С целью исследования вида опухоли, степени ее распространения и локализации, ряда иных характеристик специалисты прибегают к показателям ki-67. Это один из показателей при проведении диагностики, подтверждающий развитие рака молочных желез. Способен указать на активность роста новообразования злокачественные формы.

Ki67 при злокачественном раке молочной железы — это иммунногистохимическое исследование с использованием реактивных специальных антител при проведения теста на наличие антигенов в крови больного, способствующих выработке антител при введении в организм.

Вводится сыворотка с содержанием антител, после чего можно наблюдать реакцию организма на онкогенный фактор, если развитие рака молочных желез в груди у женщин все же имеет место быть. Должна произойти некая реакция, по которой и судят врачи, что протекает онкологический процесс.

Показатели маркера Ki67 указывают на скорость деления патологических клеток, степень развития и прогрессирования опухоли в процентном соотношении и можно спрогнозировать исход, продолжительность жизни для больного. Кроме того по показателям данного онкомаркера врачами назначается оперативное лечение пациенткам по проведению курса химио – гормонотерапии.

Это самый актуальный маркер на сегодняшний день у онкологов, способный выявить потенциал протекания пролиферативной формы злокачественного новообразования. По уровню ki-67 в крови врачи могут спрогнозировать выживаемость при диагностировании рака молочной железы.

Отметка показателя ниже 10% дает шансы на выживаемость 95% онкобольным. При повышении уровня свыше 10% — 85% женщин на протяжении 5 лет жизни. Ki67 при раке груди молочной железы позволяет выявить степень прогрессирования, онкогенности опухоли, также деления клеток.

При приведении в организм данного белка можно предположить тот, либо иной исход диагностируемой стадии развития опухоли. Индикатор сможет определить скорость деления опухолевидных клеток, степени развития новообразования.

Показатели же дадут возможность предположить врачам выбор того или иного лечения после проведения процедуры по удалению опухоли, либо еще до проведения операции. Раковое новообразование растет более усиленно при повышении индексного значения свыше 30%. Это говорит уже о неблагоприятном течение и прогрессировании болезни.

Выживаемость в таких случаях свыше 2-ух лет практически нулевая. При уровне Ki67 менее 15% можно говорить о благоприятном прогнозе и увеличении шансов на полное излечение от рака молочных желез.

Информативное видео

В последние годы наблюдается увеличение численности онкологических заболеваний молочной железы у женщин. Причина такой неутешительной статистики объясняется многими факторами. Прежде чем прописать соответствующую терапию, онкологи назначают тестирование, результаты которого помогают определиться с лечебной методикой. Среди этих тестов и анализов важную роль играет так называемый индекс ки-67.

Что это за показатель, и как ki 67 при раке молочной железы помогает установить индивидуальность прогрессирования патологии и разработать оптимальный план лечения?

Что такое маркер ki-67 и его значение в онкологии

Индекс ki-67 — это особый белок, так сказать антиген злокачественной опухоли, присутствующий в организме человека. Данное вещество формируется исключительно в момент дробления клеток, но если раковые клетки находятся в пассивном состоянии, выявить его невозможно, поэтому он не обнаруживается при обычном гистологическом изучении биоптата. Благодаря такой особенности маркера, медицине под силу спрогнозировать дальнейшее развитие опухолевого процесса.

Исследование РМЖ осуществляется на образцах перерожденных тканей, которые берутся при биопсии либо во время хирургической операции. Последующая обработка мутированного материала осуществляется либо с применением комплексных тестов, позволяющие вывести шкалу активности геномов, либо иммуногистохимического метода.

На сегодняшний день выявление индекса выполняется при диагностировании пациенток, у которых обнаружена карцинома в молочной железе. Однако данный исследовательский метод эффективен не только при раке груди, а и других опухолей в организме человека, однако именно при РМЖ он выполняется чаще, чем в других эпизодах онкологии.

При злокачественной природе опухоли врач рекомендует женщине пройти тестирование для того, чтобы установить влияет ли показатель антигена на формирование опухоли. Помимо этого, назначаются и другие анализы, к примеру, присутствует ли рецептор her2-neu. Исходя из полученных данных, и разрабатывается дальнейшая противоопухолевая терапия. Чем больше клеток занято в синтезе, тем выше уровень онкомаркера.

Показанием для назначения обследования на ки 67 при раке молочной железы является:

1. Если в организме человека присутствует онкология любой локализации.
2. Если имеются подозрения на злокачественный характер опухоли.
3. Если подозревается рост новообразования.
4. Если необходим тщательный контроль над лечебным процессом.
5. Если требуется найти процент .
6. Если требуется определиться с врачебной методикой по отношению к болезни.

Параллельно с этим устанавливается гормональная особенность опухолевого образования, и насколько велик риск формирования вторичных очагов в лимфатической системе и других органах.

Вне зависимости от того, насколько чувствительна опухоль к терапии гормональными препаратами и присутствует либо отсутствует поражение лимфатических узлов молочной железы, при большом показателе ki-67 часто наблюдаются рецидивы, которые снижают шансы на выздоровление. Под рецидивными моментами подразумевается:

• Возврат недуга после лечебного курса.
• Развитие метастаз в отдаленных внутренних органах (легкие, костный аппарат).
• Местный рецидив, то есть, непосредственно в тканях и лимфоузлах груди, или в послеоперационном рубце.

Если при рецидивирующем раке показатель маркера существенно возрос, по сравнению с первичным, это указывает на необходимость применения более агрессивных лечебных методов и их комбинацию.

Для сдачи анализа на реакцию маркера не требуется особого подготовительного периода и специальной обстановки. Специалист делает забор образца поврежденной ткани и выполняет его окрашивание, тем самым устанавливая численность клеток, готовых к синтезу, или находящихся в цикле размножения.

Для того чтобы расшифровать результат, используется специальный тип реактивов, в которых присутствуют отмеченные определенными веществами антитела:

• Оценка итогового результата окрашивания выполняется с использованием световых микроскопов.
• Процентный показатель устанавливается исходя из соотношения окрашенного клеточного материала к остальному, помимо этого степень тональности окрашивания абсолютно никакой роли не играет.
• При осуществлении тестирования точка отсечки индекса на 15% была установлена исходя из опыта патологоанатомов, при этом учитываются рекомендации известных международных онкологических клиник.
• Тестирование выполняется с учетом разделения всей раковой опухоли.

Расшифровка теста выполняется в процентном соотношении:

• Если окрашивание не произошло, то есть, оно нулевое, это означает, что новообразования в организме не имеется. Другими словами, ни одна клетка не достигла стадии пролиферации.
• Если маркер показал 100%, значит, все клетки находятся в пролиферативной стадии, то есть, они в фазе активного деления. В данной ситуации это указывает на стремительное прогрессирование рака.
• Показатель ниже 20% говорит о медленном росте опухоли.
• Если анализ показал больше 20%, это свидетельствует о быстром росте опухоли.

Данный индекс применяется и с целью определения эффективности терапии. Если она прошла удачно, то уровень маркера понижается.

Какая польза от пролиферативного индекса?

Онкомаркер ки-67 отличается высокой способностью в отношении определения делящихся (пролиферативных) клеток. Установив его степень, можно с точностью спрогнозировать показатель выживаемости.

Если его уровень очень высокий, то есть дробящих клеток достаточно много, значит, раковая опухоль будет хорошо поддаваться лечению химией. Дело в том, что препараты, используемые при химиотерапии, воздействуют только на пролиферативные клетки, а в иной ситуации ее применение не даст должного лечебного эффекта.

Однако у каждого высокоточного анализа имеются индивидуальные минусы, не является исключением и маркер ки 67. С одной стороны, высокий индекс указывает на неутешительный прогноз, но эффективность химиотерапии будет высока. С другой стороны, этот тест может и не пригодится при адъювантной химиотерапии.

Нормы, показатели и дальнейший прогноз при онкологии груди

Исходя из показателя ki-67 при онкологии грудной железы, и определяется дальнейшая терапия в отношении болезни. Исходя из того, насколько сильно превышена его норма и определяется дальнейший метод лечения:

1. Химиотерапия.
2. Лучевое облучение.

Учитывая результаты анализов и предполагаемого прогноза, выполняется расшифровка ki 67, исходя из которой, можно сказать, сколько пациентке остается жить:

• Менее 10% — положительный прогноз равен 95%. Если результат в пределах 10-15%, то рубеж в 5 лет благополучен для 85% женщин с карциномой.
• До 15% — считается благоприятным показателем. В данном случае для лечения показан курс гормональными препаратами.
• Результат в 30% — раковые клетки энергично делятся, однако реакция опухоли на химиотерапию будет хорошая. Чем выше показатели ки 67, тем лучше злокачественные клетки поддаются лечению.
• Если результат равный 90%, прогноз считается неутешительным, шанс на выживаемость — нулевой.

Если во время рецидива болезни онкомаркер показывает более высокое значение, чем было при первичной опухоли, значит, вторичная популяция опухоли имеет более агрессивный характер. В данном эпизоде потребуется комбинированная терапия, и скорее намного травматичнее, чем на первой стадии патологии.

1

Целью исследования являлось сравнительное изучение уровней экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в подтипах тройного негативного рака молочной железы (ТНРМЖ) с различным андрогеновым статусом. Исследован операционный материал от 60 пациенток клинической группы 2А, клинической стадии T1-2N0M0, находившихся на лечении в ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ с 2012 по 2015 г. Во всех случаях операция являлась первым этапом лечения. Для иммуногистохимического исследования были использованы антитела к рецепторам эстрогена, прогестерона, андрогена, цитокератинам 5/6, Ki-67, Циклину D1, белкам HER2/neu и EGFR. Установлено, что в ТН РМЖ с признаками базального эпителия отмечался достоверно более высокий уровень экспрессии Ki-67 по сравнению с остальными ТН РМЖ, однако уровень экспрессии Циклина D1 был не однозначен. В части ТН РМЖ наблюдалась сверхэкспрессия Циклина D1, не имевшая корреляционной связи с уровнем экспрессии Ki-67. Высокий уровень Циклина D1 в базальноподобном ТН РМЖ встречался реже, чем в ТН РМЖ без признаков базального эпителия, однако его среднее значение было достоверно выше. Уровень Ki-67 достоверно не отличался в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом. Гиперэкспрессия Циклина Д1 чаще наблюдалась среди андроген-положительных ТН РМЖ, причем ее среднее значение было достоверно выше по сравнению с андроген-отрицательными.

рецепторы андрогена.

базальноподобный тройной негативный рак молочной железы

тройной негативный рак молочной железы

1. Информационный бюллетень ВОЗ. 2015. – URL: http://www.who.int/ mediacentre/factsheets/fs297/ru/. / Informatsionnyi biulleten" VOZ. 2015. .

2. Тюляндин С.А., Стенина М.Б., Фролова М.А. Тройной негативный рак молочной железы // Практическая онкология. – 2010. – № 11 (4). – C. 247-52.

3. Perou C.M., Sørlie T., Eisen M.B. et al. Molecular portraits of human breast tumors // Nature. - 2000. - Vol. 406. - P. 747-752.

4. Кит О.И., Шатова Ю.С., Франциянц Е.М. и др. Путь к персонифицированной тактике лечения больных раком молочной железы // Вопросы онкологии. – 2017. – Т. 63. - № 5. - С. 719-723.

5. Andre F., Zielinski C. Optimal strategies for metastatic triple negative breast cancer with currently approved agents // Ann. Oncol. – 2013. - Vol. 24 (4). - P. 46-51.

6. Тодоров С.С., Босенко Е.С., Кучкина Л.П. и др. Биологическая гетерогенность тройного негативного рака молочной железы // Евразийский онкологический журнал: мат. IX Съезда онкологов и радиологов стран СНГ и Евразии (Минск, 15-17 июня, 2016 г.). – 2016. – Т. 4. - № 2. - С. 469.

7. Храмцов А.И. Определение базовых прогностических маркеров рака молочной железы с использованием технологии тканевых матриц: дис. … канд. мед. наук. – СПб., 2011. – 123 с.

8. Нефедова Н.А., Данилова Н.В. Клинико-морфологическая характеристика подтипов тройного негативного рака молочной железы // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 9-5. – С. 881-885.

9. Шатова Ю.С., Франциянц Е.М., Новикова И.А. и др. Антиандрогенная терапия: новое направление таргетной терапии рака молочной железы // Современные проблемы науки и образования. – 2017. – № 3. - URL: http://www.?id=26392 (дата обращения: 07.03.2018).

10. Крылов А.Ю., Крылов Ю.В., Янченко В.В. Определение андрогеновых рецепторов в клетках тройного негативного рака молочной железы // Иммунопатология, аллергология, инфектология. – 2016. – № 1. - С. 32-36 (Белоруссия).

11. Скворцов В.А., Манихас Г.М. Циклин D1 и его прогностическая значимость в планировании эндокринной терапии у женщин постменопаузального возраста при раке молочной железы // Врач-аспирант. – 2012. – № 1.3 (50). - С. 401-407.

12. Басинский В.А., Савицкий С.Э., Шульга А.В. Прогностическое значение уровня экспрессии циклинов B1 и Д1 при раке яичников // Проблемы здоровья и экологии. - 2009. - С. 57-61.

13. José M. Coco Martin J.M., Balkenende A., Verschoor T. et al. Cyclin D1 overexpression enhances radiation-induced apoptosis and radiosensitivity in a breast tumor cell line // Cancer Res., 1999. – Vol. 59. - № 5. – P. 1134-1140.

14. Тюляндин С.А. Перспективные подходы лекарственной терапии немелкоклеточного рака легкого // Новое в терапии рака легкого (терапия рака легкого начала XXI века) / под ред. Н.И. Переводчиковой. – М., 2003 [Электронный ресурс]. – URL: https://medi.ru/info/11123/ (дата обращения: 07.03.2018).

15. Pestell R.G. New roles of Cyclin D1 // Am. J. Pathol. - 2013. - Vol. 183 (1). - P. 3-9.

Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре онкопатологии у женщин во всем мире. Ежегодно в мире регистрируется более 1 млн случаев данной патологии, влекущей за собой летальный исход более чем 520 тыс. заболевших пациенток .

Тройной негативный рак молочной железы (ТН РМЖ) составляет от 10 до 20% всех опухолей молочной железы, это агрессивные опухоли, быстро дающие отдаленные метастазы, для них характерен плохой прогноз .

Успехи лечения и прогноза РМЖ напрямую зависят от правильной и своевременной морфологической, иммуногистохимической, молекулярно-генетической диагностики данного заболевания .

Ввиду отсутствия в клетках ТН РМЖ всех трех стандартных мишеней таргетной терапии (эстрогеновых рецепторов (ЭР), прогестероновых рецепторов (ПР) и HER2/neu-рецепторов), на сегодняшний день не существует специализированного лечения для этих опухолей, кроме терапии химиопрепаратами, действующими на все делящиеся клетки .

Наиболее часто выделяемым подтипом является базальноподобный ТН РМЖ, составляющий около 70% ТН РМЖ. В многочисленных работах предлагаются различные маркеры для выявления этого подтипа РМЖ: EGFR, высокомолекулярные базальные цитокератины (CК5/6, CК14, CК17), с-KIT, NGFR, белки р63, ламинил, остеонектин, виментин и ряд других . Однако единый диагностический стандарт пока не разработан.

Высказываются предположения о возможных различиях в тактике лечения подтипов ТН РМЖ. Весьма актуальным является поиск потенциальных мишеней для таргетной терапии подтипов ТН РМЖ путем определения значимых биологических маркеров и перехода к действительно персонифицированному лечению этой категории больных и, соответственно, улучшения его результатов .

Последние годы у исследователей вызывает интерес факт сохранности андрогеновых рецепторов (АР) в РМЖ отрицательных по ЭР и ПР. Обнаружено, что в ТН РМЖ также могут сохраняться АР, однако данные о доле таких опухолей сильно варьируют - от 10 до 43%, также нет однозначного мнения о прогностической значимости этого маркера .

Ki-67 - это ядерный белок, который связан с клеточной пролиферацией и экспрессируется в фазах митотического цикла S, G1, G2, и M, кроме G0. В образцах нормальной ткани молочной железы он также экспрессируется, но на низком уровне (менее 3% клеток). Уровень экспрессии Ki-67 во многом определяет тактику адъювантного лечения больных РМЖ. Для ТН РМЖ характерна гиперэкспрессия маркера пролиферации Ki-67.

Особый интерес представляют биомаркеры, которые участвуют в регуляции клеточного деления. В частности, циклины, ассоциированные с ними циклин-зависимые киназы и циклин-зависимые ингибиторы киназ играют важнейшую роль в развитии клеточного цикла. Наиболее актуальным биомаркером является регулятор клеточного цикла - Циклин D1. Повышенная продукция Циклина D1 способствует инициации клеточного деления. Данные об уровне экспрессии Циклина D1 и его прогностическом значении в РМЖ и других опухолях немногочисленны и противоречивы .

Цель исследования: изучить уровни экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в базальноподобном и небазальноподобном ТН РМЖ, в том числе при наличии и отсутствии АР в опухоли.

Материал и методы. Материалом для настоящего исследования послужил операционный материал от 60 пациенток с ТН РМЖ, находившихся на лечении в ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» МЗ РФ с 2012 по 2015 г. Пациентки относились к клинической группе 2А, T1-2N0M0 (по результатам маммографии, УЗИ молочных желез и СКРТ органов грудной клетки, брюшной полости и малого таза). Во всех случаях операция являлась первым этапом лечения. Возраст пациенток колебался от 29 лет до 71 года. Т.к. возраст 40 больных (66,7%) приходился на промежуток от 41 до 60 лет, то средний возраст в группе составил 51,3±3,5 года.

На основании стандартного иммуногистохимического (ИГХ) исследования у всех пациенток был выявлен ТН РМЖ (ER-/PR-/Her2-негативный), и определен уровень Ki-67. Дополнительно определили экспрессию АР и Циклина D1.

Для ИГХ-исследования с парафиновых блоков операционного материала готовили срезы толщиной 3-4 мк и проводили окрашивание в иммуногистостейнере BenchMark ULTRA. В таблице 1 представлена информация об использованных антителах.

Таблица 1

Характеристика использованных антител

	Антитело		Производитель	Разведение	Демаскировка
			Thermo Scientific		Трис буфер PH=8,0-8,5
					Цитратный PH=6
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5
					Трис PH=8,0-8,5

Для характеристики экспрессии Ki-67, АР и Циклина D1 вычисляли долю клеток с окрашенными ядрами в процентах от общего количества опухолевых клеток. Андроген-положительными (АР+) считали опухоли с экспрессией ≥ 10% клеток опухоли, соответственно андроген-отрицательными (АР-) с экспрессией <10% клеток.

Для статистической обработки результатов использовали параметрические методы статистики для показателей вариационного ряда: средняя арифметическая (М), ошибка средней (m), медиана (Me), коэффициент вариации (C.V.). Достоверность разницы между двумя средними определяли по значению t-критерия Стьюдента, корреляционную связь оценивали по коэффициенту корреляции Пирсона (r).

Результаты и обсуждение. На основании результатов ИГХ-исследования с антителами к СК5/6 и EGFR все ТН РМЖ распределились следующим образом: базальные характеристики были выявлены в 37 (61,7%) случаях (БП ТН РМЖ) и отсутствовали в 23 (38,3%), последние мы отнесли к НК ТН РМЖ (табл. 2).

Таблица 2

Уровень экспрессии Ki-67 и Циклина D1 в ТН РМЖ

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница между показателями, обозначенными символом ● - достоверна (Р≤0,05).

В целом в ТН РМЖ уровень Ki-67 составил 76,4±2,2% (Ме=80, C.V.=20,4). Средний уровень Ki-67 в БП ТН РМЖ был достоверно выше, чем в НК ТН РМЖ - 81,9±3,1% и 70,8±3,1% соответственно (P<0,05). В обеих группах разброс данных по этому показателю был незначительный, на что указывали коэффициенты вариации менее 30 (табл. 2).

Среднее значение уровня экспрессии Циклина D1 в ТН РМЖ составило 35,4±5,1. Разница средних показателей экспрессии Циклина D1 в БП ТН РМЖ и НК ТН РМЖ (38,1±8,1 и 32,8±6,5% соответственно) была не достоверна, также были близки значения медианы (22,5 и 20 соответственно) (табл. 2). Проведенный корреляционный анализ зависимости между уровнями экспрессии Ki-67 и Циклина D1 показал, что коэффициент корреляции имеет значения, близкие к нулю, что указывает на статистически не значимую зависимость этих количественных показателей (табл. 2).

Обращал на себя внимание высокий коэффициент вариации как в целом, так и в обеих группах ТН РМЖ - около 100, что свидетельствовало о большой вариабельности значений уровня экспрессии Циклина (табл. 2). И действительно, в изучаемых ТН РМЖ уровень экспрессии Циклина D1 колебался от 1% до практически 100% окрашенных ядер. Поэтому мы разделили каждую группу еще на 2 подгруппы: с высоким показателем экспрессии Циклина D1 и низким. За пороговое значение Циклина D1 мы приняли 30%, т.к. ранее встречали в работах других авторов подобную градацию . Данные представлены в таблице 3.

Таблица 3

Экспрессия маркеров клеточного цикла в подгруппах ТН РМЖ с высоким и низким уровнем Циклина D1

Группа ТН РМЖ			Уровень экспрессии ИГХ-маркера (М±m, %)
Всего: 60 (100)	Базальноподобный		89,9 ±4,7▲	83,3 ±4,7 ●
			12,2 ±2,8	81,3 ±3,9
		Всего: 37 (100)
	Неклассифицированный		66,5 ±6,6▲	70,1±3,6 ●
			8,6 ±2,7	75 ±4,1
		Всего: 23 (100)

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница показателей, помеченных одинаковыми символами (▲ или ●), достоверна (Р<0,05).

Высокий уровень Циклина D1 в обеих группах встречался реже, чем низкий: в БП ТН РМЖ он наблюдался в 32,4% наблюдений, в НК ТН РМЖ в 43,5%. Средний уровень экспрессии этого маркера был достоверно выше (Р≤0,05) в БП ТН РМЖ - 89,9±4,7%, против 66,5±6,6% в НК ТН РМЖ (медиана - 92% и 70% соответственно) (табл. 3). Коэффициенты вариации в обоих случаях были меньше 30, что указывало на однородность исследуемых рядов данных.

Экспрессия Ki-67 в БП ТН РМЖ с высоким уровнем Циклина D1 составила в среднем 83,3±4,7%, в НК ТН РМЖ - 70,1±3,6%, медиана 85 и 70% соответственно, разница показателей являлась достоверной (Р<0,05). Низкий показатель коэффициента вариации (<30) также позволил сделать заключение об относительной однородности данных (табл. 3).

Низкий уровень Циклина D1 составил в среднем в БП ТН РМЖ - 12,2±2,8%, а в НК ТН РМЖ - 8,6±2,7%. Разница показателей не являлась достоверной в силу большой вариабельности данных в обеих подгруппах (коэффициент вариации 89,3 и 110,5 соответственно). Средний уровень экспрессии Ki-67 между подгруппами с низким уровнем Циклина D1 также не имел статистически достоверного различия и составил в БП ТН РМЖ - 81,3±3,9%, а в НК ТН РМЖ - 75 ±4,1% (p>0,05).

Т.о., высокая экспрессия Циклина D1 в БП ТН РМЖ встречалась несколько реже, но ее средний уровень был достоверно на 23,4% выше, чем в ТН РМЖ без признаков базального эпителия (p<0,05).

В таблице 4 представлены результаты определения АР в изучаемых ТН РМЖ.

Таблица 4

Экспрессия Ki-67 и Циклина D1 в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом

Примечания: Ме - медиана, C.V. - коэффициент вариации.

АР+ опухоли наблюдались в 11 случаях (18,3%), средний показатель экспрессии АР составил 51,6±3,4%, Ме=71,9%. Можно отметить, что в 5 опухолях экспрессия составила 10-30%, в остальных 6 - от 80-95%. Т.е. при наличии в опухоли экспрессии АР она была либо низкой, либо высокой, средних показателей в диапазоне >30%, но <80% не наблюдалось. Соответственно АР- статус был установлен в 49 опухолях (81,7%). Долевое соотношение ТН РМЖ с признаками базального эпителия и без таковых было практически одинаковым как в АР+, так и в АР- опухолях (табл. 4).

Экспрессия Ki-67 в среднем составила в АР+ опухолях 68,9±6,4% (Ме=70), в АР- - 76±2,7% (Ме=80), различие этих показателей не было статистически достоверно (p>0,05) (табл. 4).

При кажущейся разнице экспрессии Циклина D1 в АР+ опухолях, по сравнению с АР- (51,8±13,7% и 31,6±5,1% соответственно), она также не была статистически достоверной (p>0,05). Высокий коэффициент вариации уровня Циклина D1, независимо от наличия или отсутствия АР в опухолях, указывал на крайнюю неоднородность этого показателя (АР+ - C.V.=74,8; АР- - C.V.=101,6) (табл. 4). В связи с этим также разделили ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом на подгруппы с гиперэкспрессией Циклина Д1 и его низким уровнем, данные представлены в таблице 5.

Таблица 5

Экспрессия маркеров клеточного цикла в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом в подгруппах с высоким и низким уровнем Циклина D1

АР-статус		Подгруппа ТН РМЖ по уровню Циклина D1	Уровень экспрессии ИГХ-маркера (М±m, %)
Всего: 60 (100)			91,3 ±4,3▲	71,3 ±4,9
			20,2 ±6,2	66 ±11,7
		Всего: 11 (100)
			72,8 ±5,87▲	73,3±5,1
			9,4 ±1,9	79,04 ±3
		Всего: 49 (100)

Примечания: C.V. - коэффициент вариации, Ме - медиана. Разница показателей, помеченных символом ▲ - достоверна (Р<0,05).

В АР+ ТН РМЖ примерно с равной частотой наблюдались высокий и низкий уровни экспрессии Циклина Д1 (45,5% и 54,5% соответственно). Уровень Ki-67 в этих подгруппах достоверно не отличался. В АР- ТН РМЖ доля опухолей с высокой экспрессией Циклина Д1 была почти в 2 раза меньше, чем опухолей с низкой экспрессией (34,7% против 65,3%).

В среднем в АР+ ТН РМЖ гиперэкспрессия Циклина Д1 была достоверно выше, чем таковая в АР- ТН РМЖ, 91,3% и 72,8% соответственно, Р<0,05 (табл. 5). Уровень Ki-67 достоверно не отличался ни в ТН РМЖ с различным андрогеновым статусом, ни в их подгруппах с высокой или низкой экспрессией Циклина Д1.

Таким образом, в части ТН РМЖ как с признаками базального эпителия, так и в случае их отсутствия была выявлена гиперэкспрессия Циклина D1. Гиперэкспрессия Циклина D1 зарегистрирована в различных опухолях, и большинство авторов исследований делают вывод, что ее роль в онкогенезе негативна. Повышенная экспрессия Циклина D1 в доброкачественных опухолях, может предшествовать их озлокачествлению, а также ассоциирована со снижением общей выживаемости онкобольных . На примере немелкоклеточного рака легкого установлено, что гиперэкспрессия Циклина D1 происходит за счет амплификации или гиперэкспрессии гена PRAД1, кодирующего Циклин D1, а повышенная продукция Циклина D1 способствует инициации клеточного деления . Выявлена роль Циклина D1 в индукции клеточной миграции и инвазии, усилении ангиогенеза . Имеются экспериментальные данные о том, что гиперэкспрессия Циклина D1 повышает индуцированный облучением апоптоз и радиочувствительность линии клеток опухоли молочной железы .

Несмотря на то что в рамках проведенного исследования количество АР+ ТН РМЖ было небольшим, удалось выявить некоторые тенденции. Андрогеновый статус не влиял на уровень пролиферативной активности в ТН РМЖ, а гиперэкспрессия Циклина Д1 наблюдалась в части опухолей как АР+, так и АР-. Уровень высокой экспрессии Циклина Д1 в АР+ ТН РМЖ был в среднем достоверно выше, чем в АР-. Также среди АР+ ТН РМЖ большая доля опухолей имела гиперэкспрессию Циклина Д1. Имеются исследования, в которых показано, что женщины с Циклин D1-негативным, ЭР+ РМЖ имеют лучший прогноз при лечении . Возможно, что применение гормональной терапии в отношении андрогена будет иметь ту же закономерность для АР+ ТН РМЖ.

Заключение

В БП ТН РМЖ наблюдался достоверно более высокий уровень экспрессии общего маркера пролиферации Ki-67 по сравнению с ТН РМЖ, не имевшими признаков базального эпителия.

Различие средних значений Циклина Д1 этих групп не достоверно. Уровень Циклина D1 в обеих группах очень вариабелен и корреляционно не связан с экспрессией Ki-67.

Разделение изучаемых групп ТН РМЖ на подгруппы с высоким и низким уровнем экспрессии Циклина Д1 позволило установить, что в части ТН РМЖ наблюдалась гиперэкспрессия Циклина Д1, являющегося маркером такого важного звена митотического цикла, как S-фаза. Высокий уровень Циклина D1 в БП ТН РМЖ наблюдался реже, чем в небазальноподобных ТН РМЖ, однако его среднее значение в первом случае достоверно выше. При низком же уровне экспрессии Циклина D1 достоверных различий между группами не наблюдалось по причине значительного разброса данных.

При гиперэкспрессии Циклина D1 в опухолях сохранялся достоверно более высокий уровень Ki-67 в БП ТН РМЖ по сравнению с НК ТН РМЖ; при низком же уровне Циклина D1 достоверность различий отсутствовала.

Доля опухолей с высокой экспрессией Циклина Д1 была несколько больше среди АР+ ТН РМЖ, причем ее среднее значение было достоверно выше по сравнению с АР- опухолями.

Библиографическая ссылка

Ващенко Л.Н., Карнаухов Н.С., Гудцкова Т.Н., Кварчия М.В. СОПОСТАВЛЕНИЕ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ МАРКЕРОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ KI-67 И ЦИКЛИНА D1 В ТРОЙНОМ НЕГАТИВНОМ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ С РАЗЛИЧНЫМ АНДРОГЕНОВЫМ СТАТУСОМ // Современные проблемы науки и образования. – 2018. – № 4.;
URL: http://?id=27732 (дата обращения: 01.02.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Для верного лечения рака молочной железы необходимо провести множество тестов и анализов, среди которых определение индекса Ki-67. Этот маркер чрезвычайно важен, он позволит составить верный план лечения и определить, как развивается опухоль. Что нужно знать об этом маркере? Как проводится тест? Каковы прогнозы?

Под Ki67 подразумевается антиген раковой опухоли. Его можно увидеть в клетке при ее делении, но если она находится в фазе покоя, то обнаружить этот антиген невозможно. Благодаря этому маркеру можно прогнозировать поведение раковой опухоли. Тест берется с помощью биопсии или оперативным путем, проводится на образце ткани.

Какова роль маркера

Тест на этот вид маркера проводится не только для рака груди, но и для других злокачественных опухолей. Но в большинстве случаев, именно на рак молочной железы приходится основной процент проведённых тестов с Ki-67. Если уровень антигена высокий, то прогнозы неутешительные и опухоль прогрессирует. Если процент Ki-67 большой, то вероятность рецидива увеличивается. Причем независимо от того, как реагирует новообразование на гормональное лечение.

Если после проведенного лечения заболевание снова дает о себе знать и при этом маркер еще выше, то это говорит о том, что нужно комбинировать несколько методов противораковой терапии.

Когда нужно проводить тест

Если онкология агрессивная, то врач назначает тест для того, чтобы убедиться влияет ли уровень антигена на развитие опухоли. Также сдается ряд и других тестов, например на наличие рецептора HER2 - Neu. Данные, полученные со всех тестов дадут основу для составления плана лечения.

Если опухоль растет быстро, меняется, это может служить основанием для проведения теста. Ведь индекс указывает на количество клеток в стадии деления, а чем больше их делится, тем больше становится.

Как делается анализ

Для того чтобы сдать анализ не нужно какой-то специальной подготовки или условий проведения. Берется часть пораженной ткани и окрашивается. Это позволит определить процент клеток, находящихся или готовящихся к делению. Чем больше клеток в стадии деления, тем еще больше их будет.

Методы анализа:

• Результат окрашивания оценивается с помощью световых микроскопов.
• Процент определяется соотношением окрашенных клеток ко всем остальным, при этом интенсивность окраски не имеет никакого значения.
• Метод на 15% был изучен врачами патологоанатом, также применяются рекомендации международных медицинских учреждений.
• Тест проводится с учетом раздела всей опухоли.

Итоги теста определяются процентом, если он равен 0%, то не одна из клеток рака не находится в стадии деления, а значит опухоль развивается очень медленно. Если индекс равен 100%, то значит, что все клетки в стадии пролиферации (деления) и опухоль прогрессирует быстро. Если меньше 20% — опухоль растет медленно, все что больше 20% — быстрорастущая онкология. Индекс также используется для оценки эффективности лечения, если оно удачное, то уровень понижается.

Пролиферативный индекс и его польза

Ki 67 — маркер, который является хорошим показателем нахождения клетки в стадии деления (пролиферации). Именно поэтому индекс называют пролиферативным. Уровень маркера означает соотношение клеток, находящихся в стадии деления ко всем остальным. Зная уровень индекса можно сделать довольно точный прогноз выживаемости.

Если уровень индекса высок, то есть делящихся клеток много, то такой рак хорошо подается химиотерапии. Это связано с тем, что препараты химиотерапии убивают только те клетки, которые находятся в стадии пролиферации, а значит и эффективность их высока. Зная индекс, медики смогут подобрать наиболее эффективный план лечения злокачественной опухоли груди.

Спорные вопросы

Ki-67 маркер при раке молочной железы имеет две стороны медали. С одной стороны, если индекс высокий, то прогноз неутешительный, но зато химиотерапия здесь будет точно эффективна.

Другой спорный вопрос об этом тесте заключается в том, будет ли он полезен при определении необходимости адъювантной химиотерапии.

Если результат теста плохой

Зная, что высокий уровень маркера означает плохой прогноз, у пациентки может появиться серьезное чувство тревоги за собственное здоровье. Но не стоит отчаиваться, ведь медицина имеет множество методов лечения рака даже на самых последних стадиях. И знать результаты анализов необходимо, пусть даже они неутешительные, это позволит назначить адекватное лечение.

Чтобы не падать духом, стоит искать поддержку в семье, также не лишним будет общение с женщинами, больными раком груди. Общение может быть как живым, так и через интернет, это позволит не оставаться со своей проблемой наедине, также можно получить много полезной информации.

Стоит знать и некоторую статистику выживаемости:

• При индексе меньше 10% выживаемость — 95%.
• Если индекс выше 10% выживаемость – 85%.

Вывод: при уровне антигена, приближающемся к 100%, шансов на выживание очень мало. Однако даже на такой стадии рак подвергается лечению. С помощью показаний маркера врач определит точно, как прогрессирует болезнь и найдет наиболее качественный способ лечения. Помните, надежду нельзя терять никогда. Шанс на исцеление есть всегда!