Метод агглютинации в геле для определения антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител. Антигены эритроцитов, определение полных и неполных антител, кровь

Здоровье

Средняя цена в вашем регионе: 986.94 от 650 … до 1330

Описание исследования

Подготовка к исследованию: Кровь берут из вены, а затем получают сыворотку (плазма крови без фибриногена) путем естественного свертывания или путем осаждения фибриногена. Исследуемый материал: Взятие крови

На поверхности эритроцитов находится большое количество антигенов. В зависимости от вида этих антигенов выделяют группы крови, самые изученные группы - АВО, Rh, Kell, Duffy и др. В норме в крови существуют антитела (иммуноглобулины) к антигенам другой группы, но при переливании крови, беременности, аутоиммунных заболеваниях и др. обнаруживаются антитела к своим антигенам.

Все иммуноглобулины можно разделить на полные и неполные антитела. Полные антитела образовывают в реакции агглютинации осадок, вследствие того, что у одной молекулы антитела имеются несколько мест связывания антигена. К полным антителам относят иммуноглобулины M и др. Неполные антитела (иммуноглобулины G и др.) не образуют осадка сами по себе, так как у них только одно место связывания антигена или остальные места по каким-либо причинам не связываются с антигеном, их называют блокирующими антителами. Такие антитела выявляют прямой и непрямой реакцией Кумбса, при которой добавляют антитела к неполным антителам (антиглобулиновую сыворотку) и образуется осадок.Полные и неполные антитела к эритроцитам.

Метод

Полные антитела выявляют реакцией солевой агглютинации. Реакция агглютинации заключается в связывании антителами исследуемой сыворотки стандартных эритроцитов набором антигенов на них, которая проявляется образованием хлопьевидного осадка. Реакция проходит при наличии раствора натрия хлорида, проводится при разных температурах для выявления всех полных антител.

Неполные антитела определяются реакцией Кумбса - выявление агглютинации (слипания) эритроцитов с неполными антителами при добавлении антиглобулиновой сыворотки.

Референсные значения - норма
(Антигены эритроцитов, определение полных и неполных антител, кровь)

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

Норма:

В норме антител к собственным эритроцитам не должно быть, при постановке реакции агглютинации и реакции Кумбса агрегации эритроцитов не происходит.

Показания

1. Исследование гуморального специфического иммунитета при подозрении на аутоиммунные реакции в организме

2. Резус-конфликт между матерью и плодом

3. Определение совместимости крови донора и реципиента

Повышение значений (положительный результат)

Антитела к эритроцитам обнаруживают при:
1. Аутоиммунных гемолитических анемиях
2. Гемолитической болезни новорожденных
3. Системных заболеваниях соединительной ткани
4. Хроническом активном гепатите

5. Резус-иммунизация

6. Гемотрансфузии

Где сдать анализ

34 лабораторий делают данный анализ в вашем регионе . Чтобы найти ближайшую лабораторию и сравнить цены на анализ - Антитела к антигенам эритроцитов (полные и неполные) - нажмите кнопку.

Аллоиммунные антитела – антитела к антигенам эритроцитов. Основные показания к применению: профилактика резус-конфликта при беременности, невынашивание беременности, гемолитическая болезнь новорожденных, переливание крови с целью профилактики посттрансфузионных осложнений.

В эритроцитах человека содержится большое количество групповые антигенов, образующих групповые системы, состоящие из одной или нескольких пар антигенов. Известны такие групповые системы крови, как - АВ0, резус-фактор, Келл, Левис (Lewis), Кидд, MNSs, Даффи, Диего и другие.
Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела - антитела к резус-фактору и другим эритроцитарным антигенам, появляющиеся в крови после переливания несовместимой донорской крови или при беременности. Появление в сыворотке крови аллоиммунных антител свидетельствует о сенсибилизации организма и увеличения риска осложнений при переливании несовместимой крови, наличии риска невынашивания беременности и развитии гемолитической болезни плода у резус-отрицательной женщины при резус–положительной крови у плода.
Резус - антитела относятся к так называемым аллоиммунным антителам, поскольку появляются в крови резус - отрицательных людей лишь при особых условиях. Условиями, способствующими образованию резус - антител, являются введение резус - отрицательному человеку резус - положительной крови или беременность резус - отрицательной женщины резус - положительным плодом. Аллоантитела содержатся в сыворотке индивида и не взаимодействуют с антигенами собственных эритроцитов. Они взаимодействуют с антигенами эритроцитов других пациентов после переливания крови или при беременности.
Определение резус - антител наряду с определением резус - принадлежности больного и донора необходимо для предупреждения переливания резус - несовместимой крови, а также для диагностики возможного заболевания плода или новорожденного гемолитической болезнью. Определение резус - антител требуется также при подготовке материла в целях использования для приготовления сывороток антирезус. Резус - антитела бывают разные по специфичности: анти-D, анти-С, анти-Е, анти-с, анти-е; и по форме: полные и неполные. Специфичность антител определяется тем, с каким из антигенов они реагируют. Форма антител определяется тем, каким образом они реагируют с эритроцитами, содержащими специфические для них резус - антигены. Полные антитела, соединяясь с резус - антигенами эритроцитов, вызывают агглютинацию этих эритроцитов при реакции в солевой среде. Неполные антитела в этих условиях лишь соединяются с эритроцитами, но не вызывают агглютинации, так что внешне эта реакция ничем не проявляется. Для того, чтобы установить, произошла ли реакция между неполными резус - антителами и эритроцитами, необходимы специальные условия, в частности, добавление различных коллоидов (желатин, полиглюкин) или проведение пробы Кумбса. При всех перечисленных условиях реакция между резус - антителами и эритроцитами, содержащими резус - антиген, в конечном итоге также проявляется в виде агглютинации эритроцитов.
Антигены системы резус имеют белковое происхождение. Одной из характерных черт данной системы является выраженный полиморфизм, что обусловливает наличие многих разновидностей антигенов. В эритроцитах человека выявляется большое количество антигенов и их систем - D, Du, C, c, E, e, Cw, M, N, S, Kell, Kidd, Duffy, Diego и другие. Наибольшее клиническое значение в настоящее время имеют антигены из группы резусов Rh (5 основных) – D, C, c, E, e, а также антигены системы Kell (антигены – К, к, Кu и др.). Антиген D и представляет собой, так называемый, резус-фактор (Rh) . 86% населения Российской Федерации относят к резус-положительным (Rh+). Остальные 14 % населения являются резус-отрицательными (Rh-). Резус-отрицательными считают доноров, кровь которых не содержит ни одного из антигенов – D, C и E. Антиген D имеет разновидности, так называемые, «слабые» варианты, которые составляют группу – Du и встречающиеся с частотой 1%. Доноры, содержащие Du, должны быть отнесены к резус-положительным. Это необходимо учитывать при переливании крови для избежания гемотрансфузионных осложнений.

Обнаружить такие антигены можно, применяя специальные методы.
В основе теста лежит иммунологическая особенность эритроцитов группы 0 - они не несут на себе ни А-, ни В-антигенов. Поэтому любая агглютинация при добавлении к ним сыворотки пациента будет обусловлена присутствием в ней нетипичных антител. Отсутствие агглютинации указывает на их отсутствие.
В ряде случаев к данным антигенам в организме человека начинается выработка антител (аллоиммунных антител). Такое состояние чаще наблюдается при беременности и переливании крови. Во время беременности у резус-отрицательной матери резус-положительного плода может развиться резус-конфликт, заключающийся в образовании антител в организме матери к эритроцитам плода, что способствует разрушению эритроцитов плода. Такой конфликт может приводить к выкидышу или гемолитической анемии плода. Если плод резус-отрицательный у резус-положительной матери, то резус-конфликт не развивается. Наибольший риск возможен при беременности если мать принадлежит к первой группе крови и резус-отрицательна, а отец - первой группы и резус-положительный. В этом случае имеется один шанс из четырех, что ребенок будет резус-положительным.
Любой из выше перечисленных антигенов при попадании в кровь антиген-отрицательной матери (не содержащей различные виды эритроцитарных антигенов) может вызвать появление аутоантител и осложнять течение беременности. Иммуногенность основных антигенов системы-резус убывает в порядке: с- Е-С-е.

Для профилактики резус-конфликта при беременности резус-отрицательные женщины должны находиться на учете в женских консультациях и проходить периодические обследования на появление аллоиммунных антител (чаще определяют антитела к резус-фактору), поскольку риск развития резус конфликта в этой ситуации может составлять до 15%.

Среди антигенных систем, после системы А, В, 0, наиболее частой причиной посттрансфузионных осложнений как при повторных переливаниях крови, так и у женщин, сенсибилизированных в процессе беременности, является система Резус, включающая 51 эритроцитарный антиген. Гены, кодирующие антигены этой системы, открыли в 1939 г. П. Левин и Р. Стетсон, антигены экспрессируются также на эритроцитах обезьян Macaca rhesus, антитела к которым агглютинировали эритроциты человека. Именно поэтому их назвали резус-антигенами (Rh) в 1940 г. К. Ландштейнер и А. Винер, работавшие с этими обезьянами при изучении эритроцитарных изоантигенов. Основные отличия системы Резус от системы А, В, 0 заключаются в том, что антигены А, В, 0 определяются в биологических жидкостях, тогда как антигены Rh в таких жидкостях отсутствуют. Антитела против изоантигенов системы А, В, 0 являются естественными, тогда как антирезусные антитела образуются во время беременности, при попадании резус-положительных эритроцитов плода в организм резус-отрицательной самки. Антирезусные антитела являются иммунными.
После антигенов систем А, В, 0 и Резус наибольшую клиническую значимость имеют антигены систем Келл, Даффи, MNS и др., однако антигенность компонентов этих систем по сравнению с антигенами систем A, В, 0 и Резус существенно меньшая.

Природа антигенов системы резус

Среди известных более 50 антигенов системы Rhesus (Rh) наиболее иммуногенными, а следовательно, и имеющими наибольшее клиническое значение, являются антигены D, С, Е, с и е (классификация Е. Фишера и Р. Рейса), контролируемые двумя высокогомологичными тесно сцепленными локусами генов 1-й хромосомы - RhD (экспрессии антигена D) и RhCE (экспрессия антигенов Ce и Ее). Среди этих антигенов наибольшей иммуногенностью характеризуется антиген D, поэтому он был назван антигеном Rh, его обозначение используется для обозначения Rh-положительных лиц. Среди жителей Европы он выявляется на эритроцитах 85% людей, 15% лиц являются Rh-отрицательными, Антиген d на эритроцитах Rh-положительных лиц не определяется, но обнаруживается на эритроцитах Rh-негативных особей. В связи с этим антиген d фактически является маркером Rh-негативных лиц. Иммуногенность других антигенов системы Резус убывает в ряду D>C>E>c>e. Экспрессия антигена С обнаруживается на эритроцитах 70% лиц, С - на эритроцитах 30% лиц, с - 85%, е - 97%. Помимо эритроцитов антигены системы Резус обнаружены в клетках фиксированных тканей человека - печени, почек, селезенки, надпочечников, слюнных желез, поджелудочной железы, мышцы сердца, пищевода, желудка, раковых опухолей человека.

Антитела к антигенам системы резус и эритобластоз новорожденных

Антитела к антигенам Rh, как и к антигенам системы А, В, 0, образуются при переливаниях крови, несовместимой по Rh-антигенам, а также при беременности в результате иммунизации Rh-негативной матери эритроцитами Rh-положительного плода. Образование таких антител возможно и при пересадках аллогенных тканей. Однако поскольку при пересадках тканей наибольшую роль в судьбе аллотрансплантата играют антигены главного комплекса гистосовместимости, а переливания Rh-несовместимой крови в клинической практике фактически исключены, наибольшую клиническую значимость имеет несовместимость матери и плода по антигенам системы Резус. Такая ситуация имеет место в тех случаях, когда мать и отец характеризуются, соответственно, как Rh- и Rh+. Плод, наследуя Rh-антигены отца, несовместим по Rh-антигенам с матерью, не имеющей таких антигенов. В результате эритроциты плода или антиген разрушенных эритроцитов, попадая в кровь матери, например вследствие родовой травмы, индуцируют образование анти-Rh-антител. Как отмечалось выше, эти антитела относятся к классу IgG, способны проникать через плаценту. При первой беременности сенсибилизация матери Rh-антигенами плода практически незначима для немедленной массивной продукции анти-Rh-антител. Однако при повторных беременностях против антигенов Rh продуцируется большое количество антител, которые проникают через плаценту, транспортируются в кровь плода и атакуют его зрелые эритроциты. Вследствие их гемолиза кровь плода остается насыщенной незрелыми эритроцитами - эритробластами. В результате происходящих процессов развивается общий отек плода, желтуха, анемия. В тяжелых случаях возможен летальный исход или рождение ребенка с симптомами тяжелой гемолитической болезни (эритробластоза).
Вместе с тем несмотря на то, что достаточно большое количество женщин являются Rh-отрицательными, возможность указанного исхода не очень велика, по имеющимся данным около 10% от теоретически вероятного. Это объясняется несколькими причинами. Во- первых, попадание эритроцитов плода в кровь матери в количествах, достаточных для образования антител к антигенам Rh, происходит не так уж часто. Во-вторых, вследствие генетических причин (отсутствие соответствующего гена или наличие слабого гена иммунного ответа), не все матери являются сильно реагирующими на данный конкретный антиген и могут относиться к слабо- или к нереагирующему на антигены Rh генотипу. В-третьих, если отец гетерозиготен по антигену Rh (т.е. наследовал резус-отрицательный ген одного из своих родителей), то дети являются резус-положительными лишь в 50% случаев. В-четвертых, примерно в 20% случаев предсуществующие антитела матери, например группы 0 (I), атакуют Rh+ эритроциты плода и лизируют их, если они относятся к группам А, В или AB системы А, В, 0. В этом случае устраняются эритроциты плода, способные индуцировать образование антител к антигенам Rh. Наконец, немаловажным обстоятельством является то, что первая беременность очень редко приводит к болезни плода. Чаще всего осложнения наступают при второй, а иногда и при третьей беременности.
Следует отметить, что гемолитическая болезнь новорожденных - не единственный пример нарушения нормального процесса беременности вследствие сенсибилизации матери клетками плода. Е.А. Зотиков приводит примеры нейтропении (врожденная нейтропения или агранулоцитоз) и транзиторной тромбоцитопении новорожденных, индуцированных описанными выше механизмами. В первом случае заболевание индуцировалось в результате сенсибилизации матери лейкоцитами плода. Образованные антилейкоцитарные антитела при повторных беременностях проходят через плаценту, оказывают цитопатогенное действие на нейтрофилы крови плода и подавляют кроветворную функцию костного мозга. Другие антитела матери реагировали с антигенами гистосовместимости плода, экспрессируемыми на всех клетках белой крови - нейтрофилах, моноцитах, тромбоцитах, лимфоцитах, а также на клетках всех органов и тканей. Нейтропения новорожденных характеризовалась транзиторным характером с частыми проявлениями инфекционных заболеваний - флегмонами, гастроэнтеритами, бронхопневмониями и др. Во втором случае заболевание новорожденных было следствием сенсибилизации матери во время беременности антигенами плода, индуцировавшими образование как лимфоцитотоксических, так и антитромбоцитарных антител, поражающих форменные элементы крови плода, в первую очередь тромбоцитов. Наконец, как отмечалось выше, гемолитическая болезнь новорожденных может быть следствием несовместимости матери и плода но антигенам системы А, В, 0.

Диагностика и профилактика гемолитической болезни

Для определения уровня антител после родов и во время последующей беременности ставят серологическую реакцию с использованием сыворотки Rh-негативной матери и эритроцитов Rh-позитивного плода. Взаимодействие антиген-антитело в титре 1:16 считается диагностически значимым.
Антитела к антигенам Rh характеризуют двумя типами - полными и неполными. Полные антитела эффективно агглютинируют или лизируют эритроциты Rh-позитивных лиц. Такие антитела относятся к классу IgM, выявляются у 50% матерей, родивших детей с эритробластозом. У остальных антитела прикрепляются к поверхности чувствительных к ним эритроцитов и блокируют действие полных антител. По другим данным, в 53% сывороток матерей обнаруживаются полные антитела, в 24% - неполные и в 15,8% - смесь обоих типов антител. Считают, что неполные антитела характеризуются относительно низким сродством к антигенной детерминанте, относятся к классу IgG, при гемотрансфузиях имеют большую значимость по сравнению с полными антителами. Неполные антитела определяют с помощью метода Кумбса, используя антисыворотку к иммуноглобулинам класса IgG. В этом случае антисывороточ-ные антитела будут взаимодействовать с неполными антителами, связанными с поверхностью Rh-позитивных эритроцитов. Антирезусные антитела, помимо сыворотки, могут определяться в небольших количествах в молоке рожениц.
Для профилактики гемолитической болезни новорожденных матери непосредственно после рождения первого ребенка (обычно в первые 2 суток) вводят внутривенно 150-300 мкг препарата человеческих иммуноглобулинов класса IgG против Rh (D) антигенов. Введение антител сопровождается разрушением и выведением из кровотока матери эритроцитов плода, вследствие чего антитела против антигенов системы Резус не образуются, и вторая беременность протекает без осложнений. По свидетельству Р.B. Петрова, гемолитическая болезнь новорожденных - это болезнь, единственный метод диагностики которой иммунологический, так же, как и эффективный метод предупреждения которой тоже иммунологический. Это болезнь, искорененная иммунологией.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-64.jpg" alt="Показанием к проведению заменных трансфузий служит уровень билирубина сыворотки > 340 мкмоль/л. При наличии">

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-1.jpg" alt="> Иммуногематологические лабораторные исследования ">

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-2.jpg" alt=">Антигены (Аг) эритроцитов человека – структурные образования, расположенные на внешней поверхности мембраны эритроцитов, обладающие"> Антигены (Аг) эритроцитов человека – структурные образования, расположенные на внешней поверхности мембраны эритроцитов, обладающие способностью взаимодействовать с соответствующими антителами (Ат) и образовывать комплекс антиген-антитело. Антигены эритроцитов - передаются по наследству, - обладают иммуногенностью (вызывают выработку Ат), - взаимодействуют с Ат, образуя комплекс Аг-Ат. При попадании в организм Аг, отсутствующего у данного индивида, создаются предпосылки для выработки Ат и развития аллосенсибилизации. Синтез Ат может наблюдаться в ответ на гемотрансфузии или беременность. При последующих гемотрансфузиях может произойти взаимодействие Аг эритроцитов доноров и Ат реципиента in vivo, что приводит к посттрансфузионному осложнению.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-3.jpg" alt=">У человека на эритроцитах обнаружено 236 Аг, объединенных в 29 систем. Но клиническая"> У человека на эритроцитах обнаружено 236 Аг, объединенных в 29 систем. Но клиническая роль антигенов неодинакова. Клиническое значение Аг определяется способностью аллоантител к данным Аг вызывать разрушение эритроцитов в организме реципиента. В связи с этим первостепенное клиническое значение имеют Аг систем АВ 0 и Резус. Аллоантитела- антитела, имеющие специфичность к антигенам эритроцитов, отсутствующих у индивида.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-4.jpg" alt="> Аллоантитела содержатся в сыворотке индивида, не взаимодействуют с собственными антигенами эритроцитов, но"> Аллоантитела содержатся в сыворотке индивида, не взаимодействуют с собственными антигенами эритроцитов, но взаимодействуют с антигенами эритроцитов других индивидов и могут быть выявлены специальными реагентами. Антитела к антигенам эритроцитов бывают естественные (регулярные) – являются врожденными, содержатся в сыворотке индивидов не имеющих в анамнезе гемотрансфузий или беременностей и, чаще всего, направлены против антигенов эритроцитов системы АВО. Иммунные (нерегулярные) антитела вырабатываются как результат иммунного стимула, когда в организм попадает антиген, отсутствующий у хозяина (например, при несовместимой гемотрансфузии или беременности)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-5.jpg" alt="> По способности вызывать гемолиз при несовместимых гемотрансфузиях и разрушение эритроцитов плода"> По способности вызывать гемолиз при несовместимых гемотрансфузиях и разрушение эритроцитов плода при иммунологическом конфликте мать-плод, антитела подразделяются на имеющие и не имеющие клиническое значение. Клиническое значение антител – это способность антител вызывать гемолитические посттрансфузионные осложнения или гемолитическую болезнь новорожденного. Клиническое значение имеют естественные антитела системы АВ 0. Среди иммунных антител клиническое значение имеют антитела, активные в прямом антиглобулиновом тесте при +37 о. С (в эту группу входят антитела системы Резус).

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-6.jpg" alt="> Антигены крови АВ 0. Одной из основных систем антигенов в иммуногематологии"> Антигены крови АВ 0. Одной из основных систем антигенов в иммуногематологии является система антигенов эритроцитов АВ 0, включающая 4 антигена: А, В, А 1. Правило Ландштейнера: здоровые индивиды имеют в сыворотке АВ 0 -антитела к антигенам, отсутствующим на их эритроцитах. По наличию на эритроцитах антигенов А и В, также присутствию в сыворотках анти-А(α), анти-В(β) антител, различают следующие группы крови:

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-7.jpg" alt="> Группы крови Название, принятое в клинической 0(I) "> Группы крови Название, принятое в клинической 0(I) А(II) В(III) АВ(IV) практике Аг на эритроцитах нет А В А+В Ат в сыворотке Анти-А(α) Анти-В(β) Анти-А(α) нет (изогемагглютинины) Анти-В(β) Международное название 0 А В АВ «Старое» название с указанием соответствующих Ат 0αβ(I) Аβ(II) Вα(III) АВо(IV) в сыворотке Частота встречаемости (%) в 35 33 23 9 Санкт-Петербурге

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-8.jpg" alt="> По международным правилам для обозначения групп крови используются только буквы А, В,"> По международным правилам для обозначения групп крови используются только буквы А, В, АВ и 0 и не применяется цифровое обозначение (I), (III), (IV). В настоящее время принято следующее обозначение для антител АВ 0: анти-А, анти-В антитела (взамен α - и β–изогемагглютининов).

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-9.jpg" alt=">Антигены системы АВ 0 развиваются на эритроцитах плода, однако полное созревание антигенов данной системы"> Антигены системы АВ 0 развиваются на эритроцитах плода, однако полное созревание антигенов данной системы происходит только через несколько месяцев после рождения. У взрослых на эритроцитах могут присутствовать следующие антигены системы АВ 0: А, В. Кроме того, на эритроцитах присутствует антиген Н (не входит в систему АВО, а принадлежит системе Н). Антиген Н является предшественником антигенов А и В, в большом количестве обнаруживается на поверхности эритроцитов, принадлежащих к группе крови 0 (I). АВН антигены могут присутствовать в растворенном виде в различных секреторных жидкостях организма. Индивиды, чьи жидкие секреты несут групповые вещества, называются выделителями (78% лиц). 22% людей имеют антигены только на эритроцитах и называются невыделителями.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-10.jpg" alt=">У здоровых людей отмечается гетерогенность антигена А. Существует несколько подгрупп антигена А: А 1,"> У здоровых людей отмечается гетерогенность антигена А. Существует несколько подгрупп антигена А: А 1, А 2, Аm, Аx, Аend, Аel, Аy и т. д. Среди европейцев 80% индивидов, принадлежащих к группе крови А(II), имеют подгруппу А 1, остальные 20% принадлежат к А 2 -подгруппе. А 2 антиген не существует отдельно, а представляет собой вариант А антигена. Различия между антигенами А 1 и А 2 являются качественными и количественными. Сыворотка некоторой части А 2 В индивидов содержит анти -А 1 агглютинины. Очень редкими и слабыми варианты антигена А являются Аm, Аx, Аend, Аel, Аy и т. д. , которые традиционными методами, применяемыми в лабораториях ЛПУ, не выявляются. Для обнаружения у реципиента А 2 антигена наряду с обычным реагентом, выявляющим А антиген на эритроцитах, используется реагент, содержащий антитела только к антигенам А 1. Отсутствие реакции эритроцитов пациента с реагентом, содержащим антитела к антигену А 1, указывает на наличие А 2 антигенов на эритроцитах индивида.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-11.jpg" alt=">Заключение об определении группы крови у лиц, имеющих А 2 -антиген Контро "> Заключение об определении группы крови у лиц, имеющих А 2 -антиген Контро Реагент Заключение об ль исследовании группы Анти- В крови А А 1 - + + - А(II) - + - А 2(II)подгрупповая - + + АВ(IV) - + - + А 2 В(IV)подгрупповая

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-12.jpg" alt=">Слабые формы В антигена также существуют: В 3, Вx, Вw, Вm, но крайне редки"> Слабые формы В антигена также существуют: В 3, Вx, Вw, Вm, но крайне редки среди населения Европы. Чаще встречаются среди населения Китая.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-13.jpg" alt="> Характеристика анти-А и анти-В антител Естественные антитела анти-А, анти-В"> Характеристика анти-А и анти-В антител Естественные антитела анти-А, анти-В принадлежат к иммуноглобулинам класса М (Ig. M). Выработанные в процессе иммунизации А и В антигенами анти-А и анти-В антитела являются иммунными и принадлежат к иммуноглобулинам класса G (Ig. G). Анти-А и анти-В антитела в сыворотках большинства людей представляют собой смесь естественных и иммунных антител (смесь Ig. M и Ig. G). Они вырабатываются в результате полигенного воздействия группоспецифических субстанций А и В на организм человека: инфекционные заболевания, прививки, потребление продуктов животного и растительного происхождения, гемотрансфузии иногруппной крови, гетероспецифическая беременность.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-14.jpg" alt=">Определение группы крови перекрестным способом (при помощи реагентов, содержащих анти-А и анти-В антитела"> Определение группы крови перекрестным способом (при помощи реагентов, содержащих анти-А и анти-В антитела и стандартных эритроцитов) Заключение о групповой принадлежности делают на основании наличия или отсутствия антигенов А и В на эритроцитах, а также присутствия анти-А и анти-В антител в сыворотке(плазме) исследуемой крови. Для исследования используют стандартные эритроциты групп крови 0(I) А(II), В(III), АВ(IV) и цоликлоны – растворы, содержащие моноклональные антитела анти-А, анти-В и анти-А+В. Перед исследованием маркируют пластинку, указывая № исследования, Ф. И. О. пациента и названия реагентов.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-15.jpg" alt=">Оценка результатов определения групп крови перекрестным способом Цоликлоны Стандартные "> Оценка результатов определения групп крови перекрестным способом Цоликлоны Стандартные Исследуемая эритроциты кровь Анти-А Анти-В Анти- принадлежит к 0 А В группе А+В - - + + 0(I) + - - + А(II) - + + - В(III) + + + - - - АВ(IV)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-16.jpg" alt=">В настоящее время для одновременного определения группы АВО и резус-принадлежности, а также для типирования"> В настоящее время для одновременного определения группы АВО и резус-принадлежности, а также для типирования антигенов эритроцитов используются идентификационные карты ID- карты Диа. Мед Выявление антигенов эритроцитов в ID-карте осуществляется методом агглютинации в геле. При добавлении исследуемых эритроцитов в пробирку, содержащую, например, анти-А, при наличии на эритроцитах антигена А, происходит реакция агглютинации. Образующиеся агглютинаты остаются в верхней части пробирки, т. к. не проходят через гель из-за большого размера образовавшихся комплексов АГ+АТ (положительный результат). При отсутствии антигена в исследуемом образце эритроциты не образуют агглютинатов с антисывороткой, легко проходят гель и оседают на дне пробирки (отрицательный результат)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-17.jpg" alt=">Причины ошибок при исследовании групповой принадлежности крови 1. Технические ошибки "> Причины ошибок при исследовании групповой принадлежности крови 1. Технические ошибки Неправильная маркировка Ошибочный порядок нанесения реагентов, неправильная регистрация результатов Нарушение техники исследования (несоблюдение инструкции‼): а) неправильное соотношение реагентов и исследуемой крови (сыворотки), б) использование некачественных реактивов (с истекшим сроком годности, хранившихся без холодильника и т. п.) в) сокращение времени наблюдения за реакцией, г) проведение исследования при температуре выше +250 С (может быть ложноотрицательная реакция) или ниже 150 С (возможна холодовая агглютинация)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-18.jpg" alt="> 2. Ошибки, обусловленные индивидуальными особенностями антигенов эритроцитов АВ 0 Количество и плотность"> 2. Ошибки, обусловленные индивидуальными особенностями антигенов эритроцитов АВ 0 Количество и плотность расположения антигенных детерминант на эритроцитах различно и является наследственным свойством. Вариант антигена Число антигенных детерминант на эритроците А 1 810 000 – 1 170 000 А 2 160 000 - 440 000 А 3 40 600 – 118 000 Аm 100 – 1 900 Чем больше антигенных детерминант присутствует на эритроцитах, тем активнее они вступают в реакцию с антителами.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-19.jpg" alt=">Антигены групп крови подвержены влиянию окружающей среды и могут модифицироваться при ее изменении. Ослабление"> Антигены групп крови подвержены влиянию окружающей среды и могут модифицироваться при ее изменении. Ослабление выраженности или полная утрата антигенных детерминант на эритроцитах описана у больных онкологическими заболеваниями и лейкозами. Изменение антигенов АВ 0 наблюдается также при инфекционных процессах вирусной или бактериальной природы. Описаны случаи образования В- антигена взамен А-антигена на поверхности эритроцитов у лиц с группой А(II) под действием бактериальных ферментов. Активность приобретенного В-антигена значительно ниже обычного В-антигена, вследствие чего приобретенный В-антиген не способен агглютинировать с собственными анти-В антителами.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-20.jpg" alt="> Отмечено, что выраженность А и В антигенов на эритроцитах коррелирует с"> Отмечено, что выраженность А и В антигенов на эритроцитах коррелирует с применением гормональных средств, а также изменяется при беременности. Анализ ошибок показывает, что наиболее часто ошибки обусловлены невыявлением антигена А 2 в группе крови А(II). Это приводит к ошибочной идентификации ее как 0(I). В группе А 2 В(IV) не выявление антигена А 2 приводит к еë ошибочной идентификации как группы В(III).

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-21.jpg" alt="> Характер затруднений при определении групп крови Отклонения от обычной агглютинации"> Характер затруднений при определении групп крови Отклонения от обычной агглютинации могут выражаться в отсутствии специфической агглютинации или наличии неспецифической агглютинации, а также несовпадением результатов исследования с цоликлонами и стандартными эритроцитами. Чаще всего затруднения связаны с присутствием в исследуемой крови аутоантител на эритроцитах или аллоантител в сыворотке. Ауто- и аллоантитела могут вступать в реакцию агглютинации с соответствующими антигенами и искажать результаты АВ 0 типирования. Алло- и аутоантитела бывают специфическими (взаимодействующими с соответствующими антигенами эритроцитов с образованием комплекса Аг+Ат) и неспецифическими (реакция агглютинации происходит не за счет образования комплекса Аг+Ат, а при взаимодействии иных химических структур, представленных на эритроцитах)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-22.jpg" alt=">1. Специфическая и неспецифическая холодовая агглютинация. Специфические и неспецифические холодовые Ат, присутствующие"> 1. Специфическая и неспецифическая холодовая агглютинация. Специфические и неспецифические холодовые Ат, присутствующие в сыворотке крови исследуемого образца, могут взаимодействовать со стандартными эритроцитами при использовании перекрестного способа определения групп крови. Показателем присутствия таких Ат является агглютинация сыворотки пациента в эритроцитами 0(I). Неспецифические холодовые АТ присутствуют в сыворотках больных онкологическими и гематологическими заболеваниями. Аутоантитела обнаруживаются у больных аутоиммунными гемолитическими анемиями и тромбоцитопениями. Неспецифическая агглютинация исследуемой крови может быть обусловлена присутствием в сыворотке патологических белков (гипергаммаглобулинемии).

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-23.jpg" alt="> 2. Низкая активность анти-А и/или анти-В антител (изогемагглютининов α и β) пациента."> 2. Низкая активность анти-А и/или анти-В антител (изогемагглютининов α и β) пациента. Отсутствует или слабо выражена реакция сыворотки пациента с соответствующими стандартными эритроцитами. Наблюдается: У новорожденных У лиц пожилого возраста При наличии онкологических и гематологических заболеваний

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-24.jpg" alt="> 3. Холодовая агглютинация эритроцитов пациента со стандартными сыворотками. "> 3. Холодовая агглютинация эритроцитов пациента со стандартными сыворотками. Обусловлена присутствием на исследуемых эритроцитах холодовых аутоантител. Последние активны при t 20 о. С и не имеют клинического значения, однако затрудняют проведение исследования. Наблюдаются полиагглютинабельность и положительный аутоконтроль. Полиагглютинабельность – способность эритроцитов агглютинировать со всеми образцами сывороток, не зависимо от их АВ 0 принадлежности. Положительный аутоконтроль – агглютинация эритроцитов в собственной сыворотке больного.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-25.jpg" alt=">4. Присутствие в исследуемой крови А 2 антигена При наличии у пациента в эритроцитах"> 4. Присутствие в исследуемой крови А 2 антигена При наличии у пациента в эритроцитах антигена А 2 в сыворотке может дополнительно содержаться экстра агглютинин анти А 1 (α 1), взаимодействующий со стандартными эритроцитами группы крови А(II) – см. следующую таблицу. Частота встречаемости экстра агглютининов в группе крови А 2(II) составляет ≈2%, а в группе крови А 2 В(IV) – 30%. Чаще экстра агглютинины принадлежат к Ig. M, активны при комнатной температуре, при нагревании планшеты до +38 -40 о. С исчезают. Считается, что анти-А 1 антитела (экстра агглютинины), присутствующие в крови реципиентов, не выявляются при 37 о. С, поэтому не имеют клинического значения. Однако показана возможность выработки анти-А 1 антител (принадлежащих Ig. G и поэтому имеющих клиническое значение) у реципиентов, в анамнезе которых были трансфузии крови, содержащей А 1 антиген эритроцитов.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-26.jpg" alt=">Определение группы крови перекрестным методом у лиц, имеющих А или А"> Определение группы крови перекрестным методом у лиц, имеющих А или А 2 антиген цоликлоны Стандартные Группа крови эритроциты Анти анти Анти 0 А В -А -В А+В А 1 + - + + - - + А(II) + - - - + А 2(II) подгрупповая + + + + - - - АВ(IV) + + + - - - - А 2 В(IV) подгрупповая

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-27.jpg" alt=">Определение группы крови перекрестным методом у лиц, имеющих А 2 антиген"> Определение группы крови перекрестным методом у лиц, имеющих А 2 антиген и экстра агглютинины анти-А 1 цоликлоны Стандартные Группа крови эритроциты Анти анти Анти 0 А В -А -В А+В А 1 + - + + - - + А(II) + - - - + А 2(II) подгрупповая + - - + А 2(II) подгрупповая + с экстра агглютининами анти А 1 + + - - - АВ(IV) + + + - - - - А 2 В(IV) подгрупповая + + + - - А 2 В(IV) подгрупповая + с экстра агглютининами анти А 1

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-28.jpg" alt="> Правила, которые надо соблюдать при исследовании группы крови 1. Использовать для исследования"> Правила, которые надо соблюдать при исследовании группы крови 1. Использовать для исследования реактивы, в качестве которых нет сомнения 2. Исследование проводить перекрестным способом 3. Кровь для исследования брать до проведения больному гемотрансфузий и переливания плазмозамещающих растворов 4. Обращать внимание на диагноз 5. Проводить ежедневный контроль качества применяемых реактивов

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-29.jpg" alt="> Антигены системы Резус Система антигенов эритроцитов была открыта в 1940 г. Ландштейнером"> Антигены системы Резус Система антигенов эритроцитов была открыта в 1940 г. Ландштейнером и Винером и насчитывает в настоящее время 48 антигенов. Среди антигенов системы резус наибольшее клиническое значение имеет антиген D. Обладая выраженными иммуногенными свойствами, антиген D в 95% случает является причиной гемолитической болезни новорожденных при несовместимости матери и плода, а также частой причиной тяжелых посттрансфузионных осложнений. Лиц, имеющих антиген D, относят к резус- положительным, а лиц не имеющих антиген D – к резус отрицательным.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-30.jpg" alt="> Наследование антигена D Мать Rh+ Отец Rh+ D/d "> Наследование антигена D Мать Rh+ Отец Rh+ D/d DD (Rh+) Dd (Rh+) dd(Rh-)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-31.jpg" alt="> Комплекс генов, кодирующих систему Резус, состоит из 3 -х антигенных детерминант: "> Комплекс генов, кодирующих систему Резус, состоит из 3 -х антигенных детерминант: D или отсутствие D («d»), С или с, Е или е в различных комбинациях. Существование антигена d не подтверждено, однако символ d применяется в иммуногематологии для обозначения факта отсутствия антигена D на эритроцитах.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-32.jpg" alt="> Наиболее часто встречаемые фенотипы системы резус Понятие фенотип обозначает антигены, присутствующие"> Наиболее часто встречаемые фенотипы системы резус Понятие фенотип обозначает антигены, присутствующие на эритроцитах индивида (по определению Международного общества переливания крови) фенотип Rh Частота реципиента встречаемости Cc. De Rh+ 34% CDe Rh+ 19. 5% c. DEe Rh+ 12% Cc. DEe Rh+ 14% ce Rh- 13% Cce Rh- 1% c. Ee Rh- 0. 1%

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-33.jpg" alt="> Разновидности антигена D Антиген D состоит из структурных единиц – эпитопов. "> Разновидности антигена D Антиген D состоит из структурных единиц – эпитопов. Эритроциты здоровых лиц экспрессируют все эпитопы антигена D (нормально выраженный антиген D). Эритроциты, имеющие сниженную экспрессию антигена D (сниженное количество антигенных детерминант) обуславливают D слабый. Если количество антигенных детерминант не снижено, но они отличаются качественно, то такой D антиген называется вариантным (D вариантный).

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-34.jpg" alt=">В настоящее время принята следующая тактика определения резус-принадлежности для пациентов - потенциальных реципиентов: лица,"> В настоящее время принята следующая тактика определения резус-принадлежности для пациентов - потенциальных реципиентов: лица, имеющие D слабый и D вариантный расцениваются как резус-отрицательные. Применяемые в широкой клинической практике реагенты для оценки резус-фактора (цоликлоны анти-D) выявляют резус-принадлежность D слабого и D вариантного как отрицательную. Ранее, т. е. до начала широкого применения цоликлонов анти-D, D слабый и D вариантный определялись как Du, таким пациентам переливали резус-отрицательную R-массу.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-35.jpg" alt=">Причины ошибок при определении резус- принадлежности крови 1. Наличие на исследуемых эритроцитах"> Причины ошибок при определении резус- принадлежности крови 1. Наличие на исследуемых эритроцитах аутоантител (результат сомнительный, слабоположительный). Аутоантитела связываются с компонентами реагента: полюглюкином, желатином, альбумином и п. т.) Действия: провести контроль с реактивом без анти-D антител (поставляется производителем). 2. Ослабление активности антигенов системы Резус при заболеваниях. Наблюдается расхождение с предыдущими определениями резус-фактора у данного пациента: ранее определяемая Rh+ принадлежность определяется как rh- и наоборот.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-36.jpg" alt="> Ложноотрицательный результат: 1. Нарушение методики (неправильное соотношение реактивов, несоблюдение времени и"> Ложноотрицательный результат: 1. Нарушение методики (неправильное соотношение реактивов, несоблюдение времени и температуры и т. д.) 2. Использование некачественных реактивов (истекший срок годности, нарушение условий хранения, транспортировки и т. д.) 3. Абсорбция на исследуемых эритроцитах большого количества аутоантител может препятствовать взаимодействию D антигена с анти-D антителами реактива.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-37.jpg" alt="> Rh(-) по сравнению с ранее определенной положительной "> Rh(-) по сравнению с ранее определенной положительной контроль - контроль + Непрямая реакция повторить исследование Кумбса с отмытыми эритроцитами Тест положительный Тест контроль+ Rh+ отрицательный возможно Тест отрицательный контроль (-) присутствие Возможно наличие Rh (-) аутоантител, D вариантов исследовать в геле Диа. Мед, поставить прямой тест Кумбса с анти-Ig. G

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-38.jpg" alt="> Rh(+) по сравнению с ранее определенной отрицательной контроль – "> Rh(+) по сравнению с ранее определенной отрицательной контроль – контроль + Rh+ повторить исследование с отмытыми эритроцитами Тест контроль+ отрицательный возможно контроль (-) присутствие Rh (-) аутоантител, исследовать в геле Диа. Мед, поставить прямой тест Кумбса с анти-Ig. G

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-39.jpg" alt="> Антитела к антигенам системы Резус являются иммунными и появляются в результате трансфузий"> Антитела к антигенам системы Резус являются иммунными и появляются в результате трансфузий эритроцитов доноров, содержащих антигены, отсутствующие у реципиентов, а также при иммунизации матери эритроцитами плода. Чаще всего антитела к антигенам эритроцитов системы резус являются Ig. G, поэтому не могут вступать в прямую агглютинацию с эритроцитами in vitro. Для проявления агглютинации необходимо добавить усилители агглютинации: желатин, альбумин, полиглюкин или другие коллоиды; провести центрифугирование, создать оптимальный температурный режим (+37 -48 о. С), добавить протеолитические ферменты. Чаще в крови доноров и реципиентов выявляют анти-D антитела, реже анти-е антитела. Иммуногенность антигенов системы Резус представлена следующим образом: D>с>Е>С>е.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-40.jpg" alt=">Ig. G состоит из 4 -х подклассов: Ig. G 1, Ig. G 2, Ig."> Ig. G состоит из 4 -х подклассов: Ig. G 1, Ig. G 2, Ig. G 3, Ig. G 4. Подклассы существенно отличаются по своим свойствам in vivo: по способности активировать комплемент, взаимодействовать с Fc-рецепторами фагоцитирующих клеток, вызывать гемолиз эритроцитов. Ig. G 1 и Ig. G 3 вызывают гемолиз и ГБН. Ig. G 2 и Ig. G 4 не вызывают гемолиз и ГБН. Ig. G антитела к антигенам эритроцитов системы Резус принадлежат, в основном, к субклассу Ig. G 1 и Ig. G 3. У некоторых лиц антитела являются частично Ig. G 2 и Ig. G 4.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-41.jpg" alt="> Cистема антигенов эритроцитов Келл Антиген К был открыт Кумбсом в 1946 г."> Cистема антигенов эритроцитов Келл Антиген К был открыт Кумбсом в 1946 г. при исследовании гемолитической болезни новорожденного. Сейчас известно 24 антигена эритроцитов системы Келл. Частота встречаемости 7 - 9%. Антитела ко всем антигенам эритроцитов системы Келл являются клинически значимыми, вызывают ПГО (посттрансфузионные гемолитические осложнения) и ГБН (гемолитическую болезнь новорожденного). Большинство образцов антител принадлежит к Ig. G субкласса Ig. G 1. Трансфузионные реакции, вызванные К антигеном, иногда приводят к смертельному исходу. Гемолиз эритроцитов внесосудистый. ГБН, обусловленная анти-К антителами имеет тяжелое течение, характеризуется анемией плода, а не гемолизом эритроцитов. В наиболее тяжелых случаях наступает внутриутробная смерть плода и мертворождение.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-42.jpg" alt="> Осложнения после гемотрансфузий Посттрансфузионными реакциями и осложнениями называются нежелательные последствия, возникающие у реципиента"> Осложнения после гемотрансфузий Посттрансфузионными реакциями и осложнениями называются нежелательные последствия, возникающие у реципиента после трансфузии. Посттрансфузионные реакции – не вызывают серьезных и длительных нарушений функций организма. Посттрансфузионные осложнения – тяжелые клинические проявления, представляющие опасность для жизни больного. При проведении гемотрансфузий у реципиентов возможны реакции и осложнения иммунологического и неиммунологического типа. Осложнения иммунологического типа обусловлены иммунологическим конфликтом между компонентами крови донора и реципиента (в основе реакция Аг+Ат). Осложнения неиммунологического типа обусловлены многими причинами: трансфузиями гемолизированных эритроцитов, переливанием инфицированной крови, метаболическими нарушениями, нарушением техники трансфузии и т. д.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-43.jpg" alt=">Немедленные осложнения и реакции возникают в момент трансфузии или через несколько часов после трансфузии."> Немедленные осложнения и реакции возникают в момент трансфузии или через несколько часов после трансфузии. Отсроченные осложнения возникают через несколько дней, месяцев или лет после трансфузии.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-44.jpg" alt=">Классификация посттрансфузионных осложнений иммунологического типа НЕМЕДЛЕННЫЕ ОТСРОЧЕННЫЕ Гемолитические "> Классификация посттрансфузионных осложнений иммунологического типа НЕМЕДЛЕННЫЕ ОТСРОЧЕННЫЕ Гемолитические Гемолитические Фебрильные негемолитические Аллоиммунные Крапивница Тромбоцитарно-рефрактерные Анафилактические Болезнь «трансплантат против хозяина» Острая легочная недостаточность, связанная с трансфузией Иммуномодуляторные

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-45.jpg" alt="> Гемолитические немедленные и отсроченные обусловлены разрушением эритроцитов доноров антителами реципиентов. Частота посттрансфузионных"> Гемолитические немедленные и отсроченные обусловлены разрушением эритроцитов доноров антителами реципиентов. Частота посттрансфузионных гемолитических осложнений от 0, 002% до 0, 2% проведенных гемотрансфузий. Частота посттрансфузионных негемолитических осложнений от 1% до 10% проведенных гемотрансфузий. Фебрильные негемолитические реакции Проявляются подъемом температуры на 10 С и более в течение 8 -24 часов после трансфузии. При диагностике необходимо исключить другие причины подъема температуры (септические реакции, простудные заболевания и др). Обычно не опасны для жизни больного, встречаются в одном случае на 130 - 400 трансфузий крови или в 20% при трансфузиях тромбоцитов. Аллергические реакции – крапивница Характеризуется сыпью, зудом, обычно без подъема температуры. Анафилактические реакции встречаются редко: одна на 20 000 – 50 000 трансфузий. Сопровождаются кашлем, одышкой, бронхоспазмом, иногда может быть местная реакция на коже и слизистой. Возможны тяжелые клинические последствия – шок, смерть.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-46.jpg" alt=">Разрушение эритроцитов антителами Начало и картина проявлений ПГО, вызванных переливанием донорских эритроцитов, несовместимых по"> Разрушение эритроцитов антителами Начало и картина проявлений ПГО, вызванных переливанием донорских эритроцитов, несовместимых по антигенам системы АВ 0, Резус, Келл и др. зависит от механизма их разрушения: в кровяном русле (внутрисосудистый гемолиз) – при гемотрансфузии, несовместимой по системе АВ 0, Келл и др. в тканях (внесосудистый гемолиз) – например, при гемотрансфузии, несовместимой по системе Резус.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-47.jpg" alt="> Внутрисосудистый гемолиз Интенсивность разрушения эритроцитов зависит от: Объема перелитых"> Внутрисосудистый гемолиз Интенсивность разрушения эритроцитов зависит от: Объема перелитых эритроцитов, Уровня содержания Ат. Высокий уровень приведет к быстрому гемолизу вплоть до полного гемолиза в течение 1 часа. У реципиента с низким уровнем Ат в начале клинические признаки могут отсутствовать, но через несколько дней уровень Ат повысится и появятся признаки гемолитического осложнения, Функциональных свойств и специфичности АТ (авидности), Количества антигенных детерминант на эритроците, Уровня компонентов комплемента в крови у реципиента. Способность АТ фиксировать комплемент определяется присутствием на тяжелых цепях иммуноглобулинов зоны, взаимодействующей с первым компонентом комплемента. Такая зона присутствует в Ig. M и некоторых субклассах Ig. G (Ig. G 1 и Ig. G 3). Однако резус-антитела, являясь иммуноглобулинами класса М и G, по причине особенностей собственного строения не способны фиксировать комплемент, следовательно не вызывают внутрисосудистый гемолиз эритроцитов.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-48.jpg" alt="> Клинические последствия внутрисосудистого гемолиза: 1. Быстрое падение"> Клинические последствия внутрисосудистого гемолиза: 1. Быстрое падение кровяного давления 2. Геморрагический синдром (ДВС-синдром) Лабораторные признаки: 1. Гемоглобинемия. Возникает вследствие гемолиза эритроцитов. Сравнить окрашивание образца сыворотки или плазмы пациента, взятой до трансфузии, с образцом, взятым после трансфузии. Исключить механический гемолиз, вызванный неправильной техникой взятия крови или подготовки (центрифугирования). 2. Гемоглобинурия. В моче присутствует свободный гемоглобин, но отсутствует свободный миоглобин. 3. Билирубинемия. Через 5 -7 часов (иногда через 1 час) после гемолиза в плазме реципиента появляется продукт деградации гемоглобина – билирубин. Развивается желтуха. При нормальной функции печени уровень билирубина возвращается в норму через 24 ч. 4. Развитие острой почечной недостаточности ( мочевина, креатинин, калий)

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-49.jpg" alt="> Внесосудистое разрушение эритроцитов Переливание несовместимой крови реципиентам, имеющим антитела, не фиксирующие комплемент (антитела"> Внесосудистое разрушение эритроцитов Переливание несовместимой крови реципиентам, имеющим антитела, не фиксирующие комплемент (антитела к антигенам системы Резус), вызывает внесосудистое разрушение эритроцитов: Антитела адсорбируются на несовместимых эритроцитах Комплекс Аг+Ат распознается Fc-рецепторами клеток ретикуло- эндотелиальной системы (моноцитов, макрофагов) Фагоцитоз Внутритканевый гемолиз Процесс происходит в селезенке (преимущественно) и в печени. Интенсивность гемолиза зависит от: Объема перелитых эритроцитов Количества антигенных детерминант на эритроцитах Концентрации антител у реципиента Активности макрофагов в связывании комплекса Аг+Ат

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-50.jpg" alt="> Причины гемоглобинемии при внесосудистом гемолизе Часть эритроцитов, несущих комплекс"> Причины гемоглобинемии при внесосудистом гемолизе Часть эритроцитов, несущих комплекс Аг+Ат не взаимодействует с макрофагами и возвращается в сосудистое русло, где подвергается лизису. Fc-рецепторы селезенки перенасыщаются, снижается способность утилизовывать гемоглобин. Последний попадает в кровяное русло. NK-лимфоциты, продуцирующие перфорины, эффективно разрушают эритроциты без участия комплемента. Этот процесс стимулируют анти-D антитела, принадлежащие к Ig. G 1 (доказано in vitro). При большой концентрации Ат в сыворотке реципиента, эритроциты, покрытые анти-D, лизируются моноцитами в сосудистом русле. Процесс стимулируется Ig. G 3.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-51.jpg" alt=">Клинические последствия внесосудистого гемолиза: Такие же, как при внутрисосудистом, но"> Клинические последствия внесосудистого гемолиза: Такие же, как при внутрисосудистом, но менее тяжелые: подъем температуры, озноб. ДВС и почечная недостаточность развиваются редко. Осложнения возникают через 1 час или несколько часов после трансфузии и проявляются в виде анемии, иктеричности склер и кожных покровов, увеличении печени, селезенки, повышении билирубина в сыворотке, иногда гемоглобинурии, отсутствии роста уровня гемоглобина после трансфузий.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-52.jpg" alt="> Отсроченные трансфузионные гемолитические реакции (ОТГР) Возникает у реципиентов, сенсибилизированных"> Отсроченные трансфузионные гемолитические реакции (ОТГР) Возникает у реципиентов, сенсибилизированных эритроцитарными антигенами (анти-с, анти-Е, анти-С, анти-К и др.) при предшествующих трансфузиях или беременностях. Сенсибилизация приводит к длительному существованию лимфоцитов памяти. Уровень циркулирующих антител может снижаться до невыявляемости, но повторная реиммунизация (например, при переливании R-массы) приводит к быстрому иммунному ответу и повышению титра антител в сыворотке. Концентрация аллоантител в плазме реципиента постепенно повышается и достигает пика на 10 -15 день после трансфузии. Интенсивность гемолиза пропорциональна нарастающей концентрации антител. Наибольший гемолиз наступает в среднем на 5 - 8 день после трансфузии, но может быть и через 1 месяц.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-53.jpg" alt="> Отсроченные трансфузионные гемолитические реакции (ОТГР) встречаются редко"> Отсроченные трансфузионные гемолитические реакции (ОТГР) встречаются редко и распознаются плохо. Клинические признаки ОТГР: Снижение содержания гемоглобина (анемия с развитием сфероцитоза) Лихорадка Желтуха Гемоглобинурия Почечная недостаточность (редко) Лабораторная диагностика: В образце крови реципиента, взятом после трансфузии, выявляются слабоактивные аллоантитела и аутоантитела на эритроцитах. Прямая реакция Кумбса положительна до полного выведения эритроцитов донора из организма реципиента.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-54.jpg" alt="> Лабораторные исследования при ПГО (посттрансфузионных гемолитических осложнениях) выявляют у реципиента: "> Лабораторные исследования при ПГО (посттрансфузионных гемолитических осложнениях) выявляют у реципиента: Гемоглобинемию Гемоглобинурию Гипербилирубинемию (непрямой билирубин) Снижение гематокрита Снижение или отсутствие гаптоглобина (белок плазмы крови, специфически связывающий гемоглобин, белок острой фазы) Наличие в сыворотке антител к антигенам эритроцитов Положительный прямой антиглобулиновый тест (прямая проба Кумбса) Для исследования необходимо иметь пробы крови реципиента, взятые до и после трансфузии (для оценки гемолиза, уровня билирубина и гаптоглобина). Типирование образца после гемотрансфузии неинформативно, т. к. содержит эритроциты донора.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-55.jpg" alt="> Для выявления причины ПГО: 1. Перепроверить групповую и резус-принадлежность донора и реципиента"> Для выявления причины ПГО: 1. Перепроверить групповую и резус-принадлежность донора и реципиента (в образце крови, взятом до трансфузии) 2. Поставить пробу на индивидуальную совместимость крови донора и сыворотки пациента (взятой до трансфузии) обычным методом и с использованием антиглобулинового теста. 3. Провести исследование антител к антигенам эритроцитов в образцах крови, взятых до и после трансфузии. 4. Выполнить прямой антиглобулиновый тест (прямая реакция Кумбса), выявляющий наличие адсорбированных антител на эритроцитах (в образце крови после трансфузии). Положительная реакция – признак иммунологического конфликта, свидетельствующий об адсорбции антител на несовместимых эритроцитах донора (при условии, что реципиент и донор не имели положительный антиглобулиновый тест до трансфузии).

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-56.jpg" alt="> Гемолитическая болезнь новорожденных Развивается при наличии в крови у матери антител к антигенам"> Гемолитическая болезнь новорожденных Развивается при наличии в крови у матери антител к антигенам эритроцитов плода, способных проходить через плацентарный барьер в кровоток ребенка, взаимодействовать с его эритроцитами, вызывая их гемолиз. Вероятность появления антител у матери зависит от: Фенотипа плода Иммуногенности антигена Объема ТПК (трансплацентарных кровотечений) Иммунологической способности матери к продуцированию Ат Иммунизация женщин может наступить при беременности и во время родов. Для выработки анти-D антител необходимо от 0, 1 до 250 мл D положительных эритроцитов. Увеличение риска ТПК: Токсикоз беременных, наружное исследование, кесарево сечение, мануальное отделение плаценты, аборты, амниоцентез, взятие проб крови плода.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-57.jpg" alt="> Перенос антител плоду Транспорт антител через плаценту является физиологическим: антитела"> Перенос антител плоду Транспорт антител через плаценту является физиологическим: антитела матери защищают новорожденного от инфекции, т. к. механизм синтеза иммуноглобулинов у плода не сформирован. Антиэритроцитарные антитела, принадлежащие к Ig. M не вызывают ГБН. Антитела Ig. G (субклассы Ig. G 1 и Ig. G 3) вызывают ГБН. Уровень Ig. G антител и тяжесть ГБН взаимосвязаны. Однако, иногда результаты выявления аутоантител бывают отрицательными при наличии ГБН, т. к. количество Ат, которое необходимо для гемолиза in vivo, может быть гораздо меньшим, чем необходимо для обнаружения антител in vitro в прямом антиглобулиновом тесте. До 24 недель беременности перенос Ig. G медленный, поэтому ГБН до этих сроков наблюдается редко. Уровень переноса Ат на более поздних сроках увеличивается, в родах уровень Ig. G плода становится максимальным, большим, чем у матери. Соответственно максимальным становится гемолиз.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-58.jpg" alt=">Гемолиз эритроцитов новорожденного при адекватном лечении – явление проходящее, так как после рождения ребенка"> Гемолиз эритроцитов новорожденного при адекватном лечении – явление проходящее, так как после рождения ребенка прекращается поступление антител от матери. Прямой антиглобулиновый тест (реакция Кумбса) – выявляет антитела матери, фиксированные на эритроцитах плода и новорожденного.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-59.jpg" alt="> ГБН, обусловленная несовместимостью мать-плод по антигенам эритроцитов системы Резус Антигены эритроцитов"> ГБН, обусловленная несовместимостью мать-плод по антигенам эритроцитов системы Резус Антигены эритроцитов системы Резус хорошо развиты на эритроцитах плода к 30 -45 дням беременности. Антигены эритроцитов системы Резус высокоиммуногенны, даже в малых дозах способны вызывать образование иммунных антител. Среди антигенов эритроцитов системы Резус наиболее иммуногенным является антиген D. За ним по активности следуют с, E, C, e (D> c > E > C > e). Причиной 95% случает тяжелого течения ГБН является антиген D (а также антигены с и Е). Чаще всего антитела к антигенам эритроцитов системы Резус относятся к Ig. G субклассов 1 и 3 (Ig. G 1 и Ig. G 3). Колебания в тяжести ГБ, обусловленной анти-D антителами, различны: 50% новорожденных больны в легкой форме, 25% - требуют активного вмешательства и 25% имеют крайне тяжелое течение, часто погибают внутриутробно.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-60.jpg" alt=">Особенности развития иммунологического конфликта мать-плод по антигенам эритроцитов системы АВ 0 А"> Особенности развития иммунологического конфликта мать-плод по антигенам эритроцитов системы АВ 0 А и В антигены присутствуют в тканях эмбриона уже с 5 - 6 недели беременности. Анти-А и анти-В антитела в сыворотке большинства людей представляют собой смесь естественных и иммунных антител (смесь Ig. M и Ig. G). Образование анти-А и анти-В антител Ig. G класса объясняется иммунизацией А и В подобными антигенами, содержащимися в клеточных стенках бактерий. Вероятно, именно с этим связан более высокий процент поражения перворожденных детей гемолитической болезнью, обусловленной АВ 0 несовместимостью. Рано развившиеся АВ 0 антигены на поверхности клеток-предшественников эритроцитов, а также в других эмбриональных тканях, являются мишенью для материнских Анти-А и анти-В антител класса Ig. G.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-61.jpg" alt=">ГБН, обусловленная антигенами АВ 0 развивается довольно часто, хотя тяжелая форма этого заболевания встречается"> ГБН, обусловленная антигенами АВ 0 развивается довольно часто, хотя тяжелая форма этого заболевания встречается редко. Данный факт можно объяснить: Высокой концентрацией А и В растворенных антигенов плода в тканях плаценты, плазме крови плода, околоплодных водах, что обеспечивает значительное ингибирование анти-А и анти-В антител матери. Структура антигенов А и В новорожденных отличается от таковой у взрослых индивидов, поэтому эритроциты плода связывают малое количество антител, даже если антител много. В сыворотке беременных преимущественно содержатся Ig. G 2 анти-А и анти-В антитела, а Fc-рецепторы тканей плаценты более эффективно связывают Ig. G 1.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-62.jpg" alt=">Этот факт объясняет, почему в некоторых случаях у новорожденного наблюдается положительный прямой антиглобулиновый тест"> Этот факт объясняет, почему в некоторых случаях у новорожденного наблюдается положительный прямой антиглобулиновый тест (ПАГТ), а ГБН отсутствует. С другой стороны, бывают случаи, когда при наличии ГБН прямой АГТ – отрицательный. Это обусловлено присутствием антител анти-А, -В Ig. G 3 субкласса, количество которых может быть ниже, чем уровень, выявляемый с помощью ПАГТ. Прямой тест Кумбса не является информативным при диагностике АВ 0 ГБН. Даже при отрицательном прямом АГТ, элюат с эритроцитов новорожденного активно взаимодействует с А и В эритроцитами доноров.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-63.jpg" alt="> Иммуногематологическое обследование новорожденного для диагностики ГБН 1. Определение группы и резус-принадлежности крови"> Иммуногематологическое обследование новорожденного для диагностики ГБН 1. Определение группы и резус-принадлежности крови новорожденного. 2. Проведение прямого антиглобулинового теста с эритроцитами новорожденного. Положительный результат свидетельствует о присутствии на эритроцитах новорожденного фиксированных аллоантител. 3. Выявление Ig. G антител системы Резус и других клинически значимых групп крови в сыворотке матери и новорожденного. 4. Выявление Ig. G антител анти-А, анти-В в сыворотке крови матери при разногруппности матери и плода по системе АВ 0. 5. Исследование элюата, полученного с эритроцитов новорожденного.

Src="https://present5.com/presentation/3/181575498_285939648.pdf-img/181575498_285939648.pdf-64.jpg" alt=">Показанием к проведению заменных трансфузий служит уровень билирубина сыворотки > 340 мкмоль/л. При наличии"> Показанием к проведению заменных трансфузий служит уровень билирубина сыворотки > 340 мкмоль/л. При наличии клинических признаков ядерной желтухи заменные гемотрансфузии проводят при более низком уровне билирубина (300 -340 мкмоль/л). Часто оценивают почасовой прирост билирубина. Показанием для заменных трансфузий является прирост билирубина > 76, 5 мкмоль/л.

Общее количество белка крови 60-80 г/л. Различают несколько белковых фракций, выполняющих специфические функции.

1. Альбумины (40-60 г/л) обладают высокой коллоидно-осмотической активностью.

2. Глобулины a, b, g (20-40 г/л) создают гуморальный иммунитет, образуя различные антитела, называемые иммуноглобулинами (IgM, IgG).

3. Фибриноген (2-4 г/л) - главный фактор механизма свертывания крови.

АНТИГЕНЫ (греч. ànti - против, genos - создавать) - вещества, обладающие способностью вызывать в организме образование антител и вступать с ними в реакцию. В мембрану эритроцитов встроен целый ряд специфических полисахаридов - аминокислотных комплексов, обладающих антигенными свойствами. Эти комплексы называются агглютиногенами.

К настоящему времени в эритроцитах человека обнаружено более 400 антигенов, локализованных в мембране эритроцитов, 140 из которых объединены в 20 генетически контролируемых систем. Остальные антигены являются общими или индивидуальными. Для клинической практики наиболее важны система АВО и резус-система (Rh-система). Выделяют также группы Келл-Челано, Кидд, Лютеран, Даффи, Диего и др. Последние имеют значение лишь при частых переливаниях крови или при беременности, несовместимой по какому-то из этих агглютиногенов. Поэтому переливать повторно кровь от одного и того же донора не рекомендуется.

Антигены эритроцитов появляются на втором месяце эмбрионального развития, однако к моменту рождения ребенка агглютинабельная их активность низка и составляет 1/5 активности взрослых.

АНТИТЕЛА - вещества, вступающие в реакцию с антигеном. Естественные антитела всегда присутствуют в плазме крови и принадлежат к фракции гамма-глобулинов. К ним относятся антитела системы АВО - a и b агглютинины, которые появляются у человека в первые месяцы после рождения и достигают максимального количества к 5-10 годам жизни.

РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ - склеивание и выпадение в осадок эритроцитов под действием специфических аннтител - агглютининов. Полагают, что молекула антитела двумя центрами связывания образует мостик между двумя эритроцитами. Каждый из этих эритроцитов в свою очередь связывается с другими эритроцитами и в результате происходит их склеивание. При переливании несовместимой крови агглютинация приводит к гемолизу эритроцитов и освобождению факторов свертывания крови. Образующиеся сгустки закупоривают мелкие сосуды и тем самым нарушают капиллярное кровообращение.