Клебсиелла и клебсиеллезы. Клебсиеллы - микробиология с техникой микробиологических исследований Какие заболевания провоцирует бактерия

Учебник состоит из семи частей. Часть первая – «Общая микробиология» – содержит сведения о морфологии и физиологии бактерий. Часть вторая посвящена генетике бактерий. В части третьей – «Микрофлора биосферы» – рассматривается микрофлора окружающей среды, ее роль в круговороте веществ в природе, а также микрофлора человека и ее значение. Часть четвертая – «Учение об инфекции» – посвящена патогенным свойствам микроорганизмов, их роли в инфекционном процессе, а также содержит сведения об антибиотиках и механизмах их действия. Часть пятая – «Учение об иммунитете» – содержит современные представления об иммунитете. В шестой части – «Вирусы и вызываемые ими заболевания» – представлены сведения об основных биологических свойствах вирусов и о тех заболеваниях, которые они вызывают. Часть седьмая – «Частная медицинская микробиология» – содержит сведения о морфологии, физиологии, патогенных свойствах возбудителей многих инфекционных заболеваний, а также о современных методах их диагностики, специфической профилактики и терапии.

Учебник предназначен для студентов, аспирантов и преподавателей высших медицинских учебных заведений, университетов, микробиологов всех специальностей и практических врачей.

5-е издание, исправленное и дополненное

Книга:

Род Klebsiella относится к семейству Enterobacteriaceae . В отличие от подавляющего большинства родов этого семейства, бактерии рода Klebsiella обладают способностью образовывать капсулу. К роду Klebsiella относится несколько видов. Основную роль в патологии человека из них играет вид Klebsiella pneumoniae , которая подразделяется на три подвида: K. pneumoniae subsp. pneumoniae, K. pneumoniae subsp. ozaenae и K. pneumoniae subsp. rhinoscleromatis . Однако за последние годы выявлены новые виды клебсиелл (K. oxytoca, K. mobilis, K. planticola, K. terrigena ), которые пока мало изучены и роль их в патологии человека уточняется. Название рода дано в честь немецкого бактериолога Э. Клебса. Клебсиеллы постоянно обнаруживают на коже и слизистых оболочках человека и животных. K. pneumoniae – частый возбудитель внутрибольничных инфекций, в том числе смешанных.

Клебсиеллы – грамотрицательные эллипсоидные бактерии, имеют форму толстых коротких палочек с закругленными концами, размером 0,3 – 0,6 ? 1,5 – 6,0 мкм, капсульная форма имеет размеры 3 – 5 ? 5 – 8 мкм. Размеры подвержены сильным колебаниям, особенно у клебсиелл пневмонии. Жгутики отсутствуют, бактерии спор не образуют, у части штаммов имеются реснички. Обычно видна толстая полисахаридная капсула; бескапсульные формы могут быть получены при воздействии на бактерии низкой температуры, сыворотки, желчи, фагов, антибиотиков и при мутациях. Расположены попарно или поодиночке.

Клебсиеллы хорошо растут на простых питательных средах, факультативные анаэробы, хемоорганотрофы. Оптимальная температура роста 35 – 37 °C, рН 7,2 – 7,4, но могут расти при 12 – 41 °C. Способны расти на среде Симмонса, т. е. использовать цитрат натрия в качестве единственного источника углерода (кроме K. rhinoscleromatis ). На плотных питательных средах образуют мутные слизистые колонии, причем в молодых 2 – 4-часовых колониях бактерии озены располагаются рассеянно-концентрическими рядами, риносклеромы – концентрическими, пневмонии – петлеобразно, что легко определяется при микроскопии колонии с малым увеличением и может быть использовано для их дифференциации. При росте в МПБ клебсиеллы вызывают равномерное помутнение, иногда со слизистой пленкой на поверхности; на полужидких средах рост более обилен в верхней части среды.

Клебсиеллы ферментируют углеводы с образованием кислоты или кислоты и газа, восстанавливают нитраты в нитриты. Желатин не разжижают, индола и сероводорода не образуют. Обладают уреазной активностью, не всегда створаживают молоко. Менее всего биохимическая активность выражена у возбудителя риносклеромы (табл. 26).

Таблица 26

Биохимические признаки клебсиелл


Примечание. (+) – признак положительный; (–) – признак отсутствует; d – признак непостоянный.

Антигены. У клебсиелл имеются О– и К-антигены. По О-антигену клебсиеллы подразделяют на 11 серотипов, а по капсульному К-антигену – на 82. Серологическое типирование клебсиелл основано на определении К-антигенов. Группоспецифический антиген обнаружен почти у всех штаммов клебсиелл. Некоторые К-антигены родственны К-антигенам стрептококков, эшерихий и сальмонелл. Обнаружены О-антигены, родственные О-антигенам E. coli .

Основными факторами патогенности клебсиелл являются К-антиген, подавляющий фагоцитоз, и эндотоксин. Помимо них, K. pneumoniae может продуцировать термолабильный энтеротоксин – белок, по механизму действия подобный токсину энтеротоксигенной кишечной палочки. Клебсиеллы обладают выраженными адгезивными свойствами.

Эпидемиология. Клебсиеллез является чаще всего внутрибольничной инфекцией. Источником служит больной человек и бактерионоситель. Возможно как экзогенное, так и эндогенное заражение. Наиболее частые – пищевой, воздушно-капельный и контактно-бытовой. Факторами передачи чаще всего являются пищевые продукты (особенно мясные и молочные), вода, воздух. В последние годы частота клебсиеллезов возросла, одна из причин этого – повышение патогенности возбудителя в связи со снижением резистентности организма человека. Этому способствует также широкое использование антибиотиков, изменяющих нормальное соотношение микроорганизмов в естественном биоценозе, иммунодепрессантов и т. д. Следует отметить высокую степень резистентности клебсиелл к различным антибиотикам.

Клебсиеллы чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ, при температуре 65 °C погибают в течение 1 ч. Довольно устойчивы во внешней среде: слизистая капсула предохраняет возбудителя от высыхания, поэтому клебсиеллы могут сохраняться в почве, пыли палат, на оборудовании, мебели при комнатной температуре неделями и даже месяцами.

Патогенез и клиника. K. pneumoniae чаще всего вызывают заболевание, протекающее по типу кишечной инфекции и характеризующееся острым началом, тошнотой, рвотой, болями в животе, диареей, лихорадкой и общей слабостью. Продолжительность болезни – 1 – 5 дней. Клебсиеллы могут вызывать поражение органов дыхания, суставов, мозговых оболочек, конъюнктивы, мочеполовых органов, а также сепсис и гнойные послеоперационные осложнения. Наибольшей тяжестью отличается генерализованное септико-пиемическое течение болезни, приводящее нередко к летальному исходу.

K. ozaenae поражает слизистую оболочку носа и его придаточных пазух, вызывает их атрофию, воспаление сопровождается выделением вязкого зловонного секрета. K. rhinoscleromatis поражает не только слизистую оболочку носа, но и трахею, бронхи, глотку, гортань, при этом в пораженной ткани развиваются специфические гранулемы с последующим склерозированием и развитием хрящевидных инфильтратов. Течение заболевания хроническое, смерть может наступить на фоне обтурации трахеи или гортани.

Постинфекционный иммунитет непрочный, носит в основном клеточный характер. При хроническом заболевании иногда развиваются признаки ГЧЗ.

Лабораторная диагностика. Основным методом диагностики является бактериологический. Материал для посева может быть различным: гной, кровь, ликвор, испражнения, смывы с предметов и др. Его сеют на дифференциально-диагностическую среду К-2 (с мочевиной, рафинозой, бромтимоловым синим), через сутки вырастают крупные блестящие слизистые колонии с окраской от желтой или зеленожелтой до голубой. Далее у бактерий определяют подвижность посевом в среду Пешкова и наличие орнитиндекарбоксилазы. Эти признаки не свойственны клебсиеллам. Окончательная идентификация заключается в изучении биохимических свойств и определении серогруппы с помощью реакции агглютинации живой культуры с К-сыворотками. Выделенная чистая культура проверяется на чувствительность к антибиотикам.

Иногда для диагностики клебсиеллезов может быть использована реакция агглютинации или РСК со стандартным О-клебсиеллезным антигеном или с аутоштаммом.

Диагностическое значение имеет четырехкратное нарастание титров антител.

Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Общая профилактика сводится к строгому соблюдению санитарно-гигиенических норм при хранении пищевых продуктов, строгому соблюдению асептики и антисептики в лечебных учреждениях, а также соблюдению правил личной гигиены.

Лечение клебсиеллезов по клиническим показаниям проводится в условиях стационара. При поражении кишечника антибиотики не показаны. При явлениях обезвоживания (наличие у возбудителя энтеротоксина) перорально или парентерально вводят солевые растворы. При генерализованных и вялотекущих хронических формах применяют антибиотики (в соответствии с результатами проверки на чувствительность к ним), аутовакцины; проводят мероприятия, стимулирующие иммунитет (аутогемотерапия , пирогенотерапия и т. д.).

КЛЕБСИЕЛЛЫ (КАПСУЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ)
Среди патогенных микроорганизмов встречается группа бактерий, для которой характерно образование капсулы не только в организме больного человека, но и на искусственных питательных средах. Поэтому эти бактерии получили название капсульных. К ним относится возбудитель воспаления легких - диплобактерии Фридлендера (Klebsiella pneumoniae), палочка риносклеромы (Klebsiella rhinoscleromatis) и палочка озены (Klebsiella ozaenae).
Морфология и тинкториальные свойства. Все микробы этой группы представляют собой небольшие палочки с закругленными концами от 1 до 3 мк в длину и от 0,5 до 0,8 мк в толщину. Часто располагаются парами. Спор не образуют, жгутиков не имеют. Снабжены слизистой капсулой (см. рис. 19 на вклейке). Легко воспринимают анилиновые краски, грамотрицательны.
Культуральные и биохимические свойства. На обычных питательных средах капсульные бактерии дают пышный рост. Оптимальная температура роста 37°. На агаровых пластинках образуются круглые слизистые серовато-белые колонии. По Эльберту, палочки озены в юной колонии (3-4 часового роста) располагаются концентрически, бактерии пневмонии петлеобразно. На скошенном агаре образуют серовато-белый налет слизистого характера. В бульоне вызывают диффузный рост с образованием «а дне тягучего слизистого осадка, а на поверхности - слизистой пленки. Желатину не разжижают. Сбраживают углеводы непостоянно с образованием кислоты, а иногда и газа. Палочка риносклеромы не ферментирует лактозу (Эльберт).
Патогенность для животных и человека. К капсульным бактериям чувствительны белые мыши, которые погибают спустя 24-48 часов после парентерального введения им культуры.
Клебсиеллы пневмонии вызывают у человека воспаление легких, гнойные и фибринозные плевриты, перикардит, менингит, гайморит и пр. Палочка риносклеромы поражает верхние дыхательные пути. Болезнь выражается в образовании хронических инфильтратов хрящевой консистенции в коже и слизистой носа, на слизистых оболочках глотки и гортани. Для пораженной ткани при риносклероме характерно наличие крупных клеток Микулича с заключенными в них возбудителями.
Палочка озены вызывает воспаление слизистой оболочки носа с выделением вязкого слизисто-гнойного секрета, который быстро засыхает с образованием корочек.
Микробиологическая диагностика. Лабораторная диагностика заболеваний, вызванных капсульными бактериями, основывается на бактериоскопическом, бактериологическом и экспериментальном исследовании патологического материала (мокрота при пневмонии, слизь из носа при озене, кусочки тканей при риносклероме). Для диагностики риносклеромы используют реакцию связывания комплемента.
Эпидемиология капсульных инфекций изучена мало. Специфической профилактики не существует. Лечение осуществляется применением стрептомицина, тетрациклина, неомицина и препаратов сурьмы.


Внимание, только СЕГОДНЯ!

Клебсиелла

Описание

Клебсиелла (лат. Klebsiella) – это палочковидный микроорганизм семейства энтеробактерий. Клебсиелы названы в честь немецкого бактериолога Э. Клебса, обнаружившего клебсиелы в тканях больных, погибших от пневмонии (1875). Чистую культуру клебсиел впервые выделил немецкий патолог К. Фридлендер (1882).

Классификация клебсиеллы

В роде клебсиелл выделяют четыре вида.:

K.pneumoniae (или палочка Френлендера, который в 1882 году выделил бактерию, имевшую ярко выраженную капсулу, возбудитель пневмонии);

K. rhinoscleromatis (палочка Волковича-Фриша, возбудитель риносклеромы);

K. ozaenae (палочка Абеля, возбудитель зловонного насморка);

Дополнительные виды: K. aerogenes, K. edwardsii var. edwardsii и var, K. oxytoca.

Чаще всего встречается так называемая палочка Фридлендера (в большинстве случаев, вызывающая воспаление легких – пневмонию) и Klebsiella oxytoca, которая вызывает поражение толстой кишки.

Если организм человека по тем или иным причинам ослаблен, клебсиелла начинает активно размножаться, вызывая воспалительные процессы в разных органах.

В организме клебсиелла имеет палочкообразную форму, но, попадая в окружающую среду, она несколько округляется и покрывается специальной оболочкой – капсулой. Благодаря этому приспособлению, бактерии рода klebsiella весьма устойчивы к действию факторов окружающей среды.

В ряде случаев причиной развития инфекционного процесса является ослабление собственных факторов защиты организма и активизация клебсиелл, уже живущих в собственных тканях человека. Особенно часто встречаются заболевания, вызванные клебсиеллой, у грудничков. Это связано с особенностью иммунитета малышей и недостаточностью нормальных микроорганизмов в кишечнике, дыхательных путях, на коже.

Помимо этого механизма, клебсиелла может попадать в организм вместе с плохо вымытыми овощами и фруктами, водой. Вместе с почвой, этот микроорганизм может проникать через желудочно-кишечный тракт или плохо вымытые руки.

Морфология клебсиел. Культуральные свойства клебсиел. Антигены клебсиел. Антигенная структура клебсиел.

Клебсиеллы - толстые короткие палочки размером 2-5*0,3-1,25 мкм, с закругленными концами, неподвижные. Спор не образуют. В мазках располагаются попарно или одиночно, обычно окружены капсулой, грам-отрицательны. Хорошо растут на простых питательных средах при температуре 35-37°С. На мясо-пептонном агаре образуют мутные слизистые колонии, в бульоне - интенсивное помутнение. Характер роста на агаре и ферментативные свойства приведены в табл. 6. Клебсиеллы не образуют экзотоксинов, содержат эндотоксины. Капсульные бактерии включают три антигена: капсульный (К-антиген), соматический гладкий (О-антиген), соматический шероховатый (R-антиген); К- и О-антигены являются углеводами, R-антиген - протеином.

Резистентность клебсиелл достаточно высокая: при комнатной температуре они сохраняются месяцами, при нагревании до 65°С погибают в течение часа. Чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ: раствора хлорамина, фенола и др.

Вирулентность клебсиелл связана с наличием у них капсул. Бактерии, утратившие капсулу, становятся невирулентными и при введении в организм животного быстро фагоцитируются. Капсульные варианты вызывают гибель мышей через 24-48 ч после заражения с обсеменением всех органов.

Клетки клебсиелл имеют форму неправильного овала. Капсула клебсиел обычно присутствует у штаммов, непосредственно выделенных от человека и животных. После пересевов на питательные

среды, под действием низкой температуры, иммунной сыворотки и /или антибиотиков клебсиелы могут терять способность к капсулообразованию.

Под действием антибиотиков клебсиелы способны в отдельных случаях образовывать L-формы.

Патогенез заболеваний человека.

Клебсиеллы пневмонии (палочка Фридлендера) вначале считали возбудителями заболеваний дыхательных путей (риносклерома, озена, пневмония). Затем было установлено, что они могут быть причиной поражения слизистых оболочек век, мочеполовых органов, а также мозговой оболочки, суставов, способны вызывать сепсис, острые кишечные инфекции у взрослых и детей, гнойные послеродовые осложнения. Инфицирование новорожденных может привести к развитию тяжелых пневмоний, кишечных инфекций, токсико-септических состояниях с летальным исходом. Клебсиеллы считают возбудителями внутрибольничных инфекций. Они часто встречаются при смешанных инфекциях. Однако пневмонии составляют незначительную часть клебсиеллезов и обычно развиваются у лиц с поражениями дыхательных путей либо на фоне общего ослабления организма. Пневмонии сопровождает активная деструкция лёгочной паренхимы с формированием абсцессов, эмпием и плевральных спаек. Несколько чаще возбудитель вызывает госпитальные поражения дыхательных путей (бронхиты и бронхопневмонии)

Клебсиеллы озены (палочка Абеля) являются этиологическим фактором хронических заболеваний дыхательной системы. Воспалительный процесс сопровождается выделением вязкого секрета, издающего зловонный запах. Течение заболевание хроническое; инкубационный период не установлен. Наиболее часто озена начинается в 8~16лет, а клинические проявления достигают максимума к 35-40 годам. Для клинической картины озе-ны характерна триада признаков, атрофия слизистой оболочки носа и подлежащего костного скелета, образование плотных корок и неприятный запах из носа. Процесс может распространяться на глотку, гортань и трахею и приводить к потере обоняния.

Клебсиеллы риносклеромы (палочка Фриша-Волковича) вызывают хронические воспалительные процессы слизистых оболочек верхних дыхательных путей, бронхов с образованием инфильтратов, которые затем рубцуются. Возбудители могут быть обнаружены в гранулемах, где они локализуются внутри и вне клеток. На слизистой оболочке носа, гортани и трахеи обнаруживают плотные беловатые узелки, покрытые вязкой мокротой, содержащей возбудитель. Постепенно развивается нарушение дыхания; в верхних дыхательных путях появляются множественные инфильтраты, покрытые корками. Гистологическое исследование инфильтратов позволяет выявить типичную склеромную ткань. При отсутствии лечения происходит резкое истощение больных вследствие кислородного голодания и нарушения обменных процессов.

Диагностика клебсиел. Микробиологическая диагностика клебсиелл. Выявление клебсиел. Лечение клебсиеллезов. Профилактика клебсиеллезов .

Принципы микробиологической диагностики клебсиелл основаны на выделении и идентификации возбудителя.

Осуществляется с помощью микробиологического и серологического методов. Исследуемый материал: мокрота (при пневмонии), слизь из зева, носа, трахеи (при озене), кусочки ткани из гранулем (при риносклероме).

Посевы производят на мясо-пептонный или глицериновый агар, а также на дифференциальные среды-бромтимоловый или бромкрезоловый агар. Инкубируют при 37°С. Через 24 ч из выросших слизистых колоний делают пересев на скошенный агар. Изучают ферментативные свойства полученной чистой культуры.

Для дифференциации капсульных бактерий рекомендуется также изучение строения молодых л колоний на чашке с мясо-пептонным агаром. Палочки пневмонии расположены в молодых колониях петлеобразно, палочки риносклеромы - концентрически, палочки озены - концентрически и рассеянно.

Серологическая диагностика осуществляется путем постановки реакции связывания комплемента и реакции агглютинации. Антигенную структуру клебсиелл исследуют в РА живой культуры диагностическими К-антисыворотками. Для выявления AT применяют РСК {в качестве Аг используют суточную культуру) или реакцию О-агглютинации (Аг служит суточная бескапсульнан культура). Как вспомогательный метод используют кожную аллергическую пробу, но она менее специфична, чем серологические реакции.

Колонии клебсиелл сочные и блестящие, имеют цвет от жёлтозеленого до голубого. Культуральные и биохимические особенности клебсиелл определяют на минимальном дифференцировочном ряду.

Лечение клебсиеллезов. Профилактика клебсиеллезов.

Учитывая множественную устойчивость клебсиелл, антимикробную терапию следует начинать после установления чувствительности к препаратам. Вакцинопрофилактика клебсиеллезов не разработана. Для лечения применяют антибиотики ампициллин, аминогликозиды, тетрациклины, левомицетин (антибиотики широкого спектра действия). За последние годы отмечается широкое распространение антибиотикорезистентных штаммов клебсиелл.

Комплексное лечение заболеваний, вызванных клебсиеллой, зависит от выраженности и локализации патологического процесса. Например, кишечные заболевания могут быть вызваны смешанной флорой, в которой присутствует клебсиелла. Для их лечения вместе с бактериофагами необходимо использовать препараты, восстанавливающие кишечную микрофлору.

Иммунитет. После перенесенного заболевания нестойкий.

Средства специфической иммунопрофилактики клебсиеллезов не разработаны. Для предупреждения клебсиеллезов следует строго соблюдать правила хранения пищевых продуктов, правила асептики и антисептики в лечебных учреждениях и правила личной гигиены.

Содержание статьи

Клебсиеллы

Название дано в честь Э. Клебса. К роду Klebsiella относятся два вида: Klebsiella pneumoniae и Enterobacter. Первый вид подразделен на два подвида: К. ozenae, К. rinoscleromatis.

Морфология и физиология

Представители вида Klebsiella pneumoniae - короткие, толстые, неподвижные грамотрицательные палочки, образующие в отличие от других энтеробактерий выраженные полисахаридные капсулы. Клебсиеллы, так же как другие энтеробактерий, нетребовательны к питательным средам. Они ферментируют глюкозу с кислотой и газом и используют ее и цитрат в качестве единственного источника углерода, а аммиак - источника азота. Подвиды клебсиелл различают по биохимическим признакам. В отличие от вида Enterobacter, К. pneumoniae лишены жгутиков, не синтезируют орнитиндекарбоксилазу, ферментируют сорбит. Дифференциация разных видов клебсиелл проводится на основании их неодинаковой способности ферментировать углеводы, образовывать уреазу и лизиндекарбоксилазу, утилизировать цитрат и других признаков. Клебсиеллы образуют слизистые колонии.

Антигены

Клебсиеллы содержат О- и К-антигены. Всего известно около 11 О-антигенов и 70 К-антигенов. Последние представлены капсульными полисахаридами. Серологическая идентификация клебсиелл основана на их антигенных различиях. Наибольшее число О- и К-антигенов содержат К. pneumoniae. Некоторые О- и К-антигены клебсиелл родственны О-антигенам эшерихий и сальмонелл.

Патогенность и патогенез

Вирулентность клебсиелл пневмонии обусловлена их адгезией, связанной с капсульным полисахаридом, пилями и белком наружной мембраны, последующим размножением и колонизацией энтероцитов. Капсула также защищает бактерии от действия фагоцитирующих клеток. При разрушении бактериальных клеток освобождается эндотоксин (ЛПС). Кроме того, клебсиеллы пневмонии секретируют термостабильный энтеротоксин, усиливающий выпот жидкости в просвет тонкой кишки, что играет существенную роль в патогенезе ОКЗ, и мембранотоксин с гемолитической активностью. Клебсиеллы являются возбудителями пневмонии, ОКЗ, риносклеромы, озены. Они также могут вызывать поражения мочеполовых органов, мозговых оболочек взрослых и детей, токсико-сеп-тические состояния и ОКЗ у новорожденных. Клебсиеллы могут вызывать внутрибольничные инфекции. Для пневмонии, вызванной К. pneumoniae, характерны образование множественных очагов в дольках легкого с последующим их слиянием и ослизнением пораженной ткани, содержащей большое количество клебсиелл. Возможно образование гнойных очагов в других органах и развитие сепсиса. При склероме, вызванной К. rhinoscleromatis, поражается слизистая оболочка носа (риносклерома), носоглотки, трахеи, бронхов. В тканях образуются гранулемы с последующими склеротическими изменениями. При озене, вызванной К. ozenae, поражается слизистая оболочка носа и придаточных полостей с последующей атрофией носовых раковин и выделением зловонного секрета.

Иммунитет

Клебсиеллы вызывают гуморальный и клеточный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают про-тектиными свойствами. Развитие ГЗТ связано с внутриклеточной локализацией клебсиелл.

Экология и эпидемиология

Клебсиеллез является антропонозной инфекцией. Источник инфекции - больные и носители. Заражение происходит через респираторные пути. Клебсиеллы входят в состав кишечного биоценоза, обнаруживаются на коже и слизистых оболочках. Они устойчивы к факторам окружающей среды и сравнительно долго сохраняются в почве, воде, в помещениях. В молочных продуктах выживают и размножаются при хранении их в холодильниках. При нагревании погибают уже при температуре 65°С, чувствительны к растворам обычных дезинфектантов.

Клебсиелезы

Клебсиельозы - заболевания, которые вызывают бактерии рода Klebsiella. Они могут быть острыми и хроническими, острые вызывают Klebsiella pneumoniae, Koxytoca, Kplanticola, Kterrigena, хронические - Kozaenae и Krhinoscleromatis. Чаще всего воспалительные и септические процессы вызывает Крпеитопиае - пневмонии, бронхиты, септицемии, отиты, перитониты, желчных и мочевыводящих путей, пищевые токсикоинфекции, госпитальные раневые и ожоговые инфекции подобное. Значительно реже встречаются такие хронические болезни, как зловонный насморк (озена) и риносклерома. В последнее время резистентные к антибиотикам штаммы клебсиелл могут стать возбудителями внутрибольничных инфекций.Основным методом лабораторной диагностики клебсиельозив является бактериологическое исследование. Серологический метод применяют редко. Проводят также микроскопию мазков.Материалом для микробиологического анализа может быть мокроты, слизи из рото-и носоглотки, промывные воды и рвотные массы, гной, кровь, ликвор, моча, желчь, стул, секционный материал, инфильтраты слизистой при риносклероме, корочки при озене, смывы с предметов и т.п..

Бактериоскопия

В мазках, окрашенных по Граму, капсульные формы клебсиелл имеют вид грамотрицательных, эллипсовидные, толстых палочек длиной 5-8 мкм и шириной 3-5 мкм. Безкапсульни формы имеют меньшие размеры (0,3-0,6 х 1-3 мкм), одиночное, парное или цепную расположения. В гистологических срезах с склеромних гранулем видно много гигантских клеток Микулича, наполненных желатиноподибною массой, в которой находятся клебсиеллы, окруженные капсулой.

Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование проводят по такой же схеме, что и при подобных заболеваниях, вызванных другими видами энтеробактерий. Посев материала производят на селективное среду К-2 (МПА с мочевиной, рафиноза, бромтимоловый синим). Через сутки на нем вырастают крупные, выпуклые, блестящие, слизистые колонии желтого, зеленовато-желтого или голубого цвета. На средах Эндо и Плоскирева большинство клебсиелл образуют колонии с металлическим блеском, характерные для лактозоположительных бактерий.На простом или глицериновом агаре через 2-4 ч выращивания основные виды клебсиелл образуют характерные колонии с различной внутренней структурой, выявляемые при агар-микроскопии таких молодых колоний. В К pneumoniae они петлеобразную устройство, у К. rhinoskleromatis - концентрическую, а в К ozenae - рассеянно концентрическую. Это позволяет дифференцировать названные виды клебсиелл между собой.Пожилые колонии микроскопируют и отсеивают на косой агар для выделения чистых культур. Идентификацию последних проводят посевом в среды пестрого ряда Гисса, желчный бульон, определяют подвижность, наличие уреазы. Клебсиеллы неподвижные, большинство штаммов разлагают глюкозу, лактозу, сахарозу, мочевину, дают положительную реакцию Фогес - Проскауэра, не выделяют сероводород.И все же основной и надежной является серологическая идентификация клебсиелл. Для ее проведения используют две реакции: капсульную агглютинацию на стекле с живой культурой и О-агглютинацию. При постановке первой из них на предметное стекло наносят диагностические протиклебсиельозни капсульныесыворотки, а также каплю 0,9% раствора хлорида натрия (контроль). У капель сывороток и изотонического раствора растирают полную петлю исследуемой культуры, смешивают их, добиваясь тщательной гомогенизации. При положительном результате образуется аглютинат в виде грубых нитей или тяжей. В контрольной капли агглютинации не должно быть.Для О-аилютинации выделены культуры стерилизуют в автоклаве в течение 150 мин при 2-х атм. При этом разрушается капсула, культура не взаимодействует с К-сыворотками и аглютинуеться О-сыворотками. Простерилизованную культуру нужно дважды отмыть в физиологическом растворе путем центрифугирования и с осадком поставить реакцию агглютинации на стекле.Из дополнительных методов идентификации клебсиелл используют фаготипирования. Фаги капсульных бактерий имеют четкую видовую специфичность. Техника проведения реакции агглютинации и фаготипирования подробно изложена в инструкции к соответствующим препаратам.Определяют также чувствительность выделенных культур к антибиотикам с помощью дискодифузийного метода.

Серологические исследования

Серологические исследования проводят путем постановки развернутой реакции агглютинации с сывороткой крови больных и капсульный и безкапсульним антигенами, а также связывания комплемента (титр 1:40 и выше) и более чувствительной и специфической реакции непрямой гемагглютинации с эритроцитарным клебсиельозним диагностикумом. Для постановки последней сыворотку больных разводят в лунках полистироловых планшет от 1:20 до 1:320 в объеме 0,25 мл и добавляют такой же объем 1% взвеси сенсибилизированных эритроцитов. Учет результатов проводят через 2 ч экспозиции планшет при 37 ° С. Диагностический титр 1:160 и выше. Надежнее результаты получают при постановке реакции в динамике, когда обнаруживают 4-кратное нарастание титра антител.

Профилактика и лечение

Специфическая вакцинопрофилактика клебсиеллезов не разработана. Для лечения применяют антибиотики, из которых цефалоспорины третьего поколения являются наиболее эффективными.

Капсульные бактерии — клебсиеллы — обнаруживаются в слизи зева и носа, выделениях из дыхательных путей и легких, на объектах внешней среды. Они относятся к семейству Enterobacteriaceae, роду Klebsiella. Клебсиеллы обладают способностью образовывать капсулы как в организме, так и на питательных средах.

Клебсиеллы — толстые короткие палочки размером 2—5*0,3—1,25 мкм, с закругленными концами, неподвижные. Спор не образуют. В мазках располагаются попарно или одиночно, обычно окружены капсулой, грам-отрицательны. Хорошо растут на простых питательных средах при температуре 35—37°С. На мясо-пептонном агаре образуют мутные слизистые колонии, в бульоне — интенсивное помутнение. Характер роста на агаре и ферментативные свойства приведены в табл. 6. Клебсиеллы не образуют экзотоксинов, содержат эндотоксины. Капсульные бактерии включают три антигена: капсульный (К-антиген), соматический гладкий (О-антиген), соматический шероховатый (R-антиген); К- и О-антигены являются углеводами, R-антиген — протеином.

Резистентность клебсиелл достаточно высокая: при комнатной температуре они сохраняются месяцами, при нагревании до 65°С погибают в течение часа. Чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ: раствора хлорамина, фенола и др.

Вирулентность клебсиелл связана с наличием у них капсул. Бактерии, утратившие капсулу, становятся невирулентными и при введении в организм животного быстро фагоцитируются. Капсульные варианты вызывают гибель мышей через 24—48 ч после заражения с обсеменением всех органов.

У человека клебсиеллы приводят к заболеванию пневмонией, озеной и риносклеромой. Klebsiella pneumoniae (палочка Фридлендера) вызывает у человека бронхопневмонию, которая протекает с поражением одной или нескольких долей легкого.

Возможны сливные очаги и абсцессы в легком. Летальность высокая. Иногда клебсиеллы пневмонии могут вызвать пиемию, менингит, аппендицит, цистит и смешанные инфекции. Klebsiella ozaeпае является возбудителем зловонного насморка, который встречается в Испании, Индии, Китае, Японии. Случаи озены известны и в СССР. При заболевании поражаются слизистая оболочка носа, глотки, трахеи, гортани, а также придаточные полости носа и носовые раковины. Для озены характерно выделение вязкого секрета, подсыхающего с образованием плотных корочек, затрудняющих дыхание и издающих зловонный запах. Заболевание передается воздушно-капельным путем. Klebsiella rhinoscleromatis (палочка Волковича — Фриша) вызывает хронический гранулематозный процесс на коже, слизистой оболочке носа, трахеи, гортани, бронхов. Риносклерома — малозаразная хроническая болезнь, которая встречается в Австрии, Польше, а также в СССР. Клебсиеллы риносклеромы обнаруживаются внутриклеточно и внеклеточно в соскобах из узелков (гранулем) тканей в виде коротких палочек, окруженных капсулой.

Иммунитет. После перенесенного заболевания нестойкий.

Микробиологическая диагностика . Осуществляется с помощью микробиологического и серологического методов. Исследуемый материал: мокрота (при пневмонии), слизь из зева, носа, трахеи (при озене), кусочки ткани из гранулем (при риносклероме).

Посевы производят на мясо-пептонный или глицериновый агар, а также на дифференциальные среды—бромтимоловый или бромкрезоловый агар. Инкубируют при 37°С. Через 24 ч из выросших слизистых колоний делают пересев на скошенный агар. Изучают ферментативные свойства полученной чистой культуры.

Для дифференциации капсульных бактерий рекомендуется также изучение строения молодых л колоний на чашке с мясо-пептонным агаром. Палочки пневмонии расположены в молодых колониях петлеобразно, палочки риносклеромы — концентрически, палочки озены — концентрически и рассеянно (см. табл. 6).

Серологическая диагностика осуществляется путем постановки реакции связывания комплемента и реакции агглютинации. Как вспомогательный метод используют кожную аллергическую пробу, но она менее специфична, чем серологические реакции.

Профилактика и лечение . Своевременное выявление больных и их госпитализация.

Для лечения назначают антибиотики (стрептомицин, левомицетин, неомицин, тетрациклин), препараты сурьмы (солюсурьмин), вакцинотерапию. Вакцину готовят из капсульных штаммов путем нагревания.