إذا كانت عينة مباشرة من كومبس مشكوك فيها ماذا تفعل. اختبار مضاد الجلوبيولين. تفاعل كومبس المباشر وغير المباشر. الكشف عن الأجسام المضادة IgG في اختبار كومبس

تم اقتراح اختبار مضاد الجلوبيولين المصمم للكشف عن الأجسام المضادة غير المكتملة لمضادات كرات الدم الحمراء من قبل كومبس ، مورانت ، ريس في عام 1945 وتم تسميته لاحقًا باختبار كومبس. يكمن جوهر هذه الطريقة في حقيقة أن مصل مضاد الغلوبولين الذي يحتوي على أجسام مضادة للجلوبيولين المناعي البشري ، عند التفاعل مع كريات الدم الحمراء المحسوسة بأجسام مضادة غير كاملة ، يؤدي إلى تراصها.

اعتمادًا على ما إذا كانت الأجسام المضادة مثبتة على سطح خلايا الدم الحمراء أو خالية في بلازما الدم ، يتم استخدام اختبار كومبس المباشر أو غير المباشر.

يتم إجراء اختبار كومبس المباشر في الحالات التي يوجد فيها سبب للاعتقاد بأن خلايا الدم الحمراء قيد الدراسة موجودة بالفعل في الجسم الحيتم تحسسهم بالأجسام المضادة المناسبة ، أي المرحلة الأولى من التفاعل - تثبيت الأجسام المضادة على سطح كريات الدم الحمراء - حدثت في الجسم وتسبب الإضافة اللاحقة لمصل مضاد الجلوبيولين في تراص الخلايا الحساسة.

باستخدام اختبار كومبس غير المباشر ، يتم الكشف عن الأجسام المضادة غير الكاملة الموجودة في مصل الاختبار. في هذه الحالة ، يستمر التفاعل على مرحلتين. المرحلة الأولى هي حضانة كريات الدم الحمراء مع مصل الاختبار ، حيث يتم تثبيت الأجسام المضادة الموجودة في عينة مصل الاختبار على سطح كريات الدم الحمراء. المرحلة الثانية هي إضافة مصل مضاد الجلوبيولين.

حتى الآن ، تم استخدام اختبار كومبس على نطاق واسع في الممارسة المختبرية لتشخيص الحالات المرضية المناعية ، على وجه الخصوص ، في فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي ، الذي يتميز بتدمير كريات الدم الحمراء بسبب ارتباط غشاء الخلية بالأجسام المضادة و (أو) مكونات نظام كامل. بمساعدتها ، يتم الكشف عن وجود Ig G (عادة Ig G1 و Ig G3) على غشاء كرات الدم الحمراء ، والذي يمكن أن ينشط المكمل ، وأحيانًا يكمل (C3d). ومع ذلك ، في الفترة الحادة من المرض ، بسبب تدمير كريات الدم الحمراء ، حيث تم تثبيت عدد كبير من الأجسام المضادة ، أثناء أزمة انحلال الدم ، وكذلك مع وجود كمية غير كافية من الأجسام المضادة في المسار المزمن للمرض ، يمكن ملاحظة اختبار كومبس السلبي المباشر.

يجب التأكيد على أن اختبار كومبس غير المباشر يظل أفضل طريقة للاختيار الفردي لوسائط نقل الدم ، لأنه يتيح التحديد الأكثر دقة للتوافق الفردي بين المتبرع والمتلقي لمستضدات كرات الدم الحمراء.

يوصى بإجراء اختبار إضافي مباشر لمضادات الغلوبولين لوجود الأجسام المضادة الذاتية في فحص جميع متلقي الأعضاء والأنسجة في فترة ما قبل الزرع ومتلقي الخلايا الجذعية المكونة للدم أيضًا بعد الزرع.

بالإضافة إلى علم الدم المناعي ونقل الدم ، تُستخدم اختبارات مضادات الغلوبولين على نطاق واسع في تشخيص عدد من الحالات المرضية: في أمراض الدم ، بما في ذلك أمراض التكاثر اللمفاوي ، وأمراض النسيج الضام الجهازية ، ومرض سجوجرن ، والتهاب الكبد المزمن النشط ، إلخ.

تُستخدم اختبارات كومبس بنشاط في علم الوراثة الطبية والطب الشرعي لتحديد مستضدات كريات الدم الحمراء السطحية.

يعد اختبار كومبس طريقة بحث تستغرق وقتًا طويلاً وتتطلب عناية خاصة في تنفيذها. عند استخدامه ، هناك بعض الصعوبات المرتبطة ، على وجه الخصوص ، بتفسير ردود الفعل الإيجابية الضعيفة. من المعروف أن التفاعلات الإيجابية أو السلبية الخاطئة الخاطئة عند إجراء اختبارات كومبس يمكن أن تكون نتيجة لغسل كريات الدم الحمراء بشكل غير كافٍ ، وتحييد كاشف مضاد الغلوبولين بآثار مصل الدم ، والتلامس مع سطح غير منزوع الدهن يمكن تثبيت مضاد الجلوبيولين عليه ، تفقد نشاطها. عيب آخر في اختبار كومبس هو عدم استقرار كاشف مضاد الجلوبيولين ، حيث يتميز تحضيره وتخزينه بسمات معينة ، مما يجعل من الصعب أيضًا تحديد تفاعل التراص الدموي مع مصل مضاد الجلوبيولين.

بالإضافة إلى ذلك ، الدراسات التي أجراها أ. هولبورن ، د. فواك وآخرون. ، أظهر أن الاهتزاز المفرط أثناء إعادة تعليق تعليق الخلايا الحمراء قد يكون سببًا لنتائج سلبية خاطئة. يمكن أن تكون النتائج الخاطئة عند إجراء اختبارات مضادات الغلوبولين أيضًا ناتجة عن وجود خليط من الأجسام المضادة التكميلية في كاشف مضاد الجلوبيولين ، ولا سيما المكونات التكميلية C3d و C3c و C4c و C4d ، والتي يتم امتصاصها على سطح خلايا الدم الحمراء المختبرة أثناء الحضانة وتكوينها. ظهور نتيجة إيجابية.

يمكن التخلص من هذه العيوب بسهولة عن طريق غسل عينات الاختبار تمامًا والتحكم في ظروف التفاعل.

في العقد الماضي ، تم استخدام محلول ملحي متساوي التوتر منخفض القوة الأيونية (LISS) لتقليل وقت وحساسية اختبار كومبس غير المباشر.

الميزة التي لا جدال فيها لاختبارات مضادات الغلوبولين ، وفقًا لعدد من المؤلفين ، هي حساسيتها العالية ، والتي تتجاوز بشكل كبير دقة طرق البحث البديلة المستخدمة للكشف عن الأجسام المضادة غير التراصية.

قمنا بمقارنة دقة طرق دراسة مصل الدم لوجود أجسام مضادة غير مكتملة باستخدام مصل بولي جلوسين ، جيلاتين ومضاد الغلوبولين. في سياق الدراسة ، تمت مراقبة عيارات الأجسام المضادة لمضاد D غير المكتملة في 140 عينة من مصل الدم لمتبرعين متساويين باستخدام اختبارات الجيلاتين والبولي غلوسين ومضادات الغلوبولين غير المباشرة. تم تنفيذ بيان هذه الأساليب وفقًا للطرق المقبولة عمومًا.

وجد أنه من حيث الدقة ، يتم ترتيب طرق الكشف عن حساسية كرات الدم الحمراء بواسطة الأجسام المضادة لـ D على النحو التالي: الأكثر حساسية هو اختبار كومبس غير المباشر ، ثم اختبار الجيلاتين ، والأقل إفادة هو اختبار البولي جلوسين. تتوافق النتائج التي تم الحصول عليها في هذه السلسلة من التجارب تمامًا مع بيانات الأدبيات ، مما يسمح لنا باستنتاج أن حساسية اختبارات كومبس عالية بما فيه الكفاية ، مما يجعل من الممكن التعرف بدرجة عالية من اليقين على وجود الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في الجسم لا يسبب تراص خلايا الدم الحمراء.

ومع ذلك ، في ممارسة اختبارات كومبس ، هناك حالات لا يتم فيها اكتشاف الأجسام المضادة غير المكتملة ، على الرغم من أن الصورة السريرية للمرض أو التحصين السابق تشير إلى احتمال وجودها. في مثل هذه الحالات ، يمكن الافتراض أن كمية الأجسام المضادة لا تكفي لترسيبها بواسطة الأجسام المضادة في الدم المضادة للجلوبيولين.

تم تأكيد هذا الاستنتاج من خلال تجربتنا الخاصة ، والتي تم من خلالها ، باستخدام طريقة التحليل الكهربائي الدقيق للخلايا ، وجود أجسام مضادة لـ D على كريات الدم الحمراء للاختبار ، والتي لم يتم اكتشافها في اختبار كومبس غير المباشر. في هذه السلسلة من التجارب ، تمت إضافة مصل مضاد الجلوبيولين إلى كريات الدم الحمراء ، المحتضنة مسبقًا بالمصل المأخوذ من دم المتبرعين المحصنين ، خلال فترة تكوين الجسم المضاد أثناء التنقل ، أي خلال الفترة التي لم تكتشف فيها الطرق المعروفة ، بما في ذلك اختبار كومبس ، الأجسام المضادة فيها.

في الدراسات التي أجريت ، كان إثبات وجود أجسام مضادة غير مكتملة على سطح كريات الدم الحمراء تغييرًا مهمًا إحصائيًا في التنقل الكهربائي لخلايا الدم الحمراء المحسّسة بعد إضافة مصل مضاد الجلوبيولين. وتجدر الإشارة إلى أنه بعد ذلك ، تم اكتشاف الأجسام المضادة لـ D في مصل الدم لجميع المتبرعين المحصنين في اختبار كومبس غير المباشر.

جيليراند وآخرون. أظهر أيضًا أن اختبارات مضادات الغلوبولين تتميز بعتبة معينة من الحساسية: يتم ملاحظة نتيجة إيجابية فقط عندما يتم تثبيت 500 Ig G على الأقل على سطح خلية حمراء واحدة.

بالإضافة إلى ذلك ، هناك دليل في الأدبيات على أن نتيجة كومبس السلبية المحتملة قد تكون بسبب التقارب المنخفض للأجسام المضادة التي تحسس خلايا الدم الحمراء ، ونتيجة لذلك يتم التخلص منها بسهولة من سطح خلايا الدم الحمراء أثناء الغسيل.

في ضوء ما سبق ، يمكن أن نستنتج أنه في بعض الحالات لا تكون النتيجة السلبية لاختبار كومبس دليلًا على عدم وجود أجسام مضادة مثبتة على سطح كريات الدم الحمراء.

من المعروف أن تفاعلات كومبس محددة للغاية وتسمح باكتشاف معظم أنواع الأجسام المضادة غير المكتملة. ومع ذلك ، كما تظهر بعض البيانات التجريبية ، يمكن أن تكون اختبارات مضادات الغلوبولين إيجابية أيضًا في الحالات غير المناعية. إي مويرهيد وآخرون. في اليوم الثاني بعد تناول فينيل هيدرازين ، لوحظ أن اختبار كومبس إيجابي للكلاب. يشهد مثل هذا الظهور السريع للتفاعل الإيجابي ضد طبيعته المناعية ، وبدلاً من ذلك ، يرتبط بامتصاص غير محدد للبروتين على سطح كريات الدم الحمراء.

وليامز وآخرون. وجد أن حمض clavulanic يمكن أن يسبب أيضًا تفاعلًا إيجابيًا ، والذي ، وفقًا للمؤلفين ، مرتبط بامتصاص غير محدد لبروتينات البلازما على سطح كرات الدم الحمراء. لوحظ تأثير مماثل في العلاج بالمضادات الحيوية من السيفالوسبورين.

يؤكد مؤلفو الدراسات المذكورة أعلاه على الطبيعة غير المناعية للنتائج الإيجابية التي تم الحصول عليها لاختبارات كومبس ويصرون على أن هذه المواد قادرة على إحداث تعديل في أغشية خلايا الدم الحمراء ، ونتيجة لذلك يمكن لخلايا الدم الحمراء أن تمتص البروتينات (على وجه الخصوص ، الزلال) ، والتي توجد عادة في بلازما الدم ولا تمتلك خصائص الأجسام المضادة. بالإضافة إلى ذلك ، من الممكن أن تكون الكائنات الحية الغريبة ، التي يتم امتصاصها على سطح الخلية ، بمثابة رابط بين غشاء الخلية وبروتينات البلازما.

من أجل التفسير الصحيح لنتائج إجراء اختبارات مضادات الغلوبولين ، يجب أيضًا مراعاة النسبة الكمية بين كريات الدم الحمراء الشابة والناضجة في الدم المحيطي. وجد أن الخلايا الشبكية المعزولة من الجسم خلال فترة تجديد الإريثرون المعزز يمكن أن تتراكم بواسطة مصل مضاد الجلوبيولين.

نتيجة اختبار مضادات الغلوبولين الإيجابية المباشرة كما أنه يستخدم في حالات مرضية مختلفة مصحوبة باضطرابات في الجهاز المناعي ، وعمليات التهابية تؤدي إلى امتزاز غير محدد للأجسام المضادة ذات النوعية المختلفة على أغشية كرات الدم الحمراء. يشير هذا إلى أن جزيئات Ig G لا تتفاعل مع مستضدات كرات الدم الحمراء المحددة ، ولكنها ثابتة فقط على سطح الخلايا قيد الدراسة.

يجب أن يؤخذ في الاعتبار أنه عند إجراء اختبار كومبس في حالات الأمراض التي تتميز بتطور خلل البروتين في الدم أو ظهور البروتينات ، فإن النتيجة الإيجابية ترجع إلى وجود كريات الدم الحمراء على سطح البروتينات التي ليس لها خصائص الأجسام المضادة ، والتي تشير أيضًا إلى خصوصية غير كافية لاختبارات مضادات الغلوبولين فيما يتعلق بطبيعة البروتين الذي تم اكتشافه بمساعدتها.

وهكذا ، كما هو موضح في العديد من الدراسات ، فإن النتائج الإيجابية لاختبارات مضادات الغلوبولين المباشرة وغير المباشرة ليست دليلًا مطلقًا على وجود الأجسام المضادة ، حيث يمكن أيضًا ملاحظة التفاعلات الإيجابية في حالات مرضية مختلفة لا ترتبط بالتحسس الذاتي أو التحسس الذاتي للجسم. لذلك ، فإن مقارنة نتائج العديد من طرق المناعة المناعية مع الصورة السريرية للمرض يسمح لنا بالحكم الكامل على العملية المرضية النامية.

عادةً ما يشير اختبار مضاد الغلوبولين الإيجابي غير المباشر مع اختبار مباشر سلبي إلى وجود أجسام مضادة حرة في مصل الاختبار ، مرتبطة بعمليات نقل الدم أو حالات الحمل السابقة.

غالبًا ما يكون اختبار كومبس إيجابيًا أثناء تفاقم بيلة الهيموغلوبينية الليلية الانتيابية ؛ يعد اختبار كومبس الإيجابي مع مضادات C3 ومضاد C3dg علامة على مرض الراصات الباردة.

في الحالات التي يوجد فيها خطر كبير للإصابة بمرض الانحلالي عند الوليد ، تكون نتائج اختبارات مضادات الغلوبولين المباشرة وغير المباشرة ذات أهمية كبيرة لإجراء التشخيص (غالبًا أثناء الحمل) ، وإذا لزم الأمر ، المراقبة الديناميكية للمظهر والتغيير في عيار الأجسام المضادة. في أغلب الأحيان ، يرتبط المرض الانحلالي لحديثي الولادة بعدم التوافق بين الأم والجنين لمولد الضد D ، وفي كثير من الأحيان أقل لمولدات المضادات في نظام AB0 ، وحتى أقل في كثير من الأحيان مع المستضدات الأخرى (C ، c ، K ، إلخ). الأجسام المضادة الناتجة la ، كقاعدة عامة ، يتم اكتشاف الأجسام المضادة غير المكتملة من فئة Ig G بوضوح في اختبار مضاد الغلوبولين غير المباشر. في هذا المرض ، يعتبر العيار المحدد بشكل صحيح وخصوصية الأجسام المضادة المكتشفة ذات أهمية كبيرة ، حيث يوجد ارتباط معين بين مستوى الأجسام المضادة للكريات الحمر في دم المرأة الحامل والتشخيص المحتمل لشدة المرض الانحلالي.

اختبار كومبس غير المباشر مطلوب أيضًا في الممارسة السريرية لضمان علاج نقل الدم الآمن. يعد تنفيذه مكونًا إلزاميًا للدراسات المناعية الدموية للمتبرعين وفئات مختلفة من المستفيدين ، بالإضافة إلى الفحوصات الروتينية لجميع مرضى المؤسسات الطبية الذين قد يحتاجون إلى نقل الدم ومكوناته.

يستخدم اختبار مضاد الغلوبولين غير المباشر في الحالات التالية:

لتحديد أكثر دقة للانتماء Rh (المستضد D) مع نتائج غامضة لتحديد عامل Rh بطرق أخرى (بولي جلوسين ، جيلاتين ، إلخ) ؛

للكشف عن مستضدات كرات الدم الحمراء الضعيفة (أنظمة Kell ، Duffy ، Kidd ، Lewis ، إلخ) والأجسام المضادة لهذه المستضدات ؛

لاكتشاف وتحديد الأجسام المضادة المناعية المضادة لخلايا الدم الحمراء ، بما في ذلك الأجسام المضادة التي تسبب تفاعلات انحلال الدم بعد نقل الدم ؛

لتحديد وجود الأجسام المضادة المناعية لنظام AB0 في مضاعفات الانحلالي عند نقل الدم ؛

كاختبار توافق للاختيار الفردي للدم المنقول ومكوناته.

وبالتالي ، فإن اختبار كومبس هو اختبار تشخيصي مهم يستخدم في مجالات الطب المختلفة (أمراض الدم ، والتوليد ، وأمراض الروماتيزم ، ونقل الدم ، والتشخيص السريري والمختبري ، وما إلى ذلك). ستساعد معرفة خصائص اختبار كومبس على زيادة موثوقية النتائج وستساهم في التفسير الصحيح للبيانات المختبرية.

المؤلفات

1. الأجسام المضادة. طرق / محرر. كاثي. - م: مير ، 1991.

2. Bayramalibeyli I.E. ، Rahimov A.A. ، Gadzhiev A.B.. // علاج فقر الدم بنقل الدم: كتاب مدرسي. دليل للأطباء. - م: براكت. الطب 2005. - S. 105-106.

3. فولكوفا أويا ، فريغاتوفا إل إم ، ليفتشينكو إل بي.// نقل الدم. - 2006. - رقم 2. - ص 39-62.

4. Donskov S.I.// مجموعات الدم في نظام الريسوس: النظرية والتطبيق. - م: VINITI RAN، 2005. - S. 180-186، 195.

5.المناعة (الوثائق المعيارية) / شركات. اي جي. باشلاي ، إس. دونسكوف. - م: VINITI RAN ، 1998.

6.بحث في نظام الدم في الممارسة السريرية / إد. جي. كوزينتسا ، ف. ماكاروف. - م: Triada-X ، 1997.

7. ليفين ف. إلى آلية تكوّن الكريات الحمر وتكوين الكريات الحمر في فترة فقر الدم الحاد التالي للنزف: دكتوراه. ديس. ... كان. عسل. علوم. - مينسك ، 1968.

8. Rahimov A.A.، Bairamalibeyli I.E.. // أساسيات التشخيص والوقاية والعلاج من فقر الدم. - م: GOU VUNMTs من وزارة الصحة في الاتحاد الروسي ، 2002. - S. 204-209.

9. تشوماكوفا إي.. // المشاكل الفعلية لأمراض الدم ونقل الدم: مواد المؤتمر السادس لأطباء الدم وأخصائيي نقل الدم لجمهورية بيلاروسيا ، مينسك ، 24-25 مايو ، 2007 / محرر. أ. Svirnovsky ، M.P. بوتابنيف. - مينسك: المركز العلمي والعملي الجمهوري لأمراض الدم ونقل الدم ، 2007. - ص 50.

10. كومبس آر ، مورانت أ ، رايس آر. // لانسيت. - 1945. - المجلد. 2. - ص 15.

11. فريدمان ج. // جى كلين. باتول. - 1979. - المجلد. 32. - ص 1014-1018.

12. هولبورن إيه إم. رقابة جودة. طرق في أمراض الدم / محرر.أولا كافيل. - إدنبرة: تشرشل ليفينجستون ، 1982. - المجلد. 4. - ص 34-50.

13. خان س.// CMAJ. - 2006. - المجلد. 175 ، رقم 8. - ص 919.

14. كوماتسو إف.// نيبون رينشو. - 2005. - المجلد. 63 (ملحق 7). - ص 719-721.

15. كوماتسو إف.// نيبون رينشو. - 2005. - المجلد. 63 (ملحق 7). - ص 716-718.

16. مولثان ل ، ريدنبرغ م ، إيمان م.// نيو إنجل. جيه ميد. - 1976. - المجلد. 277. - ص 123-125.

17. مويرهيد إي ، غروفزم ، براين س. // J. Lab. كلين. ميد. - 1954. - المجلد. 44. - ص 902-903.

18. روسي دبليو.// مستشفى. براك. - 1995. - N 105.

19. فواك د. ، داوني د. مورب.وآخرون. // Biotests Bull. - 1986. - المجلد. 1. - ص 41-52.

20. فواك د. ، هاي ت. ، داوني د.وآخرون. غسالات الخلايا لاختبارات مضادات الغلوبولين. اختبار النسخ المتماثل - طريقة جديدة توضح عدم كفاءة آلة واحدة مستخدمة على نطاق واسع - Sorvall CW1-AF2: تقرير إلى الفرع الفني لـ DHSS ، فبراير 1991.

21. ويليامز إم إي ، توماس دي ، هارمان سي بي. وآخرون. // عوامل مضادات الميكروبات والعلاج الكيميائي. -1985. - ص 125-127.

22. Zarandona JM، Yazer M.H. // CMAJ. - 2006. - المجلد. 174 ، رقم 3. - ص 305-307.

أخبار طبية. - 2008. - رقم 3. - ص 33-36.

انتباه! المقال موجه للأخصائيين الطبيين. إعادة طبع هذه المقالة أو أجزاء منها على الإنترنت بدون ارتباط تشعبي بالمصدر الأصلي يعتبر انتهاكًا لحقوق النشر.

من بين العديد من المستضدات الموجودة في الممارسة الطبية ، يتم إعطاء الأهمية الكبرى لثلاثة أنواع من الجيلاتينوجينات في الدم. واحد منهم هو النوع المسؤول عن مظهر عامل Rh: إذا كان موجودًا على غشاء كرات الدم الحمراء ، يتم تشخيص فصيلة الدم Rh + ، إذا كانت غائبة - Rh-. إذا دخلت كريات الدم الحمراء ذات العامل الريصي المترابط في تكوين الدم السلبي العامل الريصي ، فإن الجسم يطلق استجابة مناعية ويبدأ في إنتاج أجسام مضادة لهذا المستضد ، مما يسبب حالات مرضية.

المرجعي! عامل Rh هو نظام معقد متعدد المكونات يتكون من عدة عشرات من المستضدات. وأكثرها شيوعًا هي نوع D agglutinogens (85٪ من الحالات) ، بالإضافة إلى E و C.

يتم إجراء اختبار كومبس فقط في وجود مؤشرات مباشرة. قائمة عامة بأسباب وصف اختبار كومبس:

• التخطيط للحمل وإدارته (لدى الوالدين عامل ريسس مختلف) ؛
• التبرع والتحضير لنقل الدم (عدم تطابق الدم في Rh ليس أقل ضررًا من عدم التطابق في نظام AB0) ؛
• التدخل الجراحي المخطط (في حالة تجديد فقدان الدم بنقل الدم) ؛
• تشخيص أمراض الانحلالي.

تعتمد مؤشرات أكثر تحديدًا على نوع الدراسة التي يتم إجراؤها.

اختبار كومبس المباشر

يكتشف الاختبار المباشر وجود الأجسام المضادة على سطح خلايا الدم الحمراء. هذا ضروري لتشخيص الموجودة أمراض الانحلالي:

• المناعة الذاتية (يتم تدمير كريات الدم الحمراء والهيموجلوبين نتيجة لهجوم من الأجسام المضادة الخاصة بالجسم) ؛
• الدواء (تؤدي العملية المرضية إلى تناول بعض الأدوية مثل الكينيدين أو البروكيناميد) ؛
• بعد نقل الدم (مع عدم تطابق فصيلة الدم أثناء نقل الدم) ، وكذلك في شكل تضارب عامل ريسوسي أثناء الحمل (داء أرومات الكريات الحمر عند الأطفال حديثي الولادة).

المرجعي! فقر الدم الانحلالي هو مرض مرتبط بالتدمير المبكر لخلايا الدم الحمراء نتيجة لانحلال الدم ، مما يؤدي إلى عدم كفاية تشبع الأكسجين في الدم ونقص الأكسجة في الدماغ و / أو الأعضاء الداخلية.

لوحظ انحلال الدم لعناصر الدم في أمراض الأورام والمعدية والروماتيزم ، لذلك يمكن استخدام اختبار كومبس المباشر كوسيلة إضافية لتشخيص الحالة المرضية. في الوقت نفسه ، يجدر بنا أن نتذكر: القيمة السلبية للتحليل لا تستبعد إمكانية انحلال الدم ، ولكنها سبب لإجراء فحص إضافي.

اختبار كومبس غير المباشر

غالبًا ما يستخدم الاختبار غير المباشر لمنع المواقف المرضية.يساعد على اكتشاف الأجسام المضادة في بلازما الدم ، وهو أمر ضروري لتقييم توافق عمليات نقل الدم وتشخيص مخاطر تعارض عامل ريسوس أثناء الحمل.

أكثر من 80٪ من الناس لديهم عامل ريسس إيجابي (Rh +) ، على التوالي ، أقل بقليل من 20٪ لديهم عامل ريسس سلبي. إذا طور العامل الريسوسي الأم العامل الريصي ، يبدأ جسدها في إنتاج الأجسام المضادة التي تهاجم خلايا الدم الحمراء للجنين ، مما يتسبب في انحلال الدم.

مع الأخذ في الاعتبار حقيقة أن النسبة المئوية للزيجات "الريسوسية المختلفة" تصل إلى 12-15٪ ، يجب أن يكون خطر الإصابة بمرض الانحلالي عند الوليد مرتفعًا ، ولكن في الواقع ، فقط في حالة واحدة من بين 25 حالة من هذا القبيل لدى النساء ، فإن هذه الظاهرة لوحظ وجود حساسية (لـ 200 ولادة ناجحة ، مثال واحد على علم الأمراض الانحلالي). ويرجع ذلك جزئيًا إلى حقيقة أن الطفل الأول الذي يحمل العامل الريصي لا يسبب عادةً عدوانًا مفتوحًا على جسم الأم ؛ تحدث الغالبية العظمى من الحالات في الطفل الثاني واللاحق. ينطبق نفس المبدأ كما هو الحال مع التحسس التقليدي لمسببات حساسية معينة.

لا يوجد رد فعل يحدث عند أول اتصال. يتعرف الجسم فقط على مستضد جديد له ، وينتج أجسامًا مضادة من فئة IgM ، المسؤولة عن الاستجابة المناعية السريعة ، ولكنها نادرًا ما تخترق حاجز المشيمة في دم الطفل. تتجلى جميع التفاعلات المرضية عند "الاجتماع" المتكرر ، عندما يبدأ إنتاج أجسام مضادة من فئة IgG في الجسم ، تخترق بسهولة مجرى دم الجنين ، وتبدأ عملية انحلال الدم.

اختبار كومبس غير المباشر أثناء الحمليسمح لك باكتشاف وجود الأجسام المضادة في جسم الأم وفي الوقت المناسب لتحديد المرحلة الأولية من التحسس. تتطلب الإجابة الإيجابية التسجيل بدراسة شهرية لعيار الأجسام المضادة والاستشفاء الإلزامي قبل 3-4 أسابيع من الولادة.

المرجعي! لا يؤثر عدم توافق عامل ال Rh على حالة الأم بأي شكل من الأشكال ، فالمرض الانحلالي يتطور فقط عند الطفل. في الحالات الشديدة وفي حالة عدم الاستجابة في الوقت المناسب ، قد يموت الجنين في الرحم أو بعد الولادة مباشرة.

التحضير للإجراء وتنفيذه

يستخدم الدم الوريدي للتشخيص. لا يلزم إعداد خاص طويل الأمد لاختبار كومبس. حاول اتباع مجموعة قياسية من القواعد قبل سحب الدم من الوريد لتحليله:

• لمدة 3 أيام ، توقف عن تناول الكحول والأدوية (إن أمكن) ؛
• التخطيط للوجبة الأخيرة لمدة تزيد عن 8 ساعات قبل أخذ الدم للتحليل ؛
• الإقلاع عن التدخين والضغط الجسدي والعقلي والعاطفي في ساعة واحدة ؛
• قبل الإجراء ، اشرب كوبًا من الماء النظيف غير الغازي.

تعتمد طريقة البحث على تفاعل التراص الدموي.

عند إجراء اختبار مباشريتم تعريض عينة الدم لمصل مضاد للجلوبيولين مُعد مسبقًا بمؤشرات معروفة ، ويتم الاحتفاظ بالمزيج لبعض الوقت والتحقق من التراص ، والتي تتشكل عند وجود الأجسام المضادة في كريات الدم الحمراء. يتم تشخيص مستوى التراص باستخدام عيار التراص.

اختبار غير مباشركومبس لديها أسلوب مماثل ، ولكن تسلسل أكثر تعقيدا من الإجراءات. يتم إدخال كريات الدم الحمراء المستضدية (مع عامل Rh) في مصل الدم المنفصل ، وفقط بعد هذه التلاعب ، يضاف مصل مضاد الجلوبيولين لتشخيص التراص وعايرة التراص.

نتائج البحث

عادة ، كلاهما مباشر و اختبار كومبس غير المباشريجب أن تعطي نتيجة سلبية:

• يشير الاختبار المباشر السلبي إلى أن الأجسام المضادة المحددة لعامل الريس المرتبط بخلايا الدم الحمراء غائبة في الدم ولا يمكن أن تكون سبب انحلال الدم
• يُظهر الاختبار السلبي غير المباشر أنه لا توجد أيضًا أجسام مضادة مجانية لعامل Rh في بلازما الدم ؛ تشير الحقيقة إلى توافق دم المتبرع مع دم المتلقي (أو دم الأم والطفل) وفقًا لعامل Rh.

يشير اختبار كومبس الإيجابي إلى حقيقة تحسس العامل الريصي في الجسم ، وهو السبب الرئيسي لتعارض عامل ريسس في حالة نقل الدم أو عند حمل طفل بحالة عامل ريسس مختلفة. في هذه الحالة ، تظل النتائج دون تغيير لمدة 3 أشهر (عمر كريات الدم الحمراء). إذا أصبح فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي هو السبب ، فإن الاختبار الإيجابي يمكن أن يطارد المريض لعدة سنوات (في بعض الحالات ، مدى الحياة).

المرجعي! يعتبر اختبار مضادات الغلوبولين حساسًا للغاية ، ولكنه يحتوي على القليل من المعلومات. لا يسجل نشاط عملية الانحلال ، ولا يحدد نوع الجسم المضاد ولا يمكنه تحديد سبب علم الأمراض. للحصول على صورة أكثر اكتمالا ، يصف الطبيب المعالج بالضرورة دراسات إضافية (الفحص المجهري للدم ، والتحليل العام والكيميائي الحيوي ، والاختبارات الروماتيزمية ، و ESR ، ومستويات الحديد والفيريتين).

يمكن أن يكون لدرجة التحسس تعبير نوعي (من "+" إلى "++++") أو كمي - في شكل تعليق:

• 1: 2 - قيمة منخفضة ، لا تشكل خطراً ؛
• 1: 4 - 1: 8 - بداية تطور تفاعل مناعي ؛ لا تشكل خطرا ، ولكنها تتطلب مراقبة مستمرة ؛
• 1:16 - 1: 1024 - شكل مشرق من التوعية ، يجب اتخاذ التدابير على الفور.

قد يكون سبب الاختبار الإيجابي:

• نقل الدم غير المصنف (أو مع وجود خطأ في الكتابة) ، عندما لا يتطابق عامل Rh للمتبرع والمتلقي ؛
• صراع ريسوس أثناء الحمل (إذا كان تكوين مستضدات الدم في الأب والأم غير متطابقين) ؛
• فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي - الخلقي (الأولي) والثانوي ، والذي ينتج عن بعض الأمراض (متلازمة إيفانز ، الالتهاب الرئوي المعدي ، الزهري ، الهيموجلوبين البارد ، الأورام اللمفاوية) ؛
• رد فعل الانحلالي المخدرات.

لا يمكن للمريض حل أي من المشاكل المذكورة أعلاه دون مساعدة طبية. في جميع الحالات ، ستكون هناك حاجة إلى استشارة عاجلة أو تسجيل أو دخول المستشفى في حالات الطوارئ.

الانتباه! في حالات نادرة ، يمكن إجراء اختبار كومبس الإيجابي الكاذب. يمكن أن يكون السبب في ذلك هو عمليات نقل الدم المتكررة ، بالإضافة إلى عدد من الأمراض: التهاب المفاصل الروماتويدي ، الذئبة الحمامية ، الساركويد. أيضًا ، يمكن ملاحظة هذه الظاهرة بعد استئصال الطحال ، وكذلك في انتهاك مسار التفاعل (الاهتزاز المتكرر للمحتويات ، ووجود الملوثات).

اختبار كومبس- تحليل للكشف عن الأجسام المضادة الملتصقة بالسطح أو المذابة في البلازما. بمساعدتها ، يتم الكشف عن التحصين والأجسام المضادة لخلايا الدم الحمراء. الاسم الثاني هو اختبار مضاد الجلوبيولين. يحدث بشكل مباشر وغير مباشر.

في اختبار مضاد الجلوبيولين المباشريكتشف الأجسام المضادة المثبتة على سطح كريات الدم الحمراء. يتم إجراؤه مع الاشتباه بأمراض المناعة الذاتية الأخرى بعد تناول الأدوية (ميثيل دوبا ، البنسلين ، الكينين) و.

تم تحسس كريات الدم الحمراء في الجسم الحي - الأجسام المضادة مرتبطة بها بقوة بالفعل ، وإضافة مصل مضاد الجلوبيولين (مضاد IgG) يتسبب في التصاق الخلايا الحساسة ببعضها البعض ، وهو ما يمكن رؤيته بالعين المجردة.

اختبار كومبس غير المباشريكتشف الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في بلازما الدم ، ويتم إجراؤه قبل نقل الدم وأثناءه.

الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء - نوع من الأجسام المضادة الذاتية ، أي الأجسام المضادة ضد أنسجتها. يحدث الجسم المضاد الذاتي عندما يتفاعل الجهاز المناعي بشكل غير طبيعي مع بعض الأدوية ، مثل الجرعات العالية من البنسلين.

تحتوي كريات الدم الحمراء الموجودة على سطحها على تركيبات كيميائية مختلفة (جليكوليبيدات ، سكريات ، بروتينات سكرية وبروتينات) ، والتي تسمى مستضدات في الطب. يرث الشخص من والديه خريطة معينة من المستضدات على كل خلية دم حمراء.

يتم دمج المستضدات في مجموعات وبجانب ذلك ، يتم تقسيم الدم إلى عدة مجموعات - وفقًا لنظام AB0 ، Rh ، Kell ، Lewis ، Kidd ، Duffy. أشهرها وأهمها في عمل الطبيب هما AB0 و Rh (Rh).

نظام AB0

يتحدد انتماء العامل الريصي للفرد من خلال وجود هذه المستضدات. مستضد كريات الدم الحمراء المهم بشكل خاص هو المستضد D. إذا كان موجودًا ، فعندئذ يتحدثون عنه RhD للدم الموجب Rh، وإذا لم يكن - حول Rh سالب Rhd.

إذا انضم الجسم المضاد المقابل إلى مستضدات كريات الدم الحمراء ، فسيتم تدمير كريات الدم الحمراء - سيكون هناك انحلال الدم.

دواعي الإستعمال

المؤشر الرئيسي ل مباشرةاختبار مضاد الجلوبيولين- اشتباه في الإصابة بفقر الدم الانحلالي. غالبًا ما يتم إجراؤه مع فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي الأولي ، وانحلال الدم مع الأمراض الروماتيزمية والأورام المعدية وانحلال الدم الناجم عن الأدوية.

إذا ظهر فقر الدم بعد بضعة أيام أو أشهر من نقل الدم أو مع اليرقان لفترات طويلة عند حديثي الولادة ، يتم أيضًا إجراء اختبار كومبس المباشر.

غير مباشرتم إجراء اختبار مضاد الجلوبيولينقبل نقل الدم وأثناء الحمل لامرأة سلبية عامل ريزوس.

فقر الدم الانحلالي بالمناعة الذاتية

فقر الدم الانحلالي بالمناعة الذاتية (أولي)هو مرض مناعي ذاتي تقليدي لأسباب غير معروفة. يتم تعطيل التفاعل داخل الجهاز المناعي ، مما يؤدي إلى تصور كريات الدم الحمراء على أنها غريبة. في العقد الليمفاوية ، يتم تصنيع الأجسام المضادة من فئة IgG (تتفاعل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية) و / أو IgM (عند درجة حرارة 40 درجة مئوية) ، والتي ، عند تثبيتها على سطح كريات الدم الحمراء ، تبدأ عددًا من الإنزيمات ( النظام التكميلي) و "تثقيب" جدار كريات الدم الحمراء ، مما يؤدي إلى تدميره - انحلال الدم.

ترجع الأعراض الأولى إلى كل من تدمير خلايا الدم الحمراء وانخفاض الهيموجلوبين. بينهم:

• التعب والضعف العام والتهيج
• ضيق التنفس
• آلام في البطن والصدر والغثيان
• لون البول الداكن
• ألم في الظهر
• تلوين إيقاعي للجلد والأغشية المخاطية
• انخفاض في عدد كريات الدم الحمراء و

نتيجة إيجابية مباشرة اختبار كومبس 100٪ يؤكد تشخيص فقر الدم الانحلالي بالمناعة الذاتية ، مما يثبت مصدره من المناعة الذاتية. في الوقت نفسه ، لا تجعل النتيجة السلبية من الممكن إزالة التشخيص.

فقر الدم الانحلالي الثانوي

يمكن أن يكون فقر الدم الانحلالي الثانوي المناعي الذاتي واختبار كومبس الإيجابي مع الأمراض التالية:

• متلازمة إيفانز
• عدوى الالتهاب الرئوي

يعد الاختبار الإيجابي لمضادات الغلوبولين في هذه الأمراض أحد الأعراض وليس معيارًا تشخيصيًا.

مرض انحلالي حديثي الولادة

سبب مرض انحلالي لحديثي الولادةعدم توافق فصيلة الدم في الأم والجنين ، في معظم الحالات وفقًا لنظام Rh ، في حالات فردية - وفقًا لنظام AB0 ، بشكل عرضي - وفقًا لمولدات المضادات الأخرى.

يتطور تضارب العامل الريصي إذا كان الجنين في المرأة التي تحمل عامل ريسس (Rh) قد ورث دمًا إيجابيًا من والدها.

يتطور المرض عند الوليد فقط إذا كانت الأم قد طورت بالفعل أجسامًا مضادة للمستضدات المقابلة ، والتي تحدث بعد حالات الحمل السابقة والإجهاض وعمليات نقل الدم غير المتوافق. السبب الأكثر شيوعًا لتحفيز تخليق الأجسام المضادة لمستضدات غشاء كرات الدم الحمراء هو الولادة (نزيف الجنين والأم). تمر الولادات الأولى عمومًا دون مضاعفات ، لكن الولادات اللاحقة محفوفة بمرض انحلال الوليد في الأيام الأولى بعد الولادة.

أعراض مرض الانحلالي عند الوليد:

• اصفرار الجلد
• ، والغشاء المخاطي
• تضخم الكبد والطحال
• اضطرابات في الجهاز التنفسي
• انتفاخ الجسم كله
• الإثارة والاكتئاب التدريجي للجهاز العصبي المركزي

فقر الدم بعد نقل الدم

اختبار كومبس غير المباشرأجريت قبل نقل الدم لتقييم التوافق ، واختبار كومبس المباشر - بعده في حالة الاشتباه في حدوث انحلال دم بعد نقل الدم ، أي إذا كنت تعاني من أعراض مثل الحمى والري (اقرأ أدناه). الغرض من الاختبار هو الكشف عن الأجسام المضادة لكرات الدم الحمراء المنقولة التي ارتبطت بكرات الدم الحمراء للمتلقي وهي سبب انحلال الدم بعد نقل الدم ، بالإضافة إلى الإزالة المبكرة لكرات الدم الحمراء من الدورة الدموية للمتلقي (المتلقي).

أعراض:

• زيادة في درجة حرارة الجسم
• طفح جلدي على الجلد
• ألم في الظهر
• أحمر
• غثيان
• دوخة

فك التشفير

تجدر الإشارة إلى أن القواعد الأساسية لفك تشفير اختبارات مضادات الغلوبولين المباشرة وغير المباشرة هي نفسها. الاختلاف الوحيد هو موقع الأجسام المضادة - في الدم أو بالفعل على كريات الدم الحمراء.

• إذا اختبار كومبس المباشر سلبي- هذا يعني أن الجسم المضاد لا "يجلس" على كريات الدم الحمراء ويجب البحث عن سبب الأعراض أكثر ويجب إجراء اختبار كومبس غير المباشر
• إذا تم الكشف عن نتيجة إيجابية لاختبار كومبس بعد نقل الدم ، والالتهابات ، والأدوية - تستمر الإيجابية حتى 3 أشهر (عمر كريات الدم الحمراء 120 يومًا - 3 أشهر)
• ينتج عن اختبار مضاد الغلوبولين الإيجابي مرض مناعي ذاتي يستمر لأشهر وحتى سنوات

معيار

• اختبار كومبس المباشر - سلبي
• اختبار كومبس غير المباشر - سلبي

من الناحية النوعية ، يتم قياس النتيجة الإيجابية في عدد الإيجابيات من واحد إلى أربعة (+ ، ++ ، +++ ، ++++) ، وكميًا في شكل رقمي - 1:16 ، 1: 256 ، إلخ.

نعم. يجب أن يعرف طبيبك حقيقة حصولك على نقل دم ، لأنه يؤثر على التفسير الصحيح لنتائج الاختبار الآن. عند تلقي دم شخص آخر (وإن تم اختباره عدة مرات) ، هناك دائمًا احتمال أن يطور جسمك أجسامًا مضادة ضد الدم المنقول. هذه الأجسام المضادة سيكون لها تأثير سلبي على الصحة. مع عمليات نقل الدم اللاحقة ، يجب أن يعلم الطبيب أنك قد تلقيت بالفعل عمليات نقل الدم ، مما يعني أنه كان هناك وقت لتخليق الأجسام المضادة. بالنسبة للنساء الحوامل ، هذه المعلومات أكثر صلة.

3. إذا كان هناك عدم تطابق في عامل ال Rh بين الأم والطفل ، فهل سيمرض جميع الأطفال؟

يعتمد على ما إذا كان الطفل هو العامل الريسوسي الإيجابي أو السلبي (RhD). يمكن أن تكون ناقلات فصائل الدم الأول والثاني والثالث والرابع إيجابية وسلبية على حد سواء. في الحالة التي تكون فيها الأم سلبية العامل الريصي والطفل إيجابي عامل ريسس ، سيتم إنتاج الأجسام المضادة بالفعل مع الحمل الأول ، ولكن فقط بعد الولادة الأولى (أو إنهاء الحمل) سيكون هناك اتصال مباشر بين دم الطفل. الأم والطفل. سيكون تنفيذ التأثير الانحلالي للأجسام المضادة فقط في الولادات الثانية واللاحقة ، مما سيؤدي إلى مرض انحلالي عند الوليد.

يجب فحص كل امرأة لديها عامل ريس سلبي بعناية أثناء الحمل ، وبعد الولادة ، يتم إجراء العلاج الوقائي لمنع ظهور الأجسام المضادة ومضاعفات أخرى.

4. أثناء الحمل ، هل من الضروري معرفة فصيلة دم الزوج قبل إجراء فحص كومبس؟

من الضروري ليس فقط معرفة ، ولكن أيضًا التحقق من فصيلة دم الأب البيولوجي للطفل أثناء الحمل.

بيانات

• تم اقتراحه لأول مرة في كامبريدج عام 1945
• عتبة الحساسية - ما لا يقل عن 300 جزيء ثابت من الجسم المضاد في خلية حمراء واحدة
• عدد الأجسام المضادة التي تسبب انحلال الدم - بشكل فردي لكل شخص (من 16-30 إلى 300)
• قد يتم تطبيع ديناميكيات المؤشرات المختبرية الأخرى لفقر الدم الانحلالي (الهيموجلوبين ، والبيليروبين ، والخلايا الشبكية) ، وسيظل اختبار كومبس على نفس المستوى

تم إجراء آخر تعديل على اختبار كومبس: 16 مارس 2018 بحلول ماريا بوديان

على لوحة أو شريحة زجاجية يتم تطبيقها باستخدام ماصات (مختلفة!) 1 قطرة كبيرة من مصل O (I) ، A (II) ، B (III). مع ملاحظة الوقت ، باستخدام قضيب زجاجي نظيف أو زاوية نظيفة للشريحة الزجاجية ، يتم دمج قطرات المصل مع قطرات من الدم. يستغرق التحديد 5 دقائق ، ويهز الطبق ، ثم تضاف قطرة واحدة من محلول ملحي إلى كل خليط من القطرات ويتم تقييم النتائج. من الأفضل أن يكون المصل عبارة عن سلسلتين مختلفتين. يجب أن تتطابق نتائج فصيلة الدم في كلا سلسلتي المصل.

تقييم نتائج التراص المتساوي:

التراص المتساوي. مع رد فعل إيجابي ، تظهر حبيبات حمراء صغيرة من خلايا الدم الحمراء الملتصقة في الخليط. تندمج الحبوب في حبيبات أكبر ، وتتحول الأخيرة إلى رقائق. المصل مشوه تقريبًا ؛

مع تفاعل سلبي ، يظل الخليط ملونًا بشكل متساوٍ باللون الوردي لمدة 5 دقائق ولا يتم اكتشاف أي حبوب ؛

عند العمل مع 3 أمصال من المجموعات O (I) ، A (II) ، B (III) ، 4 مجموعات من ردود الفعل ممكنة:

1. إذا أعطت جميع الأمصال الثلاثة رد فعل سلبي ، أي أن الخليط ملون بالتساوي باللون الوردي - هذه هي فصيلة الدم O (I) ؛

   إذا أعطى مصل المجموعة A (II) فقط رد فعل سلبي ، وأعطى المصل O (I) و B (III) رد فعل إيجابي ، أي ظهرت الحبوب - هذه هي فصيلة الدم A (II) ؛

   أعطى مصل المجموعة B (II) تفاعلًا سلبيًا ، وأعطى مصل المجموعة O (I) و A (II) رد فعل إيجابي - هذه هي فصيلة الدم B (III).

أعطت جميع الأمصال الثلاثة ردود فعل إيجابية - الدم المختبر من مجموعة AB (IV). في هذه الحالة ، يتم إجراء دراسة باستخدام مصل مجموعة AB (IV).

ملحوظة!يجب أن تكون قطرات الدم المدروسة أصغر من 5-10 مرات من قطرات المصل.

أخطاء التراص Isohemagglutination.

عدم التراص في المكان الذي يجب أن يكون فيه التراص حيث لا ينبغي أن يكون. قد يكون هذا بسبب انخفاض عيار المصل بالإضافة إلى ضعف تراص كرات الدم الحمراء.

وجود تراص حيث لا ينبغي أن يكون- هذا هو التراص الكاذب ، عندما تشكل أكوام من كريات الدم الحمراء "أعمدة معدنية". هز الطبق أو إضافة محلول ملحي يدمرها.

Panagglutination ، عندما يلتصق المصل بجميع خلايا الدم الحمراء ، بما في ذلك فصيلة الدم الخاصة به. بحلول الدقيقة الخامسة ، تختفي علامات التراص.

هناك أيضًا ما يسمى بالتلصص البارد ، عندما تلتصق كريات الدم الحمراء ببعضها بسبب انخفاض درجة حرارة الهواء (أقل من 15 درجة مئوية) في الغرفة.

في جميع هذه الحالات ، يتم إجراء تفاعل متكرر ، أو وفقًا لمعيار كريات الدم الحمراء.

تحديد الانتماء Rh للدم

لتحديد الانتماء Rh ، أي لاكتشاف وجود أو عدم وجود مستضدات لنظام Rh في دم الأشخاص ، يتم استخدام مصل مضاد لـ Rhesus قياسي (كواشف) ، والتي تختلف في الخصوصية ، أي تحتوي على أجسام مضادة فيما يتعلق بـ مستضدات مختلفة لهذا النظام. لتحديد مستضد Rh 0 (D) ، غالبًا ما يستخدم مصل مضاد Rhesus مع إضافة محلول جيلاتين بنسبة 10٪ أو كاشف قياسي مضاد لـ Rhesus محضر مسبقًا بمحلول بولي جلوسين 33٪. للحصول على نتائج أكثر دقة للدراسة ، وكذلك للكشف عن مستضدات الأنظمة المصلية الأخرى ، يتم استخدام اختبار كومبس (وهو أيضًا حساس جدًا في تحديد توافق الدم المنقول). للدراسة ، يتم استخدام الدم الأصلي أو المحضر بنوع من المواد الحافظة. في هذه الحالة ، يجب غسل الدم من المادة الحافظة بحجم عشرة أضعاف من محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر. عند تحديد الانتماء Rh- يجب استخدام Rh 0 (D) عينتين من المصل أو الكاشف المضاد لـ Rhesus من سلسلتين مختلفتين وفي نفس الوقت استخدام كريات الدم الحمراء القياسية المأخوذة من دم من Rh- موجب (Rh +) و Rh- سلبي (Rh - ) فرادى. عند تحديد مضادات متساوية أخرى ، يجب استخدام كريات الدم الحمراء للتحكم وفقًا لذلك ، والتي تحتوي أو تفتقر إلى المستضد الذي يتم توجيه الأجسام المضادة ضده في مصل الدم القياسي.

الراصات الحرارية غير المكتملة هي النوع الأكثر شيوعًا من الأجسام المضادة التي يمكن أن تسبب الإصابة بفقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي. هذه الأجسام المضادة تنتمي إلى IgG ، نادرًا - إلى IgM ، IgA.

اختبار الكومبس

اختبار كومبس: مقدمة.اختبار كومبس هو طريقة تشخيص معملية تعتمد على تفاعل التراص الدموي.

الطريقة الرئيسية لتشخيص فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي هي اختبار كومبس. يعتمد على قدرة الأجسام المضادة الخاصة بالجلوبيولينات المناعية (خاصة IgG) أو المكونات المكملة (خاصة C3) لتلوث كريات الدم الحمراء المغلفة بـ IgG أو C3.

لوحظ ارتباط IgG و C3b بكريات الدم الحمراء في فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي وفقر الدم الانحلالي المناعي الناجم عن الأدوية. اختبار كومبس المباشر.يستخدم اختبار كومبس المباشر للكشف عن الأجسام المضادة أو المكونات المكملة المثبتة على سطح خلايا الدم الحمراء. يتم تنفيذها على النحو التالي:

للحصول على الأجسام المضادة للجلوبيولين المناعي البشري (مصل مضاد الغلوبولين) أو المكمل (مصل مضاد التكميل) ، يتم تحصين الحيوان بمصل الدم البشري أو الغلوبولين المناعي أو المكمل البشري. يتم تنقية المصل الذي يتم الحصول عليه من الحيوان من الأجسام المضادة إلى البروتينات الأخرى.

يتم غسل كريات الدم الحمراء للمريض بمحلول ملحي لإزالة المصل تمامًا ، والذي يحيد الأجسام المضادة للجلوبيولين المناعي ويكمل ويمكن أن يتسبب في نتيجة سلبية خاطئة.

إذا تم تثبيت الأجسام المضادة أو المكونات التكميلية على سطح كريات الدم الحمراء ، فإن إضافة مضاد الجلوبيولين أو المصل المضاد للتكميل يسبب تراص كريات الدم الحمراء.

يستخدم اختبار Direct Coombs في الحالات التالية:

انحلال الدم المناعي الذاتي.

مرض انحلالي حديثي الولادة.

فقر الدم الانحلالي المناعي الناتج عن الأدوية.

تفاعلات نقل الدم الانحلالي. اختبار كومبس غير المباشر.يكشف اختبار كومبس غير المباشر عن الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في مصل الدم. للقيام بذلك ، يتم تحضين مصل المريض بكريات الدم الحمراء من المجموعة 0 المانحة ، ثم يتم إجراء اختبار كومبس المباشر.

يستخدم اختبار كومبس غير المباشر في الحالات التالية:

تحديد التوافق الفردي بين دم المتبرع والمتلقي.

الكشف عن الأجسام المضادة ، بما في ذلك الأجسام المضادة التي تسبب تفاعلات نقل الدم الانحلالي.

تحديد مستضدات كريات الدم الحمراء السطحية في الوراثة الطبية والطب الشرعي.

تأكيد التوائم المتطابقة في زراعة نخاع العظم.

لإجراء اختبار بيولوجي ، يتم نقل الدم بأسرع ما يمكن (يفضل في طائرة). بعد نقل 25 مل من الدم ، يتم تثبيت أنبوب النظام بملقط. ثم يتم التوقف لمدة 3 دقائق ، يتم خلالها مراقبة حالة المستلم. لعمل عينة بيولوجية ، يتم حقن 25 مل من الدم ثلاث مرات.في نهاية الاختبار (بعد نقل أول 75 مل من الدم بجرعات جزئية 25 مل على فترات 3 دقائق) ، يتم ضبط النظام على معدل نقل الدم المطلوب. عند نقل المريض بأكثر من قنينة دم ، من الضروري إزالة الإبرة من الوريد. في هذه الحالة ، يتم إخراج الإبرة من أنبوب اختبار القارورة التي ينفد فيها الدم ويتم إدخالها في القارورة التالية. يتم تثبيت أنبوب النظام (المطاط أو البلاستيك) في هذه اللحظة بمشابك. إذا كانت هناك حاجة أثناء نقل الدم إلى إعطاء أي دواء آخر عن طريق الوريد للمتلقي ، يتم ذلك عن طريق ثقب الأنبوب المطاطي للنظام. ثقوب الأنبوب البلاستيكي غير مقبولة لأنها لا تسقط. بعد كل عملية نقل دم ، يجب مراقبة المريض لتحديد المضاعفات المحتملة والقضاء عليها في الوقت المناسب ، بما في ذلك ردود الفعل التحسسية. يجب قياس درجة حرارة الجسم بعد ساعتين من انتهاء نقل الدم. مع زيادة قياسه يجب أن يتكرر في الأربع ساعات القادمة كل ساعة. نفس القدر من الأهمية هو مراقبة التبول وتكوين البول ، مما يجعل من الممكن إثبات وجود تفاعل سام بعد نقل الدم. يعد ظهور قلة البول وانقطاع البول بعد نقل الدم ووجود خلايا الدم والبروتين في البول مؤشرًا مباشرًا على تطور انحلال الدم بعد نقل الدم.

اختبار كومبس المباشر. بمساعدة هذا الاختبار ، تم إثبات وجود الأجسام المضادة التي تم تثبيتها بواسطة كريات الدم الحمراء لدى الطفل. يشير الاختبار المباشر الإيجابي إلى التحسس وهو مؤشر قوي على مرض الانحلالي عند الوليد قبل ظهور العلامات السريرية الأخرى. كاستثناء ، وفقط في الحالات الشديدة جدًا ، قد يكون اختبار كومبس المباشر سلبيًا بسبب بداية انحلال الدم شبه الكامل لكريات الدم الحمراء المحسّسة.

يتم إجراء اختبار كومبس المباشر على النحو التالي: 5 قطرات من الدم تؤخذ من كعب الطفل توضع في أنبوب اختبار ويضاف 5 مل من محلول ملحي. تخلط جيدا مع الطرد المركزي لمدة 10 دقائق. يتم فصل سائل صافٍ عن رواسب كرات الدم الحمراء. ثم أضف مرة أخرى 5 مل من محلول ملحي واخلط وطرد مركزي. بعد الاختلاط ثلاث مرات بالمحلول الملحي ، يتم غسل كريات الدم الحمراء جيدًا. بعد الفصل الأخير للمادة الطافية ، يتم خلط رواسب كرات الدم الحمراء بمقدار 0.1 مل مع 0.9 مل من محلول ملحي. ضع 2-3 قطرات من هذا الخليط على شريحة زجاجية وأضف قطرة واحدة من مصل كومبس. يشير وجود التراص إلى أن التفاعل إيجابي (اختبار كومبس المباشر الإيجابي). يجب إجراء الدراسة في درجة حرارة الغرفة أعلى من 16 درجة مئوية لتجنب عمل الراصات الباردة.

اختبار كومبس غير المباشربمثابة دليل على وجود أجسام مضادة حرة في مصل الأم ويتم إجراؤها مع مصل الأم.

عادة ما يظهر مرض انحلال الدم عند حديثي الولادة مع عدم توافق عامل ريسس بعد الحمل الثاني. يولد الطفل الأول بصحة جيدة ، والثاني بعلامات فقر دم خفيف ، وفقط بعد الحمل الثالث يولد الأطفال بعلامات واضحة على مرض الانحلالي. فقط في النساء اللواتي سبق لهن التحسس أثناء الحمل الأول ، يمكن أن يولد الطفل بأعراض مرض الانحلالي. في بعض الحالات ، يتسبب التحصين في الإجهاض والإملاص. بالنسبة لظهور المرض وشدته ، فإن حالة المشيمة ومدة التعرض لراكمات الأم على الجنين مهمة. مع ظهور agglutinins قبل الولادة بـ 10-14 أسبوعًا ، عادة ما يكون لدى الطفل أشكال تحت الإكلينيكية. يؤدي الظهور المبكر للجلوتينين ، قبل الولادة بـ15-26 أسبوعًا ، إلى أشكال حادة من المرض. في جميع أشكال المرض ، العملية الرئيسية هي انحلال الدم. نتيجة تفاعل الأجسام المضادة للمستضد هي انحلال الدم ، تلف الشعيرات الدموية في الكبد والدماغ. اعتمادًا على الآفة السائدة ، يتم ملاحظة أشكال مختلفة من المرض. بعض الظواهر التأقية خطيرة أيضًا. تؤدي إلى تكوين مواد شبيهة بالهيستامين تتسبب في أضرار جسيمة لخلايا الكبد وخاصة الخلايا العقدية للنواة القاعدية وقرن الأمون والنخاع المستطيل وحتى القشرة الدماغية. مع تلف خلايا الكبد ، يضاف اليرقان الكبدي إلى اليرقان خارج الكبد. يموت الأطفال بأعراض شديدة من اليرقان النووي. إذا بقوا على قيد الحياة ، تظل أعراض آفات الجهاز العصبي (اضطرابات في الجهاز خارج الهرمية مع حركات رشيقة ، نوع من المشي الراقص ، حركات قسرية للرأس ، أحيانًا اضطراب في تنسيق الحركات الإرادية مع السقوط المتكرر ، زيادة قوة العضلات ، التخلف العقلي ، أي مع وجود علامات مثل encephalopathia posticteria infantum).