2 figurer.

Klik her for fil

Dr. C. Marino er taknemmelig for det græske ministerium for udvikling af landdistrikter og fødevarer for støtte og uddannelsesorlov, og til prof. D. N. Perrea for værdifuld rådgivning og støtte i undersøgelsen. Dr. Dantas anerkender Special Account for Research Grants (nr. 70/4/2591) fra National and Kapodistrian University of Athens for økonomisk støtte. Forfatterne anerkender biostatistikeren Dr. A. Galanos for den ekspert statistiske analyse af undersøgelsen og anerkender ekspertbistanden fra C. Perrea, C. Papadaki, E. Doucy, G. Pantelis, P. Rapos og Z. Mertiri under eksperimenter.